Изучение роли IL-17 в патогенезе псориатического процесса

• Автор: Стародубцева, Наталия Леонидовна
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 145 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА 1. ПСОРИАЗ: ХАРАКТЕРИСТИКА ЗАБОЛЕВАНИЯ,

ГЕНЕТИКА И ИММУНОПАТОГЕНЕЗ ПАТОЛОГИИ

1.1 Клиническая картина заболевания

1.1.1 Гистопатология и молекулярная биология измененных

псориатическим процессом тканей и клеток

1.1.2 Стадии псориатического процесса и сопутствующие

заболевания
1.2 Эпидемиология псориаза
1.3 Генетика псориаза
1.3.1 Наследование псориаза
1.3.2 Исследование изменения генома при псориазе
1.4 Иммунопатогенез псориаза
1.4.1 «Цитокиновая» модель псориатического процесса
1.4.2 Роль ІБ-17 и ІЬ-23 в патогенезе псориаза
1.4.3 Современные методы лечения псориаза
1.5 Транскрипционный комплекс АР
1.5.1 Характеристика транскрипционного фактора АР
1.5.2 Регуляция АР
1.6 Матриксные металлопротеазы и их роль при псориазе
1.6.1 Молекулярная структура металлопротеаз
1.6.2 Члены семейства ММР
1.6.3 Регуляция транскрипции генов ММР
1.6.4 Роль матриксных металлопротеаз при псориазе
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Методика биоинформационного исследования
2.2 Исследование экспрессии генов у пациентов с псориазом
2.3 Работа с клетками
2.4 Ингибирование процесса передачи сигнала от лиганда к рецептору антителами к ІЬ-17КА
2.5 Иммуногистохимия
2.6 Дот-блоттинг
2.7 Иммуноцитохимия

2.8 Обработка данных
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Биоинформационный анализ
3.2 Определение уровней экспрессии ключевых генов, участвующих в
пути передачи сигнала от 1Ь-17 у пациентов с псориазом
3.2.1 Сравнение профиля экспрессии генов в пораженной коже при псориазе с профилем экспрессии в непораженной коже
3.2.2 Исследование экспрессии измененных при псориазе генов после воздействия на кожу низкоинтенсивным лазерным излучением
3.2.3 Исследование экспрессии генов после лечения пациентов интерференционными токами
3.3 Определение накопления белков исследуемых генов в пораженной и
визуально непораженной коже при псориазе
3.4 Изучение уровня матриксных металлопротеаз при индукции
кератиноцитов интерлейкином
3.4.1 Определение уровня экспрессии генов ММР-1, ММР-2, ММР-9 и ММР-12 в культуре первичных кератиноцитов человека при действии 1Ь
3.4.2 Определение уровня экспрессии ММР-1, ММР-2, ММР-9 и ММР-12 в культуре иммортализованных кератиноцитов человека (линия НаСаТ) при действии 1Ь
3.5 Ингибирование процесса передачи сигнала от лиганда к рецептору
антителами 1Ь-17КА
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
Th Т-хелпер
CE роговой конверт
DIT ДТТ, дитиотриэтол
EDTA ЭДТА, этилендиаминтетраацетат
EGF эпидермальный фактор роста
(ROR)yt/a RAR-родственные сиротские ядерные рецепторы yt/a ретиноидной кислоты
GM-CSF гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор
BCL-3 онкобелок В-клеточной хронической лимфоцитарной лейкемии
IFN-y интерферон-у
IL интерлейкин
APCs антиген-презентирующие клетки
PDGF фактор роста тромбоцитов
VEGF фактор роста сосудистого эпителия
PDGF тромбоцитарный фактор роста
CXCL лиганд семейства СХС хемокинов
CCL лиганд семейства СС хемокинов
TLR толл-подобные рецепторы
TIR толл-интерлейкин-1 репторный домен
TILL TIR-подобная петля
МАРК активируемые митогенами протеинкиназы
MYD88 белок 88 первичного ответа миелоидной дифференциации
TRIF TIR домен-содержащий адапторный белок
CCAAT ЦЦААТ-бокс (консенсусная последовательность ДНК)
C/EBP ССААТ/энхансер-связывающиеся белки (транскрипционный фактор)
TNF- a фактор некроза опухоли-а
TRAF ассоциированный с TNF-рецепторами фактор
NF-kB ядерный фактор “каппа-би”
TGFa/p трансформирующий фактор роста а/р
NGF фактор роста нервов
ACT1 активатор 1 транскрипционного фактора NF-kB
мне главный комплекс гистосовместимости
LOR лорикрин
IVL инволюкрин
SPRPs небольшие богатые пролином белки гены
LCEs и белки последней стадии образования рогового слоя
FLG филлагрин і
TCHH трихогиалин
HRNR хорнерин |
пути передачи сигнала [Plenge RM et al., 2007]. За последние годы был список цитокинов, хемокинов и ростовых факторов, присутствующих в псориатических бляшках, значительно увеличился [Lew W. et al., 2004; Zhou X. et al., 2003]. Доказательством гипотезы о важной роли TNF-a в иммунопатогенезе псориаза стали успехи в лечении псориаза агентами, высокоспецифичными к TNF-a [Krueger JG, 2002; Gottlieb AB, 2005]. Это привело к ошибочному предположению, что, нейтрализуя активность одного единственного цитокина, можно лечить такое сложное многофакторное заболевание, как псориаз. Следует отметить, что TNF-a имеет различные биологические эффекты и вовлечен в сложную цепь взаимодействий с другими цитокинами. Тем не менее, ключевая роль TNF-a в процессе воспаления при псориазе имеет многочисленные клинические подтверждения [Nash РТ and Florin TH, 2005].
В псориатических бляшках постоянная активация Т-клеток имеет сходные черты с ТЫ типом развития воспалительного ответа [Ferenczi K. et al., 2000], кроме того, в иммунопатогенез вовлечены и Т-клетки, экспрессирующие рецепторы натуральных (естественных) киллеров (NK) [Holm SJ et al., 2005; Gilhar A. et al., 2006]. Высказано предположение, что причиной псориаза является нарушение в работе врожденного иммунитета [Bos JD et al., 2005]. В 1998 году два типа Т-хелперов, Thl и Th2 (рисунок 1.5), были дополнены новым типом Т-клеток - Th 17, секретирующих интерлейкин-17 [Teunissen MB et al., 1998]. Список цитокинов, ассоциированных с псориатическим процессом, включает интерлейкины -15, -19, -20, -22 и -23 [Villadsen LS et al. 2003; Römer J. et al., 2003; Wei CC et al., 2005].
Сейчас иммунодерматологи рассматривают псориаз как иммуно-опосредованное воспалительное заболевание кожи (IMID), где Т-клетки выполняют главную функцию. В предыдущих моделях патогенеза псориаза ведущая роль отводилась кератиноцитам, так как они вовлечены в процессы паракератоза, акантоза и гиперкератоза, но успехи в лечении псориаза с