Механизмы регуляции активности липаз в микрогетерогенных системах на основе амфифильных соединений

• Автор: Богданова, Лилия Рустемовна
• Шифр специальности: 03.01.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 140 с. : ил.

Оглавление
ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1 Л. Липазы. Характеристика. Распространение в природе

1.2. Поверхностная активация

1.3. Молекулярная структура липаз

1.3.1. Панкреатические липазы

1.3.2. Микробные липазы

1.4. Тенденция липаз к самоассоциации

1.5. Механизм реакции гидролиза
1.6. Кинетика межфазного катализа
1.7. Микрогетерогенные системы на основе амфифильных
соединений
1.7.1. История вопроса
1.7.2. Поверхностно-активные вещества (ПАВ)
1.7.3. Мицеллообразование
1.7.4. Структура мицелл
1.7.5. Солюбилизация. Влияние на скорость реакций
1.8. Липиды. Физическое состояние субстрата в растворе
1.9. Адсорбция белков на поверхности вода/масло
1.10. Липазы в микрогетерогенных системах на основе амфифильных соединений
1.11. Постановка цели исследования
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Выбор липолитического фермента
2.2. Выбор субстрата

2.3. Выбор амфифильных веществ
2.4. Материалы
2.5. Кинетические измерения
2.6. Флуоресценция
2.7. Динамическое светорассеяние
2.8. Микроскопия
2.9. Определение коэффициентов самодиффузии
2.10. Исследование солюбилизационной емкости мицелл ПАВ
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Общая характеристика липазы Candida rugosa
3.1.1. Селективность липазы Candida rugosa по отношению к п-нитрофениловым субстратам с разной длиной алкильной цепи
3.1.2. Реакция ферментативного гидролиза ПНФЛ. Влияние температуры на активность липазы Candida rugosa
3.2. Агрегационные свойства амфифильных соединений
3.2.1. Мицеллообразование типичных ПАВ
3.2.2. Мицеллообразование солей желчных кислот
3.2.3. Мицеллообразование геминального ПАВ
3.2.4. Мицеллообразование триблоксополимера
3.3. Растворимость субстрата в воде и в растворах амфифильных соединений
3.4. Изменение структуры липазы Candida rugosa в растворах амфифильных соединений
3.5. Активность липазы Candida rugosa в растворах амфифильных соединений
3.5.1. Анионные поверхностно-активные вещества
3.5.2. Катионные поверхностно-активные вещества
3.5.3. Неионные поверхностно-активные вещества

3.6. Механизм реакции ферментативного гидролиза ПНФЛ.
Определение констант скорости элементарных стадий реакции
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1.7.2. Поверхностно-активные вещества (ПАВ)
Фундаментальной характеристикой мицеллообразующих мономеров является их дифильность (амфифильность), т.е. присутствие в одной и той же молекуле полярной и неполярной частей. Эффективные ПАВ должны быть соединениями с оптимальным гидрофильно-липофильным балансом, при котором силы гидрофильных и липофильных взаимодействий молекулы со средой соотносятся таким образом, что у них появляется способность к ассоциации в растворах (в простейшем случае - к мицеллообразованию) [Fendler, 1970; Rosen, 1989; Rangel-Yagoui et al., 2005].
Дифильные молекулы поверхностно-активных веществ характеризуются наличием в их структуре двух участков с противоположными свойствами: гидрофильной полярной головной группы и гидрофобного углеводородного радикала. Хотя в основе строения молекул ПАВ лежит принцип амфифильности, в его пределах возможны многочисленные комбинации по типу, числу и размерам функциональных групп. Наиболее важной является классификация по ионогенным свойствам гидрофильных групп, устанавливающая пять типов ПАВ [Миттел, 1980; Tadros, 1984]:
1. анионные (анионоактивные) ПАВ, диссоциирующие в полярном растворителе с образованием поверхностно-активных анионов;
2. катионные (катионоактивные) ПАВ, способные диссоциировать с образованием поверхностно-активных катионов;
3. неионные (неионогенные) ПАВ;
4. амфотерные (амфолитные) ПАВ, молекулы которых содержат несколько полярных групп и способны давать при диссоциации поверхностно-активные анионы или катионы в зависимости от внешних условий (прежде всего от значения pH в водном растворе);
5. цвиттер-ионные ПАВ, полярные группы которых являются цвиттер-ионами.