Биологически активные метаболиты факультативных морских грибов, выделенных из грунтов дальневосточных морей

• Автор: Юрченко, Антон Николаевич
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 177 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

2.1. Биологически активные соединения морских грибов

2.2. Жирные кислоты и их производные

2.3. Терпеноиды

2.4. Поликетиды и производные шикимовой кислоты

2.5. Меротерпеноиды

2.6. Алкалоиды

2.7. Пептиды

2.8. Некоторые заключения
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
3.1. Скрининг
3.2. Установление строения индивидуальных соединений из гриба lsariafelina КММ4
3.3. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Aspergillus carneus
3.4. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Myceliophthora lutea
3.5. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Aspergillus versicolor КММ 4
3.6. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Curvularia
inaequalis
3.7 Установление строения индивидуальных соединений из гриба Wardomyces inflatus
3.8. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Pénicillium citrinum
3.9. Установление строения индивидуальных соединений из гриба Acremonium
roseum
3.10 Биологическая активность выделенных соединений
4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
4.1. Приборы и оборудование

4.2. Хроматография
4.3. Биологический материал
4.4. Выделение соединений из гриба Isaria felina КММ 4
4.5. Выделение соединений из гриба Aspergillus carneus
4.6. Выделение соединений из гриба Myceliophthora lutea
4.7. Выделение соединений из гриба Aspergillus versicolor КММ 4
4.8. Выделение соединений из гриба Curvularia inaequalis
4.9. Выделение соединений из гриба Wardomyces inflatus
4.10. Выделение соединений из триба Pénicillium citrinum
4.11. Выделение соединений из гриба Acremonium roseum
4.12. Определение биологической активности выделенных соединений
4.12.1. Определение цитотоксической активности и действия на формирование и рост колоний опухолевых клеток T-47D, SK-Mel-5, SK-Mel-28, ТНР-1 и HL-
4.12.2. Определение цитотоксической активности и способности усиливать экспрессию белка Hsp70 в клетках асцитной карциномы Эрлиха
4.12.3. Определение цитотоксической активности в отношении спленоцитов мышей
4.12.4. Определение гемолитической активности в отношении эритроцитов мышей
4.12.5. Определение антимикробной активности
4.12.6. Определение токсичности в отношении сперматозоидов морских ежей
4.12.7. Определение токсичности в отношении оплодотворенных яйцеклеток морских ежей
5. ВЫВОДЫ
6. СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. Исследование метаболитов микроскопических грибов оказало существенное влияние на развитие химии и медицины. После открытия пенициллина в 1929 году началось интенсивное изучение наземных микроскопических грибов, которые оказались богатыми источниками биологически активных соединений. За 70 с лишним лет было исследовано более 100 тысяч метаболитов из этих микроорганизмов. Более 10 тысяч из них были биологически активными и более восьми тысяч проявляли антибиотические и антиопухолевые свойства. Хотя исследования наземных грибов интенсивно продолжаются и в настоящее время, число новых метаболитов, выделяемых из них, снижается, так как около 90% культур синтезируют уже известные соединения. Поэтому закономерен интерес к изучению метаболитов грибов из других мест обитания, в том числе и из морских. Несмотря на то, что изучение морских грибов как источников биологически активных соединений было начато еще в 50-х годах прошлого столетия, они остаются еще мало изученными объектами по сравнению с наземными экоформами.
Физические факторы, воздействующие на морские грибы - высокое содержание ионов натрия, низкие температуры, олиготрофный тип питания, высокое гидростатическое давление - обуславливают способность морских грибов к синтезу необычных по структуре метаболитов с разнообразной биологической активностью. Так, из морских грибов были выделены уникальные по структуре биологически активные соединения, которые не были обнаружены у наземных экоформ, несмотря на более чем 70-летнюю историю таких исследований. К таким соединениям относятся большое количество хлорсодержащих метаболитов, макролиды и пептиды с высокой антивирусной активностью. Среди морских грибов были найдены продуценты соединений с фермент-ингибирующей, противовоспалительной, антифунгальной и антибактериальной активностью, в том числе в отношении лекарственно-устойчивых штаммов бактерий. Целый ряд метаболитов морских грибов находятся в настоящее время на различных стадиях клинических испытаний как потенциальные противоопухолевые препараты.
Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы являлось выделение и установление строения вторичных метаболитов факультативных морских грибов,

ем метода Мошера и подверждена для бревиона Н (152) рентгеноструктурным анализом его (8)-МТРА-эфира. Соединение 150 ингибировало репликацию вируса иммунодефицита человека в клетках С8166 (ИК50 14.7 мкМ) [92]. Предлагаемая авторами схема биосинтеза подобных соединений включает присоединение геранилге-ранильного фрагмента к триацетатному предшественнику. Несмотря на структурное сходство с бревионами А-Е, ранее выделенными из наземного Pénicillium brevicompactum [93-94], и с соединениями 150 и 151, бревион Н имеет уникальный ранее не описанный скелет, образованный, по-видимому, в результате окислительной циклизации бревиона G (151).
151 Я, = Н, К2 = ОН
Последующее изучение этого штамма привело к выделению еще трех бревиа-новых меротерпеноидов - бревионов 1-К (153-155) - в дополнение к вышеописанному тритерпену 25 [32]. Бревион I (153) проявил умеренную цитотоксическое действие на клетки МСБ7 с ИК50 7.4 мкМ.