Регуляция метаболизма метионина в суспензии свежевыделенных гепатоцитов

• Автор: Корендясева, Татьяна Константиновна
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 117 с. : ил.

Содержание

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Метаболизм метионина в клетках млекопитающих

1.1.1 Общие сведения

1.1.2 Транспорт метионина через мембрану гепатоцитов

1.1.3 Инициация трансляции и синтез белков

1.1.4 Метилирование

1.1.5 Реметилирование и метаболизм фолиевой кислоты

1.1.6 Транссульфурировапие

1.2 Особенности метаболизма метионина в печени
1.2.1 Ферментный профиль метаболизма метионина в печени
1.2.2 Индуцибелъностъ ферментов метаболизма метионина в печени
1.3 Особенности метаболизма метионина в опухолевых клетках
1.3.1 Особенности ферментного профиля метаболизма метионина в клетках гепатоцеллюлярной карциномы
1.3.2 Метиониновая зависимость опухолевых клеток
1.4 Регуляция метаболизма метионина
1.4.1 Влияние метионина на параметры метаболизма метионина in vivo, in situ, ex vivo и in vitro
1.5 Механизмы регуляции метаболизма метионина в печени
1.5.1 Регуляция скорости ферментов метаболизма метионина
1.5.2 Регуляция активности ферментов метаболизма метионина
1.6 Математические модели метаболизма метионина
1.8 Экспериментальные проблемы, связанные с исследованием метаболизма метионина в суспензии свежевыделенных гепатоцитов
1.8.1 Распределение ферментов метаболизма метионина в паренхиме печени
1.8.2 Скорость синтеза и деградации белков
1.8.3 Ко}щентрация кислорода в атмосфере инкубации гепатоцитов
1.8.4 Стационарные значения концентраций метаболитов метионина

1.9 Постановка задачи
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1 Выделение гепатоцитов
2.1.1 Выделение гепатоцитов из печени мыши
2.1.2 Выделение гепатоцитов из печени крысы
2.2 Экспериментальные исследования
2.3 Измерение концентрации метаболитов
2.4 Статистическая обработка результатов
2.5 Испарение среды в процессе инкубации
2.6 Окисление метионина в процессе инкубации
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1 Проницаемость мембраны гепатоцитов для метионина
3.1.1 Распределение метионина между клетками и средой в суспензии гепатоцитов крысы
3.1.2 Обратимость транспорта метионина в гепатоциты крысы
3.2 Зависимость метаболизма метионина от концентрации метионина в свежевыделенных гепатоцитах мыши
3.2.1 Влияние начальной концентрации метионина на концентрацию АбоМеЦ Ас1оНсу и скорость потребления метионина в гепатоцитах мыши
3.2.2 Зависимость стационарной концентрации АВоМеЦ Ас1оНсу и скорости потребления метионина от концентрации метионина в гепатогщтах мыши
3.3 Зависимость метаболизма метионина от концентрации метионина в свежевыделенных гепатоцитах крысы
3.3.1 Влияние начальной концентрации метионина на концентрацию ААоМе1, АбоНсу и скорость потребления метионина в гепатоцитах крысы
3.3.2 Зависимость стационарной концентрации Ас/оМеЦ АбоНсу и скорости потребления метионина от концентрации метионина в гепатоцитах крысы
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
4.1 Проницаемость мембраны гепатоцитов для метионина
4.1.1..................................Распределение метионина между клетками и средой в суспензии гепатоцитов крысы
4.2.2 Обратимость транспорта метионина в гепатоциты крысы
4.2 Зависимость стационарной концентрации 8-аденозилметионина, Б-
АДЕНОЗИЛГОМОЦИСТЕИНА И СКОРОСТИ ПОТРЕБЛЕНИЯ МЕТИОНИНА ОТ КОНЦЕНТРАЦИИ МЕТИОНИНА В СВЕЖЕВЫДЕЛЕННЫХ ГЕПАТОЦИТАХ
4.3 Сопоставление экспериментальной зависимости метаболизма метионина от
КОНЦЕНТРАЦИИ МЕТИОНИНА С ДАННЫМИ, ПОЛУЧЕННЫМИ В РЕЗУЛЬТАТЕ АНАЛИЗА МАТЕМАТИЧЕСКИХ МОДЕЛЕЙ
4.4 Биологическое значение триггерного поведения метаболизма метионина в печени
ВЫВОДЫ
БЛАГОДАРНОСТИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

скорость деления клеток опосредуется внутриклеточной концентрацией AdoMet [Lu and Mato 2008].
1.3.2 Метиониновая зависимость опухолевых клеток
Явлением метиониновой зависимости называется гибель или снижение скорости деления клеток при замене метионина его непосредственным предшественником, гомоцистеином (рис. 3) [Hoffman 1982]. Причина такой ауксотрофии не вполне ясна [Kenyon et al. 2002]. Метиониновая зависимость описана только для опухолевых клеток. Этот факт позволяет предполагать, что явление метиониновой зависимости связано с различиями метаболизма метионина в нормальных и опухолевых клетках. В качестве дефекта метаболизма метионина, в результате которого возникает метиониновая зависимость, рассматривались дефицит MTHFR [Tisdale 1980; Tisdale 1980а], более высокая, по сравнению с нормальными клетками, скорость трансметилирования [Tisdale 1980а], дефекты трансаминирования метионина [Dumontet et al. 1996], снижение активности MS [Judde and Frost 1988; Fiskerstrand et al. 1998], однако специфический дефект метаболизма метионина, общий для всех метионин зависимых линий клеток, так и не был обнаружен.
1.4 Регуляция метаболизма метионина
1.4.1 Влияние метионина на параметры метаболизма метионина in vivo, in situ, ex vivo и in vitro
1.4.1.1 Концентрации метаболитов и скорость метаболического потока через реакции метаболизма метионина
Опыты по изучению влияния метионина на концентрации метаболитов и скорость метаболического потока через реакции метаболизма метионина в органах и тканях могут быть условно разделены на два типа. В опытах первого типа концентрации метаболитов метионина в органах и тканях определяют после однократного введения высокой (0.4-0.45 г/кг [Wang et al. 2001; Dever and Elfarra 2006]) дозы метионина. В опытах второго типа животных кормят в течение определенного периода времени диетой с заданным содержанием метионина, после чего определяют концентрации метаболитов метионина в органах и тканях. Ниже подробнее рассмотрены данные, которые были получены в этих экспериментальных постановках.