Эффекты синергизма в совместном действии -токоферола и ферментативных антиоксидантов при окислении модельных гетерогенных липидных систем in vitro в присутствии биологически активных олигопептидов

• Автор: Болдырева, Юлия Викторовна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Тюмень
• Количество страниц: 150 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Биологическое действие пептидов

1.2. Механизмы инициирования процессов свободнорадикального окисления липидов. Активные формы кислорода

1.3. Ферментативные антиоксидантные системы организма

1.4. Система низкомолекулярных ингибиторов окисления - природных антиоксидантов

1.5. Современные представления о механизме процесса свободнорадикального окисления in vitro
1.6. Современные представления об эффектах синергизма и антагонизма !
в совместном действии антиоксидантов
1.7. Современные представления о синергической активности аскорбиновой кислоты
Глава 2. Материалы и методы
Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1. Исследование антиоксидантной активности индивидуальных олигопептидов
3.2. К механизму действия олигопептидов
3.3. Изучение совместного антиоксидантного действия а-ТФ, Р-каротина и антиоксидантных ферментов с биологически активными олигопептидами
Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы
Приложение

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
а-ТФ - а-токоферол
а-Тф-О’ - токофероксильный радикал
(5-К - Р-каротин
АИБН - азобисизобутиронитрил
АК - аскорбиновая кислота
АКМ - активированные кислородные метаболиты
АО - антиоксидант, антиоксидантний
АОА - антиоксидантная активность
АРА - антирадикальная активность
АФК - активные формы кислорода
ГПО - глутатионпероксидаза
ГТ - глутатионтрансфераза
ДДС-Ыа - додецилсульфат натрия
ЛНП - липопротеины низкой плотности
МО - метиловый эфир олеиновой кислоты (метилолеат)
ПАВ - поверхностно-активные вещества
ПОЛ - пероксидное окисление липидов
ПХ - пероксидаза хрена
РП - регуляторные пептиды
СОД - супероксиддисмутаза
СФ - спектрофотометр, спектрофотометрически
УФ - спектроскопия - ультрафиолетовая спектроскопия
УХ - убихиноны
ФАО - ферментативные антиоксиданты
ФЛ - фосфолипиды
ХЛ - хемилюминесценция, хемилюминесцентный
ЭПР - электроно-парамагнитный резонанс

-----------------ВВЕДЕНИЕ---------
Актуальность проблемы. В последнее десятилетие отмечается повышенный интерес к изучению широкого круга индивидуальных олигопептидов, эффективных в качестве органоспецифических биорегуляторов; адапто-генов, нейропротекторов, соединений, проявляющих гормональную активность, выраженное антимикробное действие [16,95,104,158], Считают, что регуляторные пептиды (РП) отвечают за первичное реагирование организма, запуск систем защиты в ответ на действие факторов внешней и внутренней среды [10,99,283]. Показано, что нарушение пептидной регуляции на стадии биосинтеза РП и переноса информационно значимых молекул между клетками ведет к снижению устойчивости организма, способствует развитию патологий и ускоренному старению организма [127,275]. Концепция пептидной биорегуляции получила в последние годы признание в качестве перспективного направления современной медицины [107,157,274].
Механизм действия эндогенных олигопептидов в настоящее время недостаточно изучен. Считают, что регуляторные олигопептиды изменяют функциональную активность генома, воздействуют на процессы транскрипции м-РНК, кодирующих синтез специфических клеточных белков и пептидов, регулирующих гомеостаз клетки [37,80]. Существует мнение об участии пептидов в регуляции апоптоза патологически измененных клеток [73,101,105,287].
Известна гипотеза об антиоксидантной активности (АОА) эндогенных пептидов, трактующая их эффекты в рамках теории свободнорадикального окисления [13,77]. Так, карнозин и эпиталон проявляли антирадикальную активность в реакции со стабильными радикалами 1,1-дифенил-2-пикрил-гидразина [82], но ряд других пептидов, напротив, ускоряли окисление. Установлена способность карнозина и анзерина тушить синглентный кислород [23,24]. Известна роль глутатиона в процессе окисления ненасыщенных липидов [60]. Антиоксидантное (АО) действие ряда олигопептидов констатиро-

2 группу составляют смеси, в которых активные группировки АО являются малоэффективными ввиду образования комплексов с межмолекулярными водородными связями (между оксо-группой хинона и гидроксильной группой ТФ).
3 группа объединяет гетерогенные системы ингибиторов, в которых в результате мицеллообразования активная группа АО оказывается спрятанной внутри мицеллы. В результате не происходит взаимодействие АО с радикалами.
Как правило, снижение концентрации или активности одних АО приводит к изменению других, благодаря чему сохраняется общая активность радикальных окислительных процессов, жизненно важных для структурного гомеостаза. В условиях живого организма АО работают в комплексе [100].
Большое распространение АО, синергизм и антагонизм при их взаимодействии, а также специфичность в отношении определенных форм активированных кислородных метаболитов (АКМ) создают трудности их определения не только в системах in vitro, но и - in vivo. Делаются попытки найти интегральные показатели, характеризующие активность АО систем в целом. Сложность этого в том, что активность каждого АО зависит от среды и условий' его функционирования [15,175]. Еще одной причиной является взаимозависимость содержания и активности АО, объединенных в АО системы [14]. Действие некоторых АО может инвертироваться при изменении их содержания, более того, описан феномен влияния сверхмалых доз (10"15-10"18 М) АО препаратов [26,30,32].
Таким образом, проблема синергизма, антагонизма, аддитивности при взаимодействии различных АО и субстратов требует дальнейшего изучения.
1.7. Современные представления о синергической активности аскорбиновой кислоты
Наряду с ФАО системой защиты организма активное участие в борьбе со свободными радикалами принимает аскорбиновая кислота (АК), выступая в роли синергиста окисления.
Содержание АК в плазме в норме составляет 20-60 мкМ. Многие клетки имеют механизмы активного транспорта АК, поэтому в клетках она может накапливаться в миллимолярньгх концентрациях. АК (витамин С) обнаружен