Воздействие цитрата на свободнорадикальный гомеостаз в тканях крыс при патологических состояниях, сопряженных с окислительным стрессом

• Автор: Саиди, Лайла
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 202 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Свободнорадикальное окисление бномолекул и антиоксндантные системы организма '

1.1.1. Свободные радикалы: образование, роль в организме

1.1.2. Свободнорадикальное окисление биомолекул

1.1.2.1. Пероксидное окисление липидов и его роль в живых организмах

1.1.2.2. Окислительная модификация белков

1.1.2.3. Свободнорадикальное повреждение нуклеиновых кислот

1.1.3. Антиоксидантная система организма
1.1.3.1. Ферментативные антиоксиданты
1.1.3.2. Характеристика некоторых НАДФН-генерирующих
ферментов
1.1.3.3. Макромолекулярные неферментативные антиоксиданты
1.1.3.4. Ннзкомолекулярные неферментативные антиоксиданты
1.1.4. Роль ионов некоторых металлов в протекании
свободнорадикальных процессов
1.2. Токсические гепатиты: этиология, роль свободнорадикальных процессов в развитии
1.2.1. Роль апоптоза в развитии токсического повреждения печени
1.3. Гипертиреоз
1.3.1. Влияние тиреоидных гормонов на свободнорадикальное окисление и апоптоз
1.4. Цитрат: метаболизм, физиолого-биохимическое значение, ферменты, участвующие в метаболизме
E l I < It! It III llll t lilt I t ill 11 HI! i 111 i I Hi I tt t I 1 ‘

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объект исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Создание моделей патологических состояний и введение
цитрата
2.2.2. Получение сыворотки крови, гомогената печени и сердца крыс
2.2.3. Определение активности аланинаминотрансферазы и аспартат-аминотрансферазы
2.2.4. Определение активности креатинкиназы-МВ
2.2.5. Определение параметров биохемилюминесценции
2.2.6. Определение содержания диеновых конъюгатов
2.2.7. Исследование степени фрагментации ДНК
2.2.8. Определение активности ферментов
2.2.8.1. Определение активности глутатионпероксидазы
2.2.8.2. Определение активности глутатионредуктазы
2.2.8.3. Определение активности глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы
2.2.8.4. Определение активности НАДФ-изоцитратдегидрогеназы
2.2.8.5. Определение активности супероксиддисмутазы
2.2.8.6. Определение активности каталазы
2.2.8.7. Определение активности аконитазы
2.2.8.8. Определение активности цитратсинтазы
2.2.9. Определение содержания глутатиона
2.2.10. Определение содержания га-токоферола
2.2.11. Определение содержания белка
2.2.12. Очистка глутатионпероксидазы и глутатионредуктазы из
печени крыс и исследование свойств ферментов
2.2.12.1. Фракционирование белков с помощью сульфата аммония
2.2.12.2. Г ель-фильтрация на сефадексе G
2.2.12.3. Ионообменная хроматография на ДЭАЭ-целлголозе
2.2.12.4. Исследование кинетических характеристик и регуляции активности фермента
2.3. Статистическая обработка результатов ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫХ СВОЙСТВ ЦИТРАТА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ
3.1. Влияние цитрата на активность ферментов-маркеров цитолиза гепатоцитов в сыворотке крови крыс при токсическом поражении печени
3.2. Исследование интенсивности свободнорадикальных процессов в тканях крыс при действии цитрата на фоне развития токсического гепатита
3.3. Оценка степени фрагментации ДНК в печени крыс при тетрахлорметановом гепатите и введении цитрата
3.4. Активность супероксиддисмутазы и каталазы в тканях крыс при введении цитрата на фоне развития токсического гепатита
3.5. Влияние цитрата на активность глутатионовой антиоксидантной системы в тканях крыс при тетрахлорметановом гепатите
3.6. Влияние цитрата на активность НАДФН-генерирующих ферментов в тканях крыс при токсическом поражении печени
3.7. Активности аконитатгидратазьт и цитратсинтазы в тканях крыс при тетрахлорметановом гепатите и введении цитрата
3.8. Влияние цитрата на содержание а-токоферола в печени и сыворотке крови крыс на фоне развития экспериментального токсического гепатита
ГЛАВА 4. ИССЛЕДОВАНИЕ ВЛИЯНИИ ЦИТРАТА НА ОКСИДАТИВНЫЙ СТАТУС ТКАНЕЙ КРЫС ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ГИПЕРТИРЕОЗЕ
4.1. Влияние цитрата на активность ферментов-маркеров цитолитического синдрома в сыворотке крови животных с

сроками беременности [222,175,240]. При наследственных заболеваниях, связанных с уменьшением количества ЦП, - болезни Вильсона-Коновалова, ацерулоплазминемии — многие клетки организма, в том числе клетки нервной ткани, подвергаются токсическому действию железа и меди. Избыток меди в стенках сосудов способствует развитию атеросклероза [48,235].
Концентрация ЦП в сыворотке может иметь важное диагностическое значение, например, как показатель протекания воспалительного процесса -ЦГ1 относится к острофазным белкам. Концентрация ЦП в крови повышается во время воспаления, инфекции и продолжительных травматических состояний в результате активации транскрипции гена ЦП, индуцированной интерфероном и цитокинами [213]. При дефиците железа происходит активация транскрипции гена ЦП гиноксия-индуцибельным фактором 1 (НИМ), который также активирует гены эритропоэтина, оксигеназы-1 гема, трансферрина и его рецептора [274].
ЦП используется как медицинский препарат - в качестве основного антиоксиданта крови, стимулятора гемопоэза [330], уменьшающего интоксикацию и иммунодепрессию [272,104].
Каталаза (КФ 1.11.1.6.) ускоряет процесс двухэлектронного восстановления пероксида водорода до воды, используя Н2О2 как донор электрона:

Ре -каталаза + 2Н2О2 = окисленная каталаза + Н2О2
= Ре3 -каталаза + 2Н20 + 02 (или 2Н202 —> 2Н20 + 02).
В окисленном состоянии каталаза работает и как пероксидаза: окисленная каталаза + Н202 + АН2= Ре3+-каталаза + 2Н20 + А, где АН2 - донор электронов [106].
Субстратами в пероксидазной реакции могут быть этанол, метанол, формиат, формальдегид и другие доноры водорода. Тип протекаемой реакции зависит от концентрации в реакционной среде пероксида водорода. При его высоких концентрациях протекает реакция каталазного типа, а при низких — пероксидазного.
Каталаза обнаружена практически у всех эукариот и всех облигатно и факультативно аэробных прокариот. Однако многие строгие и