Изучение мембранотропной активности некоторых тритерпеновых гликозидов

• Автор: Попов, Александр Михайлович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 184 c. : ил

ЧАСТЬ I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
ГЛАВА I. ТРИТЕРПЕНОВЫЕ ГЛИКОЗИДЫ - БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ ВЕЩЕСТВА МЕМЕРАНОТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ
1. Химическое строение, распространение и свойства тритерпеновых гликозидов
2. Применение тритерпеновых гликозидов в фармакологии и медицине
3. Мембранотропная активность тритерпеновых гликозидов
Глава II. РОЛЬ СТЕРИНОВ В МЕМБРАНАХ
1. Структурно-функциональные свойства
мембранных стеринов
2. Влияние стеринов на мембранную проницаемость
3. Стерины как "рецепторы" биологически
активных веществ
ЧАСТЬ П. СОБСТВЕННЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава IV. БИОЛОГИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ТРИТЕРПЕНОВЫХ
ГЛИКОЗИДОВ
Глава V. ДЕЙСТВИЕ ТРИТЕРПЕНОВЫХ ГЛИКОЗИДОВ НА
МЕМБРАННУЮ ПРОНИЦАЕМОСТЬ И ВНУТРИКЛЕТОЧНЫЙ МЕТАБОЛИЗМ

1. Взаимосвязь мезду связыванием тритерпеновых гликозидов с клетками и изменением проницаемости
2. Действие тритерпеновых гликозидов на мембранную проницаемость для УФ-логлощающих веществ
и их метаболизм
3. Влияние условий инкубирования на мембранную проницаемость, индуцированную тритерпеновыми гликозидами
4. Особенности проницаемости мембран эритроцитов
в присутствии тритерпеновых гликозидов
5. Сравнительное изучение мембранотропной активности тритерпеновых гликозидов и полиеновых антибиотиков
Глава V1. ВЛИЯНИЕ ЛИПИДОВ И СТЕРИНОВ НА АКТИВНОСТЬ
ТРИТЕРПЕНОВЫХ ГЛИКОЗИДОВ
1. Сродство липидов и стеринов к тритерпеновым гликозидам
2. Изменение чувствительности опухолевых клеток к действию тритерпеновых гликозидов с помощью липосом
3. Влияние тритерпеновых гликозидов на стабнль-ность липидных и липид-стериновых мембран
Глава VП. ДЕЙСТВИЕ ТРИТЕРПЕНОВЫХ ГЛИКОЗИДОВ НА БИСЛОЙНЫЕ
ЛИПИДНЫЕ МЕМБРАНЫ (БЛМ) И ЛИПОСОМЫ
1. Связывание тритерпеновых гликозидов с липосомами
2. Действие тритерпеновых гликозидов на проницаемость липосом

3. Действие тритерпеновых гликозидов на ионную проводимость бислойных липидных мембран
4. Особенности дискретной проводимости БИМ, модифицированных голотурином А
5. Особенности дискретной проводимости БЛМ в присутствии каулозида С
6. О резистентности мембран, содержащих стерины трепанга и их метаболиты, к действию стихопозида А
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА
ПРИЛОЖЕНИЕ

при 1000 s • В надосадочной жидкости определяли оптическую плотность УФ-поглощающих веществ при 260 нм, а количественное содержание гликозидов в пробе оценивали гемолитическим методом с использованием клеток эритроцитов барана. Клетки эритроцитов триады промывали 150 мМ раствором цаС1 с 10 мМ фосфатного буфера (соль натрия), pH 7,0. К 2,7 ш 2-%-ной суспензии эритроцитов добавляли 0,3 мл раствора гликозида и инкубировали в течение 30 мин при 37°С. После инкубирования, эритроциты, осаждали центрифугированием и определяли оптическую плотность надосадочной жидкости при 540 нм. Для каздого гликозида строили калибровочную кривую, отражающую зависимость степени гемолиза от его концентрации в среде.
4. Выделение липидов,
а) Выделение суммы липидов.
Экстракцию суммарной фракции липидов проводили по методу Блая и Дайера / 80 /. Яйцеклетки морского ежа и яичные желтки (около 5 г сырого веса) гомогенизировали приблизительно в 30 мл смеси хороформ-метанол (1:2, по объему). Гомогенат пропускали

через воронку с фильтром из пористого стекла и осадок экстрагировали вновь 20 мл смеси хлороформ-метанол (1:1, по объему). Фильтраты объединяли, добавляли 20 мл водного 0,1 М раствора KCI и примерно 10 мл хлороформа. Для полного разделения фаз делительную воронку с экстрактом оставляли на 2-3 часа при температуре 4°С. Нижний хлороформенный слой сливали и промывали специально приготовленной смесью хлороформ-метанол -HgO (3:48:47, по объему). Объединенный экстракт выпаривали на роторном испарителе при 30-35°С. Липиды хранили в смеси бензол-метанол (4:1, по объему) и использовали для получения отдельных липидных фракций и фосфолипидов.