+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Внеклеточные оксидоредуктазы лигнинолитического комплекса базидиального гриба Trametes Pubescens (Schumach.) Pilat

  • Автор:

    Никитина, Оксана Викторовна

  • Шифр специальности:

    03.00.04

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2006

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    129 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

СОКРАЩЕНИЯ, ПРИНЯТЫЕ В ТЕКСТЕ
ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1.1 ЛИГНИНОЛИТИЧЕСКЛЯ СИСТЕМА БАЗИДИАДЬНЫХ ГРИБОВ
1.1.1 Лигнинолитический комплекс грибов
1.1.2 Множественные формы лигнинолитических ферментов
1.1.3 Синергизм действия лигнинолитических ферментов, роль марганца в процессе деградации лигнина
1.2 Основные ферменты лигнинолитического комплекса базидиомицетов
1.2.1 Лакказа
1.2.2 Лигттпероксидаза
1.2.3 Марганецпероксидаза
1.3 Базидиальные грибы рода Тяаметеб
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и объекты исследования
2.1.1 Штаммы микроорганизмов и ферменты
2.1.2 Носители для хроматографии
2.1.3 Реагенты
2.2 Культивирование базидиомицета Тяаметеб ршебсеиб
2.2.1 Культивирование на глюкозо-аммонийной среде
2.2.2 Культивирование на мелассе
2.3 Выделение и очистка ферментов
2.4 Определение молекулярной массы и изоэлектрофокусирование
2.5 Контроль активности ферментов
2.5.1 Контроль активности лакказы
2.5.2 Контроль активности лигнинпероксидазы
2.5.3 Контроль активности марганецпероксидазы
2.5.4 Определение активности целлобиозодегидрогеназы
2.6 Кинетические измерения и рН-зависимость
2.6.1 Регистрация окисления ионов Мп2+ до Мп3+, катализируемого лакказой
2.6.2 Исследование продуктов реакции окисления ионов Мп +, катализируемой лакказой
2.7 Аналитические методы
2.7.1 Определение концентрации белка
2.7.2 Определение металлов
2.7.3 Определение углеводной части лакказ
2.8 Спектральные исследования
2.9 Масс-спектроскопические исследования
2.9.1 Расщепление белков
2.9.2 МЛЬИРмассспектроскопия
2.9.3 Расчет данных
2.10 Электрохимические исследования
2.10.1 Приготовление электродов
2.10.2 Циклические вольтамперометрические измерения
2.10.3. Амперометрические исследования биосенсоров
2.10.4....Определение окислитиелъно-восстановителъного потенциала Т1 центра лакказы
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1 Выделение и очистка ферментов лигнинолитического комплекса
БАЗИДИОМИЦЕТА ТЛАМЕТЕБ РиВЕБСЕИБ
3.2. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ФЕРМЕНТОВ ЛИГНИНОЛИТИЧЕСКОГО КОМПЛЕКСА БАЗИДИОМИЦЕТА ТЯАМЕТЕБ РЦВЕЗСЕЖ
3.2.1 Основные биохимические свойства ферментов
3.2.2 Основные спектральные свойства ферментов
3.3 Сравнительные исследования двух множественных форм лакказ
БАЗИДИОМИЦЕТА ТЛАМЕТЕБ РЦВЕБСЕИБ
3.3.1 Исследование субстратной специфичности, рН-оптгшума и стабильности двух форм лакказ
3.3.2 Электрохимические исследования двух форм лакказ
3.3.3 Масс-спектроскопические исследования двух форм лакказ
3.4 Изучение синергизма действия лигнш юлитических ферментов базидиомицета
ТЛАМЕТЕБ РиВЕБСЕИБ ПРИ ДЕГРАДАЦИИ МОДЕЛЬНЫХ СОЕДИНЕНИЙ ЛИГНИНА
3.4.1 Ионы Мп2+ - нетрадиционный субстрат лакказы гриба Т. риЪевсет
3.4.2 Изучение синергизма действия лигнинолитических ферментов базидиомш1ета Тгате1ев риЬевсет
3.5 Разработка амперометрического биосенсора для определения фенольных
СОЕДИНЕНИЙ НА ОСНОВЕ ЧАСТИЧНО ОЧИЩЕННОГО ПРЕПАРАТА КУЛЬТУРАЛЬНОГО ФИЛЬТРАТА БАЗИДИОМИЦЕТА ТЛАМЕТЕБ РШЕБСЕИБ
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
Сокращения, принятые в тексте Lc1 - первая множественная форма лакказы Lc2 - вторая множественная форма лакказы LiP - лигнинпероксидаза МпР - марганецпероксидаза АО - аскорбатоксидаза BOD - билирубиноксидаза Ср - церулоплазмин CDH - целлобиозодегидрогеназа HRP - пероксидаза хрена
ОВП - окислительно-восстановительный потенциал
Е0'- стандартный окислительно-восстановительный потенциал
vs. NHE - относительно нормального водородного электрода
ПЭП - прямой электронный перенос
ВМЭП - внутримолекулярный электронный перенос
ИЭФ - изоэлектрофокусирование
pl - изоэлектрическая точка
ВС - вератровый спирт
ВА - вератровый альдегид
ABTS - 2,2'-азино-бис-(3-этилбензтиазолин-6-сульфонат)
ДОФУК - 3,4-дигидроксифенилуксусная кислота L-ДОФА - 1_-3,4-дигидроксифенилаланин SDS - додецилсульфат натрия ПААГ - полиакриламидный гель
ВЖХ - высокоэффективная жидкостная хроматография MALDI - лазер десорбционно-ионизирующая масс-спектрометрия
2.6 Кинетические измерения и рН-зависимость
Кинетические измерения при определении каталитических параметров ферментативных реакций лакказы для пирокатехина, гидрохинона, гваякола и гексацианоферрата (II) калия, а также измерение рН-зависимости лакказ проводили на кислородном электроде типа Кларка по изменению концентрации молекулярного кислорода в системе в результате ферментативного окисления субстрата-донора электронов. При расчете констант учитывали стехиометрию реакции. Исходную концентрацию дикислорода в буферном растворе принимали равной Коммерческие препараты пирокатехина и гидрохинона были
Определение кинетических параметров и измерение рН-зависимости реакции окисления АБТС, катализируемой лакказой, вели в 0,1 М цитрат-фосфатном буфере, pH 4,5, при длине волны 436 нм, используя молярный коэффициент поглощения продукта окисления е = 36000 М'1 ~-~1
Измерение pH-зависимости реакции окисления гва
лакказой, проводили в 0,1 М цитрат-фосфатном буфере, р1 ■ -т,о, нНп МлппС силпо! 436 нм, используя молярный коэффициент поглощения продукта окисления, равный 25500 М'1 см"1.
Препараты лакказы перед измерениями были выдержаны при комнатной температуре в течение 3 часов. Все кинетические измерения и определение активности ферментов проводили при температуре
2.6.1 Регистрация окисления ионов Мп2+ до Мл?*, катализируемого лакказой Регистрацию окисления ионов Мп2+ до Мп3+, катализируемого лакказой, проводили в 0,1 М Na-тартратном буфере, pH 5,0, с использованием метода, описанного в работе [Tien and Kirk, 1988], и в 0,1 М Na-оксалатном буфере, pH 5,0, по методу [Hofer and Schlosser, 1999] в присутствии 0,1 мМ MnS04. Продукт реакции, трехвалентный марганец, образует малостабильные комплексы с

очищены возгонкой в вакууме.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.107, запросов: 967