Перенос генов азотфиксации в бактерии, развивающиеся в растениях

• Автор: Козыровская, Наталия Алексеевна
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Киев
• Количество страниц: 145 c. : ил

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Краткая характеристика основных групп диазотрофов
1.2. Современные аспекты изучения процесса биологической азотфиксации
1.2.1. Основы биохимии азотфиксации
1.2.2. Исследование генетики азотфиксации на модельном объекте Klebsiella pneumoniae
1.2.3. Генетический контроль азотфиксации
1.3. Основные пути решения проблемы обеспечения растений биологическим азотом
1.4. Бактерии, развивающиеся в растениях, как потенциальные азотфиксаторы
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Номенклатура
2.2. Виды и штаммы бактерий
2.3. Питательные среды
2.4. Метода
2.4.1. Генетические
2.4.2. Молекулярно-биологические
2.4.3. Физико-химические
2.4.4. Метода фитопатологии
ГЛАВА 3. ПЕРЕНОС ПЛАЗМИДЫ pRDl ИЗ Е. coli В ФИТОПАТОГЕННЫЕ
БАКТЕРИИ И ЭКСПРЕССИЯ ЕЕ ДЕТЕРМИНАНТОВ
3.1. Эффективность конъюгациоиного переноса плазмиды pRDl при скрещивании е. coli с фитопатогенными бактериями
3.2. Экспрессия детерминантов антибиотикоустойчивости

плазмиды pRDl у трансконъюгантов
3.3. Исследование ацетиленредуктазной ( нитрогеназной ) активности трансконъюгантов
3.4. Особенности азотфиксации у трансконъюгантов X. beticola 8717 и Е. aroideae 8947 со стабильным
nif -фенотипом
3.4.1. Влияние кислорода на ацетиленредуктазную активность
3.4.2. Изучение гидрогеназной активности
3.5. Анализ плазмид трансконъюгантов.
ГЛАВА 4. ВЛИЯНИЕ ПЛАЗМИДЫ pRD1 НА ИЗМЕНЕНИЕ НЕ ДЕТЕРМИНИРУЕМЫХ ПЛАЗМИДОЙ СВОЙСТВ ИССЛЕДУЕМЫХ БАКТЕРИЙ
4.1. Вирулентность и агрессивность трансконъюгантов
4.2. Культурально-биохимические свойства трансконъюгантов
4.3. Изучение возможности функционирования nif -генов трансконъюгантов Е. aroideae 8947 при развитии
их в растении, вегетирующем в открытом грунте
ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА

Превращение n2 в жз является важным процессом на Земле. Осуществляют этот процесс отдельные прокариотические организмы (свободноживущие или симбиотические), превращая молекулярный азот атмосферы в аммоний, легкодоступный для низших эукариотов и растений.
Биологически связанный азот снабжает растения лишь на 60-70 %, Для обеспечения сельскохозяйственных культур азотом используют минеральные азотные удобрения. Их производство требует значительных энергетических затрат, а применение удобрений приводит к загрязнению окружающей среды и нарушению баланса в экосистемах /Gutschnik, 1980/.
Учитывая вышеизложенное, решение проблемы азотного дефицита возможно путем радикального увеличения вклада биологической азотфиксации. Для этого, цревде всего, необходимо понимание генетики этого процесса и разработка способов переноса генов азотфиксации (nif) между различными бактериями. Наибольшее количество экспериментов по изучению переноса и экспрессии генов азотфиксации выполнено с гибридной плазмидой рЫ)1, сконструированной Диксоном с соавторами на основе плазмиды RP4 и ДНК Klebsiella pneumoniae /Dixon et al», 1976/. С помощью этой плазмиды созданы новые формы грам-отрицательных и грам-положительных бактерий с nif-фенотипом. Исследование экспрессии ее детерминантов в различных объектах дает возможность установить закономерности выражения генов азотфиксации в неодинаковых условиях, а также изучить их генетическую стабильность.
В данной работе плазмида pRDl использовалась для изучения возможности переноса генов азотфиксации в бактерии Xanthomonas
Еис. I. Микроэксикатор МЭ-2. I - корцус-пуансон; 2 - корпус-матрица; 3 - канал отбора проб; 4 - резиновая прокладка; 5 - штуцер; 6 - проушина; 7 - винт.