Синтез олиголактозаминов-лигандов галектинов

• Автор: Северов, Вячеслав Викторович
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 130 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ЧАСТЫ. ВВЕДЕНИЕ

ЧАСТЬ 2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Олиголактозамин (Оа1р1-4СИсКАс)п и изолактозамин (Са^И-ЗСПсИАс) в

составе гликанов человека

2.1.1. Олиголактозаминовые цепи эритроцитов

2.1.2. Муцины, межклеточный матрикс

2.1.3. Олиголактозаминовые цепи иммунных клеток

2.1.4. Олиголактозамины молока

2.1.5. Изменение гликанов поверхности клеток при онкотрансформации

2.1.6. Заключение
2.2. Методы синтеза олиго-У-ацстиллактозаминсо держащих олигосахаридов
2.2.1. Химические методы синтеза
2.2.2. Ферментативные методы синтеза
ЧАСТЬ 3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
3.1. Синтез олиголактозаминов
3.2. Синтез флуоресцеин-меченых полиакриламидных гликоконъюгатов
3.3. Изучение углеводной специфичности галектинов в составе клеточной
мембраны
ЧАСТЬ 4. ВЫВОДЫ
ЧАСТЬ 5. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
5.1. Синтез олиголактозаминов
5.2. Синтез флуоресцеин-меченых полиакриламидных гликоконъюгатов
5.3. Изучение углеводной специфичности галектинов в составе клеточной
мембраны
ЧАСТЬ 6. СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ
АН - аллил Asn — аспарагин
C2GnT - кор-2-рі-б-У-ацетилглюкозаминтрансфераза
Сег - церамид
С1Ас - хлорацстил
Coll - коллидин
DC - дендритные клетки
DMM - диметилмалеоил
Fluo - флуоресцеин
Fmoc - флуоренилметоксикарбонил
Fuc - фукоза
Gal - галактоза
GalNAc - У-ацетилгалактозамин Glc - глюкоза
GlcNAc (GN) - У-ацетилглюкозамин GnTV - У-ацетилглюкозаминтрансфераза V
НМО - олигосахариды грудного молока (human milk oligosaccharides)
ICAM-3 - intercellular adhesion molecule 3 Lac - лактоза (Gaipi -4Glc)
LacNAc (LN) - N-ацетиллактозамин (Gaipi-4GlcNAc)
Lea — трисахарид Льюис a (Galpl-3[Fucal-4]GlcNAc)
Leb — тетрасахарид Лыоис b (Fucal -2Gaipi-3[Fucal -4]GlcNAc)
Lec — дисахарид Льюис с (Galpl-3GlcNAc)
Lev - левулиноил
Lex - трисахарид Льюис x (Gaipi-4[Fucal-3]GlcNAc)
Ley - тстрасахарид Льюис у (Fucal-2Galpl-4[Fucal-3]GlcNAc)
LNnT - лакто-И-неотетраоза (Gaipi-4GlcNAcpi-3Galpl-4Glc)
LNT - лакто-И-тетраоза (Gaipi-3GlcNAcpi-3Gaipi-4Glc)
Lut - лутидин Мап-манноза
МНС - главный комплекс гистосовместимости (major histocompatibility complex) Neu5Ac - У-ацетилнейраминовая кислота NIS - У-йодсукцинимид

NK - натуральные киллеры (natural killer)
PAA - полиакриламид Phth - фталоил
PSGL-1 - P-selectin glycoprotein ligand-1 Py — пиридин
sLea - тетрасахарид сиалил Льюис a (Neu5Acct2-3Galpl-3[Fucal-4]GlcNAc)
sLec - трисахарид сиалил Льюис с (Neu5Aca2-3Galpl-3GlcNAc)
sLex - тетрасахарид сиалил Льюис х (Neu5Aca2-3Gaipi-4[Fucal-3]GlcNAc)
TBDPS - третя-бутилдифенилсилил
ТСА - трихлорацетил
TCR - Т-клеточный рецептор (T-cell receptor)
Tf - трифторметансульфонил THF - тетрагидрофуран ТММ - тетраметилмочевина TMSEt - р-(триметилсилил)этил Тгос - 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил Ts - л-толуолсульфонил UDP - уридиндифосфат UTP - уридинтрифосфат ДМСО - диметилсульфоксид
КССВ - константа спин-спинового взаимодействия ТСХ - тонкослойная хроматография

GlcNAc
Схема 8. Синтез Л'-ацетиллактозамина с использованием циклической мультиферментной системы.
Использование циклических мультиферментных систем позволяет использовать более дешевые исходные реагенты (например, фосфоенолпируват и а-глюкозо-1-фосфат вместо Gala-UDP).
Метод one-pot synthesis позволил [171] синтезировать в короткий срок линейные олиголактозамины (LacNAc[)l-3)n-R (п = 1-5, R = -NHC(S)NH(CH2)2N3 или -
NHC(S)NH(CH2)2NHCOOCMe3). Исходным соединением служил химически синтезированный GlcNAcP-R. Для присоединения галактозного остатка также была использована циклическая система (Схема 9), но, в отличие от предыдущих примеров, в данном случае ферменты не были иммобилизованы на носителе, а находились в растворе.