Биохимические особенности антиоксидантных систем разнотолерантных к соли генотипов картофеля in vitro

• Автор: Киёмова, Зарафо Суфижоновна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Душанбе
• Количество страниц: 98 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Стресс и его воздействие на растения

1.2. Активные формы кислорода и пути их образования

1.3. Антиоксидантная система защиты растений

1.4. Ферменты антиоксидантной системы защиты растений

1.5. Влияние стрессорных факторов на фермент

супероксиддисмутазу (СОД, КФ 1.15.1.1)

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Краткая характеристика объекта исследований
2.2. Оптимальные условия для произрастания картофеля
2.3. Материалы и методы исследований
2.3.1. Скрининг in vitro в условиях солевого стресса
2.3.2. Окислительный стресс
2.3.3. Определение содержания аскорбиновой кислоты
2.3.4. Определение количественного содержания
малонового диальдегида
2.3.5. Определение активности супероксиддисмутазы
2.3.6. Определение содержания активной формы кислорода
2.3.7. Определение относительного содержания воды
2.3.8. Определение водного дефицита
2.3.9. Определение содержания пролина
2.3.10. Выделение и очистка хлоропластов и митохондрий
2.3.11. Определение содержания перекиси водорода
2.3.12. Определение содержания НАДФ
2.3.13. Определение содержание хлорофилла
2.3.14. Полевые опыты
2.3.15. Статистическая обработка данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Отбор гибридов картофеля на устойчивость к N
3.2. Накопление активных форм кислорода и перекиси
водорода в разнотолерантных растениях картофеля
3.3. Содержание малонового диальдегида (МДА) у разнотолерантных к соли генотипов картофеля
3.4. Активность ферредоксин-НАДФ-оксидоредуктазы (Фд-НАДФ-ОР, КФ: 1.6)
3.5. Роль пролина в проявлении устойчивости у растений картофеля
3.6. Содержание хлорофилла и каротиноидов у различных генотипов картофеля в условиях стресса
3.7. Активность СОД в органеллах клетки разнотолерантых
к соли генотипов картофеля
3.8. Равновесие системы прооксиданты-антиоксиданты
ГЛАВА 4. ИЗУЧЕНИЕ ВОДНОГО ДЕФИЦИТА РАЗНОЧУВСТВИТЕЛЬНЫХ К СТРЕСС У ГЕНОТИПОВ
КАРТОФЕЛЯ
ЗАКЛЮЧЕНИЯ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ:
а- НУК - а-нафтилуксусную. кислоту; а-ТОФ - а токоферол;
АОА - антиоксидантная активность;
АОЗ - антиоксидантная защита;
АФК - активные формы кислорода;
ГП - глутатионпероксидаза;
ИМК - индол ил-3-масляная кислота КАТ- катал аза
МДА- малоновый диальдегид;
МС - Мурасиге - Скуга;
НАДФ - никотинамидадениндинуклеотидфосфат;
ПА - полиамин;
ПО - пероксидаза;
ПОЛ - перекисное окисление липидов;
СОД - супероксиддисмутаза;
Фд-НАДФ-ОР - ферредоксин-НАДФ-оксидоредуктаза
ЭТЦ - электрон-транспортная цепь
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

увеличению поглощения при 580нм в расчете на 1г сырой массы (Doke, 1983).
2.3.6. Определение относительного содержания воды
Относительное содержание воды (ОСВ) - показатель, который может быть использован для характеристики водообеспеченности растения, по методике (Barrs, et al., 1962). Высокий уровень ОСВ сопровождается уменьшением водного дефицита, и, наоборот, уменьшение его приводит к увеличению водного дефицита
Для измерения относительного содержания воды (ОСВ) использовали листья из каждого варианта (через 24 ч действия стресса). Определяли начальный сырой вес (сыр. В), затем выдерживали при 5°С в течение 24 ч для насыщения клеток водой (в пробирку) и определяли их вес после насыщения (НВ), после чего листья высушивали в течение 48 ч при 70°С и определяли сухой вес (сух. В)
ОСВ рассчитывали по формуле: ОСВ - (сыр. В- сух. В)/(НВ - сухВ).
2.3.7. Определение содержания пролина
Пролин определяли по методу (Bates, et al., 1973). Пробы для определения пролина брали после пятидневного солевого стресса у разночувствительных растений картофеля (№ 1- сорт Файзабад - устойчивый к соли и клон-гибрид № 25-чувствительный к соли). 0,3г сырого веса пробирочных растений из каждого варианта растирали с 3 мл 3% водного раствора сульфосалициловой кислоты и фильтровали через фильтровальную бумагу. Фильтрат (2мл) смешивали с 2 мл кислого нингидрина и 2 мл ледяной уксусной кислоты. Пробирку с реактивами помещали на водяную баню на 1 ч при 100°С.
Реакционную смесь экстрагировали 4мл толуола, затем отбирали верхний хромофор, содержащий толуол, охлаждали до комнатной температуры и измеряли оптическую плотность при 520 нм на