Свободнорадикальные процессы в крови крыс при умеренной гипотермии и введении даларгина

• Автор: Омарова, Лейла Таджибовна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Махачкала
• Количество страниц: 137 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Влияние холода и гипотермии на интенсивность свободнорадикальных процессов в тканях гомойотермных животных

1.2. Биохимические и физиологические механизмы действия даларгина

1.2.1 Опиоидные пептиды

1.2.2. Опиоидные рецепторы

1.2.3. Фармакокинетика даларгина

1.2.4. Физиологические эффекты даларгина

1.2.5.Антистрессорные эффекты даларгина

1.2.6. Мембраностабилизирующее действие даларгина
1.2.7. Участие даларгина в регуляции свободнорадикальных
процесов
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.2. Постановка экспериментов
2.2.1. Искусственная гипотермия
2.3. Методика инъекций животным
2.4. Препаративные методы исследования
2.4.1. Получение сыворотки, плазмы крови, эритроцитов и их гемолизатов
2.4.2. Выделение мембран эритроцитов
2.4.3. Приготовление гомогенатов тканей
2.5. Биохимические методы исследования
2.5.1. Определение содержания гормонов в плазме крови
2.5.2. Определение содержания мочевой кислоты в плазме
крови
2.5.3. Определение нитритов и нитратов в плазме крови
2.5.4. Определение интенсивности перекисного окисления липидов тканей
2.5.5. Определение содержания малонового диальдегида в плазме крови и эритроцитах
2.5.6. Определение содержания диеновых конъюгатов в
крови
2.5.7. Определение окислительной модификации белков
плазмы крови
2.5.8. Определение окислительной модификации белков мембран эритроцитов
2.5.9. Количественное определение БН-групп в белках и низкомолекулярных тиолах

2.5.10. Определение содержания дисульфидных связей в
белках и низкомолекулярных тиоловых соединениях
2.5.11. Определение общего содержания среднемолекулярных пептидов в плазме крови
2.5.12. Определение содержания железа в сыворотке крови
2.5.13. Определение содержания восстановленного глутатиона
в эритроцитах
2.5.14. Определение антиокислительной активности
гидрофильных компонентов плазмы крови
2.5.15. Определение активности супероксиддисмутазы в эритроцитах
2.5.16. Определение активности каталазы в эритроцитах
2.5.17. Определение гемоглобина в крови аммиачным методом
2.5.18. Определение перекисной резистентности эритроцитов.
2.5.19. Исследование кинетики кислотного гемолиза
2.5.20. Определение интенсивности внутрисосудистого гемолиза
2.5.21. Определение содержания белка в плазме крови биуретовым методом
2.5.22. Количественное определение белка по Лоури
2.6. Статистическая обработка данных
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТА И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Влияние даларгина на содержание стрессорных гормонов
в плазме крови при гипотермии
3.2. Влияние даларгина на интенсивность процессов перекисного окисления липидов тканей в норме
3.3. Влияние гипотермии и даларгина на интенсивность генерации активных форм кислорода
3.4. Влияние гипотермии и введения даларгина на интенсивность процессов перекисного окисления
липидов крови
3.5. Влияние гипотермии и даларгина на интенсивность окислительной модификации белков и содержание среднемолекулярных пептидов в плазме крови крыс
3.6. Влияние гипотермии и введения даларгина на активность компонентов антиоксидантной защиты крови
3.7. Влияние даларгина на степень перекисного гемолиза эритроцитов при гипотермии
3.8. Динамика кислотного и внутрисосудистого гемолиза эритроцитов крыс при гипотермии и введении даларгина.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АКТГ - адренокортикотропный гормон АОА - антиокислительная активность АОС - антиоксидантная система АФК - активные формы кислорода ГЭБ - гематоэнцефалический барьер 2,4-ДНФГ - 2,4-динитрофенилгидразин 2,6-ДХФИФ - 2,6-дихлорфенолиндофенол МДА - малоновый диальдегид
НАДН - никотинамидадениндинуклеотид восстановленный
НАДФ - никотинамидадениндинуклеотидфосфат
НАДФН - никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный
ПОЛ - перекисное окисление липидов
СМП - среднемолекулярные пептиды
СОД - супероксиддисмутаза
СРП - свободнорадикальные процессы
ТБК - тиобарбитуровая кислота
99мТс-ПФ - радиоактивный пирофосфат технеция
ТНС - тетразолиевого нитросиний
ТХУ - трихлоруксусная кислота
цАМФ - циклический аденозин монофосфат
цГМФ - циклический гуанозин монофосфат
ЦНС - центральная нервная система
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
ОБН - восстановленный глутатион
N0 - оксид азота
ОКБ! - опиоидподобный рецептор

отношении уровня креатинфосфаткиназы указанная закономерность проявлялась через 8 и 12 ч после стрессирования. Стимуляция р- и 5-опиатных рецепторов при помощи внутривенного введения даларгина (0,1 мг/кг) способствовала повышению резистентности сердца к повреждающему действию тяжелого стресса, о чем свидетельствовало достоверное, по сравнению с группой контроля, снижение накопления кардиомиоцитами меченого технецием пирофосфата (Реброва и др., 2005). По мнению авторов, вводимый энкефалин не оказывает прямого мембраностабилизирующего эффекта на миокард, а тормозит развитие чрезмерно интенсивной стресс-реакции, в частности способствует уменьшению секреции избытка адреналовых веществ, способных при стрессе стимулировать ПОЛ, а также активацию липаз и фосфолипаз, повреждающих мембраны кардиомиоцитов.
В.М. Демидов и С.В. Циповяз (2001) исследовали влияние даларгина и его липосомальной формы на состояние мембран эритроцитов при остром экспериментальном панкреатите у крыс. Результаты показали, что внутрибрюшинное введение даларгина (50 мкг/кг) животным с острым экспериментальным панкреатитом предупреждало изменение перекисной резистентности эритроцитов. При этом более эффективным оказалась липосомальная форма даларгина, которую связывают с удлинением его действия в кровеносном русле.
Исследования, проведенные с использованием флуоресцентных зондов, показали, что в условиях умеренной гипотермии даларгин стабилизирует структурно-динамические характеристики мембран (Эмирбеков и др., 2005). Пептид предупреждает при гипотермии изменение микровязкости зон белок-липидных контактов и эффективности безызлучательного переноса энергии с мембранных триптофанилов на пирен, т.е. препятствует изменению степени погруженности белков в липидный бислой. Такой эффект пептида авторы объясняют снижением степени окислительной модификации мембранных белков и липидов в их