Влияние 2-хлорэтилфосфоновой и бета-индолилуксусной кислот на биосинтез ДНК топинанбура (HELIANTHUS TUBEROSUS L.)

• Автор: Бирюкова, Ирина Владимировна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Киев
• Количество страниц: 146 c. : ил

ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1.1. Фитогормоны и их действие на растительный
организм
1.2. Фитогормональная регуляция биосинтетических процессов
1.3. Изменение физико-химических свойств ДНК
растений при действии фитогормонов
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Условия культивирования эксплантатов топинамбура
В системе in vitro
2.2. Определение кинетики синтеза ДНК топинамбура
2.3. Определение кинетики синтеза РНК и белков топинамбура
2. 4,Выделение ДНК
2.5. Плавление ДНК
2.6. Измерение содержания ДНК, РНК и белков
2.7. Определение коэффициента распределения суммарной
ДНК в градиенте нейтрального CsCi
2.8. Определение коэффициента распределения новосинтезированной меченой ДНК топинамбура в градиенте нейтрального csci
2.9. Мечение ДНК топинамбура in vivo
2.10.Определение температуры плавления
новосинтезированной ДНК
2.II.Определение нуклеотидного состава ДНК топинамбура 4Q
2.12.Фракционирование и определение длины фрагментов
ДНК топинамбура
2.13. Кинетика реассоциации ДНК топинамбура
2.14. Выделение митохондрий и ядер из тканей клубней топинамбура и определение коэффициента распределения ДНК органелл в градиенте нейтрального СзС1
2.15. Определение содержания эндогенного и экзогенного этилена
2.16. Цитологическое исследование эксплантатов топинамбура
2.17. Статистические методы обработки результатов
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
ГЛАВА III. ВЛИЯНИЕ 2-ХЛОРЭТИЛФОСФСНОВОЙ И / -ИНДОЛИЛУКСУСНОЙ КИСЛОТ НА СИНТЕЗ ДНК, РНК И БЕЛКОВ
3.1. Влияние различных концентраций регуляторов роста растений на интенсивность синтеза ДНК топинамбура
3.2. Продолжительность лаг-периода, предшествующего началу синтеза ДНК в зависимости от возраста клубней топинамбура
3.3. Продолжительность лаг-периода и интенсивность синтеза ДНК под влиянием 2-хлорэтилфосфоновой КИСЛОТЫ
3.4. Действие / -индолилуксусной кислоты на продолжительность лаг-периода и интенсивность синтеза ДНК топинамбура
3.5. Влияние 2-хлорэтилфосфоновой и /-индолилуксусной кислот на биосинтез РНК и белков топинамбура в период, предшествующий началу э фазы митотического цикла
Глава IV. ВЛИЯНИЕ 2-ХЛОРЭТИЛФОСФОНОВОЙ И / -ИНДОЛИЛУКСУСНОЙ КИСЛОТ НА ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ДНК

ТОПИНАМБУРА

4.1. Характеристика ДНК топинамбура
4.2. Определение температуры плавления ДНК топинамбура, выделенной из тканей обработанных
и необработанных регуляторами роста
4.3. Распределение ДНК в градиенте Сзсі в зависимости от обработки 2-хлорэтилфосфоновой и
р -индолилуксусной кислотами
4.4. Изучение структурной организации ДНК топинамбура с помощью кинетики реассоциации
Глава V. ВЛИЯНИЕ 2-ХЛОРЭТИЛФОСФОНОВОЙ И Р-ИНДОЛИЛУКСУСНОЙ КИСЛОТ НА ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА Н0В0СИНТЕЗИР0ВАНН0Й ДНК ТОПИНАМБУРА
5.1. Действие 2-хлорэтилфосфоновой и ^-индолилуксусной кислот на термальную денатурацию новосинтезированной ДНК топинамбура
5.2. Определение коэффициента распределения новосинтезированной ДНК топинамбура в градиенте нейтрального Обсі при экзогенной обработке тканей 2-хлорэтилфосфоновой и / -индолилуксусной кислотами
5.3. Определение плавучей плотности новосинтезированной ДНК митохондрий и ядер топинамбура
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ОСНОВНОЙ ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

C0t = К / 61/,
где: Cot - произведение концентрации ДНК на время инкубации,
моль/с/л;
/< - коэффициент зависимости скорости реассоциации ДНК от концентрации фосфатного буфера (за величину К-і принята концентрация фосфатного буфера 0,12 М);
М - концентрация ДНК, мкг/мл;
t - время инкубации, час.
Денатурацию ДНК осуществляли кипячением запаянных ампул с ДНК в водном раствора NaCi в течение 5-7 мин в случае, когда ДНК находилась в растворе 0,5 М Na-ФБ, и в воде, при более низкой молярности буфера, в течение 10 мин. После инкубации при определенной температуре пробы быстро замораживали в жидком азоте с ацетоном. Для фракционирования прореассоциировавшей ДНК на ок-сиапатите, пробы разводили до конечной концентрации 0,12 М Na-ФБ. Колонки, заполненные оксиапатитом, уравновешивали 0,12 М Na-ФБ и нагревали до 65 °С. Пробы элюировали при температуре 65 °С И при 95 - 97 °С 0,12 М Na-фр. Проверяли поглощение каждой пробы при Я= 260 нм на СФ-26. Долю прореассоциировавшей ДПС определяли из следующего соотношения:
где: Аь - поглощение образца в момент времени
поглощение образца полностью реассоциировавшей ДНК;
А$- поглощение образца при 96 °С. р - степень реассоциации.