Влияние мелатонин-корригирующих препаратов-мелаксена и вальдоксана, на свободнорадикальный гомеостаз при синдроме тиреотоксикоза

• Автор: Горбенко, Марина Владимировна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 168 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Щитовидная железа и тиреоидные гормоны
1.1.1. Физиологическая роль гормонов
1.1.2. Синтез, секреция и метаболизм тиреоидных гормонов
1.1.3. Транспорт тиреоидных гормонов
1.1.4. Синдром гиреоитоксикоза
1.1.5. Генерация активных форм кислорода
при тиреотоксикозе
1.2. Механизм образования и роль свободных радикалов
1.3. Система защиты организма от действия
активных форм кислорода
1.3.1. Ферментативное звено антиоксидантної! системы
1.3.1.1. Супероксиддисмутаза и каталаза
1.3.1.2. Роль системы глутатиона в процессах
антиоксидантної! защиты
1.3.1.3. Характеристика КАІЗРН - генерирующих ферментов
1.3.2. Неферментативное звено антиоксидантной системы
1.4. Мелатонин - корригирующие препараты
1.4.1. Мелатонин и эпифиз
1.4.2. Физиологические функции мелатонина
1.4.3. Антиоксидантная активность мелатонина
1.4.4. Применение мелатонина в качестве лечебного препарата
при различных заболеваниях
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ГЛАВА 2 ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.2. Характеристика выборки больных с гинертиреозом

2.3. Методы исследования
2.3.1. Создание модели гипертиреоза у крыс
2.3.2. Подготовка материала для исследования
2.3.3. Измерение активности ферментов
2.3.3.1. Определение активности ферментов сопряженных с окислительно - восстановительными превращениями NAD NADP
2.3.3.1.1. Определение активности глутатионнероксидазы
2.3.3.1.2. Определение активности глутатионредуктазы
2.3.3.1.3. Определение активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы
2.3.3.1.4. Определение активности NADP - зависимой Изоцитратдегидрогеназы
2.3.3.2. Определение активности глутатионгрансферазы
2.3.3.3. Определение активности аконитатгидрагазы
2.3.3.4. определение активности супсроксиддисмутазы
2.3.3.5. Определение активности каталазы
2.3.4. Определение содержания компонентов неферментативной антиоксидантной системы
2.3.4.1. Определение концентрации восстановленного глутатиона
2.3.4.2. Определение содержания цитрата
2.3.5. Оценка оксидативного статуса
2.3.5.1. Определение интенсивности биохемилюминесцснции
2.3.5.2. Определение содержания диеновых коныогатов
2.3.5.3. Оценка окислительной модификации белков
2.3.6. Унифицированный метод определения содержания общего белка но биурстовой реакции
2.3.7. Определение степени фрагментации ДНК
2.3.8. Электрофорез ДНК
2.3.9. Определение уровня экспрессии генов
2.3.9.1. Выделение тотальной РНК

Обратная транскрипция и полимеразная цепная реакция
Статистическая обработка экспериментальных данных
ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ИНТЕНСИВНОСТИ СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОГО ОКИСЛЕНИЯ И ОБЩЕЙ АНТИОКСИДАНТНОЙ АКТИВНОСТИ ПРИ ДЕЙСТВИИ МЕЛАКСЕНА И ВАЛЬДОКСАНА НА ФОНЕ РАЗВИТИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ГИПЕРТИРЕОЗА
Интенсивность свободнорадикальных процессов в тканях крыс
в условиях нормы, при гипертиреозе и действии мелакссна и
вальдоксана
Влияние мелаксена и вальдоксана па активность
супероксиддисмутазы и каталазы в различных тканях крыс при
гипертиреозе
Влияние протекторов на активность глутатионового звена
антиоксидантной системы в тканях крыс при гипертиреозе
Экспрессия глутатионредуктазы, глутатионпероксидазы,
супероксиддисмутазы и каталазы в тканях крыс при
экспериментальном гипертиреозе и действии мелатонин -
корригирующих препаратов
Влияние мелаксена и вальдоксана на активность некоторых
НАДФН-продуцирующих ферментов в тканях крыс при
гипертиреозе
Влияние протекторов на активность аконитазы и содержание
цитрата в тканях крыс при гипертиреозе
ГЛАВА 4 ВОЗДЕЙСТВИЕ МЕЛАКСЕНА НА СВОБОДНОРАДИКАЛЬНОЕ ОКИСЛЕНИЕ И
ФУНКЦИОНИРОВАНИЕ АНТИОКСИДАНТНОЙ
СИСТЕМЫ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ БОЛЬНЫХ С СИНДРОМОМ ТИРЕОТОКСИКОЗА
Влияние мелаксена на параметры биохемилюминесценции в
сыворотке крови больных с синдромом тиреотоксикоза

межмембранном пространстве митохондрий, в цитоплазме и ядре нервных клеток. Фермент чувствителен к цианиду, представляет собой металлопротеид, состоит из двух субъединиц, каждая из которых связывает 1 атом Си и 1 атом Zn, имеет внутри цени дисульфидный мостик, одну сульфгидрильную группу и ацетилированную концевую аминогруппу [225].
Для каталитической активности фермента нужны ионы меди [228]. Ионы цинка прямо не участвуют в реакции дисмутации и выполняют структурную роль, обеспечивая конформацию белка, необходимую для работы активного центра фермента [106].
Мп-СОД локализована в митохондриях печени и миокарда эукариот, вблизи анионных каналов. Оба фермента состоят из двух субъединиц, имеют близкий аминокислотный состав [128, 229]. Железо-содержащая СОД обнаружена только у прокариот.
Описанные выше изоферментные формы СОД являются внутриклеточными ферментами, в межклеточной жидкости они разрушаются в течение 5-10 минут. В то же время обнаружена экстрацеллюлярная высокомолекулярная форма СОД (ММ 120 ООО Д), хорошо связывающаяся гепаринсульфатом гликокаликса эндотелиоцитов. Она представляет собой гликопротеид, состоящий из двух димеров, соединенных дисульфидным мостиком. Каждая из 4 - х субъединиц имеет молекулярную массу около 30 кДа, содержит ионы меди и цинка. Все субъединицы фермента имеют одинаковую аминокислотную последовательность [213]. Субъединицы экстрацсллюлярной и цитоплазматической Си-, Кп-СОД отличаются аминокислотным составом, антигенными свойствами [168], генным локусом, кодирующим аминокислотную последовательность апофермента. Высокий уровень экстрацеллюлярной СОД обнаружен в легких, сердце, почках, плаценте. Ингибируется цианидом, инактивируется Н2О2. Ионы железа блокируют секрецию фермента. Экстрацеллюлярной СОД отводят роль основного регулятора биоактивности N0 [121].