Изучение механизмов регуляции разобщающего действия жирных кислот в митохондриях печени крыс

• Автор: Марчик, Евгений Игоревич
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Йошкар-Ола
• Количество страниц: 128 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. ХЕМИОСМОТИЧЕСКАЯ ТЕОРИЯ СОПРЯЖЕНИЯ ОКИСЛЕНИЯ И СИНТЕЗА АТР В МИТОХОНДРИЯХ ДЕЙСТВИЕ РАЗОБЩИТЕЛЕЙ

1 ОКИСЛИТЕЛЬНОГО ФОСФОРИЛИРОВ АНИЯ

1.2. ПАССИВНАЯ УТЕЧКА ПРОТОНОВ ЧЕРЕЗ ВНУТРЕННЮЮ МЕМБРАНУ МИТОХОНДРИЙ: МЕХАНИЗМЫ, ПУТИ РЕГУЛЯЦИИ И ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ ЗНАЧЕНИЕ
1.3. РАЗОБЩЕНИЕ ЖИРНЫМИ КИСЛОТАМИ ОКИСЛИТЕЛЬНОГО ФОСФОРИЛИРОВАНИЯ В МИТОХОНДРИЯХ ЖИВОТНЫХ

1.3.1. Са2+-зависимое разобщающее действие жирных кислот

1.3.2. Ионофорное разобщающее действие жирных кислот

1.3.3. Протонофорное разобщающее действие жирных кислот при участии

1 белков-переносчиков метаболитов внутренней мембраны митохондрий
1.3.4’. Механизмы .регуляции протонофорного разобщающего действия жирных кислот
2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Выделение митохондрий из печени крыс
2.2. Регистрация дыхания суспензии митохондрий
2.3. Регистрация разности электрических потенциалов на внутренней мембране митохондрий (АЕ)
2.4. Определение разобщающей активности жирных кислот
1 2.5. Статистическая обработка результатов исследований
2.6. Реактивы
3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Исследование зависимости доли участия в разобщении АБР/АТР- и аспартат/глутаматного антипортеров от концентрации пальмитиновой и лауриновой кислот
3.2. Сравнение действия различных предельных жирных кислот как
I индукторов и регуляторов разобщения окислительного фосфорилирования при
участии АБР/АТР- и аспартат/глутаматного антипортеров в митохондриях печени
3.3. Влияние неорганического фосфата и нигерицина на разобщающее действие пальмитиновой кислоты при участии АБР/АТР- и аспартат/глутаматного антипортеров в митохондриях печени
3.4. Сравнительное исследование эффектов неорганического фосфата и мерсалила на разобщающее действие пальмитиновой кислоты при участии АБР/АТР- и аспартат/глутаматного антипортеров в митохондриях печени
1 истощенных по эндогенным субстратам окисления
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ и символов.
ААА - ADP/ATP-антипортер;
АГА - аспартат/глутаматным антипортер;
БСА - бычий сывороточный альбумин;
ДНФ - 2,4-динитрофенол;
Катр - карбоксиатрактилат;
РБ - разобщающие белки;
АТР - аденозин-5’-трифосфат;
ADP - аденозин-5’-дифосфат;
EGTA— этиленгликоль - бис - (2-аминоэтиловый эфир) - N, N, N', N' -тетрауксусная кислота;
FCCP - л-трифторометоксикарбонилцианидфенилгидразон;
MOPS - 4-морфолинопропансульфоновая кислота;
Р; - неорганический фосфат;
SF6847 - 3,5-ди-треот-бутил-4-гидроксибензилиденмалононитрил;
ТРР+- тетрафенилфосфоний;
Tris — /ирмс(оксиметил)аминометан;
ДцЬЙ - разность электрохимических потенциалов ионов водорода на внутренней мембране митохондрий;
ДрН - разность концентраций ионов водорода по на внутренней мембране митохондрий;
ДТ - разность электрических потенциалов на внутренней мембране митохондрий.

митохондрий млекопитающих состоит из 312 аминокислот (Dolce et al., 1993; Ferreira and Pedersen, 1993).
1.3.4. Механизмы регуляции протонофорного разобщающего действия жирных кислот.
Если протонофорное разобщающее действие жирных кислот в митохондриях печени при участии ADP/ATP- и аспартат/глутаматного антипортеров имеет важное физиологическое значение, то этот процесс должен регулироваться в широких пределах. В настоящее время известны различные механизмы регуляции, разобщающего- действия жирных кислот в митохондриях при участии этих переносчиков (Schonfeld et al., 1997; Skulachev,-1998; Самарцев, 2000; Самарцеви Кожина, 2008;'2010).
Одним из основных механизмов, регуляции разобщающего действия жирных кислот представляется изменения? количества белков-переносчиков; принимающих участие в разобщении. Так было установлено, что при-гипертиреозе, вызванном введением животным трийодтиронина, наблюдается увеличение количества молекул ADP/ATP антипортера в митохондриях печени и- это- сопровождается, увеличением составляющей разобщающей активности жирных кислот чувствительной к карбоксиатрактилату (Schonfeld et al., 1997). Было также показано, что в митохондриях скелетных мышц королевских пингвинов, при адаптации к холоду увеличивается; количество молекул ADP/ATP антипортера и это сопровождается усилением разобщения окислительного фосфорилирования (Talbor et al., 2004).
Кожиной О.В. и Самарцевым В.Н. было установлено, что одним из важных факторов регуляции протонофорного разобщающего действия жирных кислот является окислительный стресс, индуцируемый в митохондриях печени как действием одного из. окисляющих агентов- трет-бутилгидропероксида, так и эндогенными процессами при старении животных (Кожина и др., 2007; Самарцев и Кожина, 2008; Кожина и Самарцев, 2010). Эти авторы показали, что в митохондриях печени крыс зрелого и старческого