Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Ермолюк, Ярослав Станиславович
03.00.03
Кандидатская
2002
Москва
103 с. : ил
Стоимость:
499 руб.
СОДЕРЖАНИЕ
СОДЕРЖАНИЕ
Список использованных сокращений
ВВЕДЕНИЕ
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава 1. Эпидермальный фактор роста и его рецептор
1.1. Эпидермальный фактор роста
1.2. Рецептор эпидермального фактора роста
1.3. Структура рецептора эпидермального фактора роста
1.4. Регуляция и биологические функции рецептора
Глава 2. Вектора для доставки чужеродного генетического материала в клетки млекопитающих
2.1. Ретровирусы
2.1.1. Биология вируса
2.1.2. Вектора на основе MLV
2.1.3. Вектора на основе лентивирусов
2.2. Аденовирусы (Ad)
2.2.1. Биология аденовируса
2.2.2. Векторные системы на основе аденовирусов
2.3. Аденоассоциированные вирусы (AAV)
2.3.1. Биология AAV
2.3.2. Вектора на основе AAV
2.4. Вирус простого герпеса (HSV)
2.4.1. Биология вируса
2.4.2. Вектора на основе рекомбинантного HSV
2.4.3. Вектора на основе дефектного HSV
2.5. Невирусные векторные системы
2.5.1. Свободная ДНК
2.5.2. Катионные липиды
2.5.3. Конденсированная ДНК
2.5.4. Инъекция “без иглы”
2.5.5. Электропорация
2.6. Адресная доставка чужеродного генетического материала
Глава 3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
3.1. Материалы
3.2. Методы
Глава 4. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ
4.1. Разработка системы экспрессии hEGF
4.1.1. Клонирование тиоредоксина E. coli и конструирование вектора pHis-EGF
4.1.2. Подбор штамма-хозяина
4.1.3. Оптимизация условий культивирования рекомбинантных штаммов E. coli и
разработка метода очистки гибрида
4.1.4. Очистка гибридного белка
4.1.5. Высвобождение hEGF из гибридного белка
4.2. Получение и тестирование цитотоксического действия конъюгата А-субъединицы
рицина и гибрида тиоредоксин-hEGF
4.3. Разработка векторной системы для доставки чужеродного генетического материала в клетки млекопитающих
4.3.1. Конструирование экспрессионного вектора pHis-NLS-hEGF
4.3.2. Экспрессия гена и очистка белка NLS-hEGF
4.3.3. Биологическое тестирование hEGF, NLS-hEGF и укороченного hEGF
4.3.4. Тестирование векторной системы NLS-hEGF
4.3.5. Использование векторной системы ЫЬЗ-йНОР для доставки антисмысловых
олигонуклеотидов
ВЫВОДЫ
Список цитируемой литературы
Вирус простого - эписомальный вирусный геном; - иммуногенность;
герпеса - может проводить к латентной - различные вирусы имеют
инфекции на протяжении всей различную селективность;
жизни; - активация латентного вируса;
- большие размеры вставки; - низкая эффективность
-высокий титр трансфекции; - кратковременная экспрессия уже имеющихся векторов; - система на стадии разработки
Таблица 1. Сравнительные характеристики вирусных векторов (51).
2.5. Невирусные векторные системы
2.5.1. Свободная ДНК
Хотя свободная ДНК (naked DNA) практически не способна трансфицировать
клетки ex vivo, она удивительно легко проникает в клетки некоторых тканей in vivo при
локальных инъекциях, особенно в клетки мышц и эпителия (52). Механизм
проникновения свободной ДНК в клетки неизвестен. Трансгенная экспрессия, вызванная
инъекцией плазмидной ДНК в скелетные мышцы мыши, длится в течение нескольких
месяцев, а экспрессия в коже - несколько дней. Интересно, что инъекция ДНК, которая
кодирует белковые антигены, в мышцы или кожу мыши вызывает гуморальный и
клеточный иммунные ответы против этих антигенов. Например, внутримышечная
инъекция плазмидной ДНК, кодирующей ген Plasmodium falciparum (агент, вызывающий
малярию), вызывает CTL ответ на эпитопы паразита (53). Хотя молекулярные события,
приводящие к эффективной активации антигенпредставляющего механизма, все еще
неясны, такого рода вакцинация является наиболее перспективным и важным
применением метода инъекций свободной ДНК. Другое важное применение - введение
свободной ДНК, кодирующей ангиогенные факторы, в мышцы пациентам с
ишемическими сосудистыми заболеваниями (29).
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Позиционирование нуклеосом на гене неомицинфосфотрансферазы в репрессированном состоянии и при индукции экспрессии в составе дрожжевых плазмид | Захарова, Мария Глебовна | 2008 |
Изучение белка E(y)2P Drosophila melanogaster, являющегося паралогом фактора транскрипции E(y)2 | Марданов, Павел Владимирович | 2005 |
Получение в E. coli, ренатурация и исследование внемембранных доменов холинорецепторов | Алексеев, Тимофей Александрович | 2005 |