+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Молекулярно-биологические методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота

  • Автор:

    Джапаралиев, Нурлан Тынчтыкбекович

  • Шифр специальности:

    03.00.06

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2002

  • Место защиты:

    Владимир

  • Количество страниц:

    110 с.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы


СПИСОК СОКРАЩЕНИИ
а.о. - аминокислотный остаток
ВЛ КРС - вирус лейкоза крупного рогатого скота
ВНИИЗЖ - Всероссийский научно-исследовательский институт защиты
животных
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИФА - иммуноферментный анализ
КРС - крупный рогатый скот
н. - нуклеотид
ОРС - открытая рамка считывания
ОФД - ортофенилендиамин
п.н. - пар нуклеотидов
ПЦР - полимеразная цепная реакция
ПЦР-ИФА - гибридизационно-ферментный вариант метода ПЦР
РИА - радиоиммунный анализ
РИД - реакция иммунодиффузии в геле агара
РНК - рибонуклеиновая кислота
трис - трис-(гидроксиметил)-аминометан
ФБР - фосфатно-буферный раствор
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота (динатриевая соль)
dig-11-dUTP - дигоксигенин-11-2’-дезоксиуридин-5’-трифосфат
dNTP - дезоксинуклеозидтрифосфаты
HTLV - вирус Т-клеточной лейкемии человека
FLK - почка эмбриона овцы
LTR - длинный концевой повтор (long terminal repeat)
SDS - додецилсульфат натрия

ОГЛАВЛЕНИЕ:
1. ВВЕДЕНИЕ
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.1. Общая характеристика лейкоза крупного рогатого скота
2.2. Таксономия семейства ретровирусов
2.3. Вирус лейкоза крупного рогатого скота
2.3.1. Морфология ВЛ КРС
2.3.2. Структура генома ВЛ КРС
2.3.3. Репликация вируса
2.3.4. Устойчивость вируса
2.3.5. Культивирование ВЛ КРС
2.4. Эпизоотологические особенности лейкоза КРС
2.4.1. Естественные пути передачи ВЛ КРС
2.4.2. Передача ВЛ КРС в ходе эксперимента
2.5. Меры борьбы и профилактики
2.6. Диагностика лейкоза КРС
2.6.1. Клинические, патоморфологические и гематологические 26 методы исследования лейкоза КРС
2.6.2. Серологические реакции
2.6.3. Прямые методы выявления провируса ВЛ КРС
2.7. Заключение по обзору литературы
3. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Материалы
3.1.1. Биологические материалы
3.1.2. Реактивы и оборудование
3.2. Методы
3.3. Результаты собственных исследований и их обсуждение
3.3.1. Разработка и усовершенствование метода ПЦР для
выявления провирусной ДНК ВЛ КРС
3.3.1.1. Выбор праймеров для проведения ПЦР
3.3.1.2. Оптимизация условий пробоподготовки для ПЦР
3.3.1.3. Оптимизация условий проведения ПЦР

3.3.2. Изучение возможности применения метода ПЦР для
обнаружения ВЛ КРС в различных биоматериалах
3.3.2.1. Применение метода ПЦР для выявления 56 провирусной ДНК в образцах крови КРС
3.3.2.2. Использование метода ПЦР для выявления 58 провирусной ДНК в образцах молока КРС
3.3.2.3. Применение метода ПЦР для выявления провируса ВЛ 60 КРС в образцах сыворотки крови КРС
3.3.2.4. Обнаружение провирусной ДНК в образцах 61 носовых истечений КРС
3.3.2.5. Применение метода ПЦР для выявления провируса 64 лейкоза КРС в суспензиях из органов
3.3.2.6. Применение метода ПЦР для выявления провируса 66 лейкоза КРС в образцах спермы быков-производителей
3.3.3. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота у КРС и 67 овец, содержащихся совместно в естественных условиях
3.3.4. Диагностика лейкоза крупного рогатого скота методом 73 ПЦР-ИФА
4. ЗАКЛЮЧЕНИЕ
5. ВЫВОДЫ
6. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
7. СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ

138, 151, 163, 202], хотя в опухолевых клетках, трансформированных вирусом лейкоза, области gag и pol могут отсутствовать. Не наблюдалось перекрестной активности между клеточными линиями, инфицированными ВЛ КРС и HTLV-1 при выборе праймеров в областях pol и tat. Преимущество использования праймеров и зондов из участка др51 области env генома ВЛ КРС, которая является наиболее консервативной, по сравнению с другими областями генома, состоит в том, что при интеграции в геном хозяина данная область не имеет делеций, даже в опухолевых клетках, индуцированных ВЛ КРС [140, 179]. С помощью праймеров, выбранных в области гена др51, провирусная ДНК вируса лейкоза КРС обнаруживалась как в лимфоцитах периферической крови, так и в суспензиях из различных органов и опухолей, экспериментально и естественно инфицированных животных [94, 141, 142].
Отмечено, что провирусная ДНК лейкоза КРС обнаруживалась в крови большинства животных, серопозитивных по вирусу лейкоза КРС [85]. В работе [178] удалось амплифицировать и выделить 10 копий ДНК вируса в присутствии в образце 1 мкг хромосомной ДНК. Во всех случаях результаты ПЦР совпадали с результатами серологических методов. Метод полимеразной реакции позволял обнаруживать инфицированных животных даже в тех случаях, когда тест на наличие антител показывал сомнительные результаты. Удавалось выявлять до 10'5 мкг провирусной ДНК в образцах [47, 100].
Ряд авторов [39, 93] использовали ПЦР, чтобы отличить инфекцию от колострального иммунитета у телят. По данным работы [124], метод ПЦР был самым быстрым и чувствительным методом обнаружения лейкозной инфекции. Этот метод также может быть применен при изучении распределения вируса в различных тканях и органах [207].
Таким образом, ПЦР может быть подтверждающим тестом при диагностике лейкоза КРС, аналогично тому, как эта реакция используется при диагностике ВИЧ-инфекций у человека [85, 178, 200]. Для более точной идентификации можно провести секвенирование или гибридизацию

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.149, запросов: 967