Исследование малопредставленных в ядах кобр белков новых структурных типов

• Автор: Осипов, Алексей Валерьевич
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 104 с.

СОДЕРЖАНИЕ

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР. Минорные компоненты яда кобр.

1. Введение.

2. Нейротоксины.

3. Ферменты

3.1. Оксидаза аминокислот.

3.2. Нуклеазы.

3.3. Гиалуронидаза

3.4. Ацетилхолинэстераза

3.5. Прочие гидролазы.
4. Ингибиторы ферментов
5. Вещества, изменяющие показатели свртываемости крови
6. Вещества, влияющие на систему комплемента сыворотки крови.
6.1. Фактор яда кобры.
6.2. Другие полипептиды, влияющие на систему комплемента
7. Полипептидные соединения с иной функцией
7.1. Фактор роста нервов
7.2. Белки семейства I
7.3. Олигопептиды и муцинподобный гликопротеин.
8. Соединения непептидной природы
9. Заключение
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
1. Выбор рациональной схемы выделения минорных компонентов ядов
2. Использование насекомых для определения общей токсичности соединений.
3. Ппикозилированный цитотоксин из яда кобры . i.
3.1. Структурная характеристика.
3.2. Свойства гликозилированного цитотоксина
4. Белки семейства I в ядах кобр . i и . .
5. Репролизин оксиагин из яда кобры . xi
5.1. Структурная характеристика.
5.2. Механизм влияния оксиагина на систему комплемента сыворотки крови
6. V из яда кобры . .
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Высокотоксичными являются цитотоксины, а также анейротоксины для хордовых, за исключением мангустов и самих кобр 8 эти соединения относятся к обширной группе трхлетельных токсинов 9, Другую группу соединений яда кобр, которые, как правило, тоже высокотоксичны, составляют фосфолипазы А2. Полипептиды указанных структурных типов содержатся в яде в значительных количествах например, доля акобратоксина в сухом яде таиландской кобры доходит до , около от массы сухого яда кобр рода составляют цитотоксины. Эти вещества структурно и функционально наиболее полно охарактеризованы. Низкотоксшпгые соединения содержатся в яде кобр в небольших количествах, в большинстве случаев не превышающих 1 об их свойствах известно, как правило, гораздо меньше. Однако их структура намного более разнообразна, а спектр биологических активностей чрезвычайно широк. Нельзя исключить, что ими обусловлены, по крайней мере, некоторые целебные свойства яда. Недаром ведь нашли применение i viv в практике клинических исследований именно нетоксичные по сути т. И и фактор роста нервов уже и на добровольцах . К тому же, хотя основные фармакологические свойства ядов определяются спецификой действия входящих в их состав мажорных токсических полипептидов, малопредставленные соединения, малотоксичные сами по себе, могут действовать синергично с токсинами, потенцируя или модулируя их эффекты 7,. Поэтому в рамках настоящего обзора будут рассмотрены малопредставленные минорные белковые соединения яда кобр. Для полноты охвата будут рассмотрены компоненты ядов как рода собственно кобры, так и родов i королевская кобра, ii пустынная кобра и семейства i. Понятие минорности компонента в некоторой степени произвольно. Поэтому при выборе объектов для подробного описания использовался следующий критерий компонент не считался минорным, если его содержание в яде или выход при выделении включая изоформы и близкие гомологи того же структурного типа с таким же спектром активности превышает 4 от массы сухого яда. Впрочем, там, где это требуется для целостности картины, основные и высокотоксичные соединения тоже вскользь упоминаются. Довольно сложно предложить структурную классификацию для всех минорных компонентов яда кобр. Поскольку для многих из них информация по структуре крайне скупа, то, в рамках задач настоящего обзора, удобнее пользоваться классификацией, основанной прежде всего на биологических свойствах рассматриваемых веществ, останавливаясь на структурных особенностях соединений внутри каждой группы. Токсины яда кобр разделяются на две большие функциональные группы цитотоксины и нейротоксины. Цитотоксины повреждают ткани путм лизиса клеток . Нейротоксины нарушают передачу нервного импульса. Постсинаптичсские нейротоксины анейротоксины связываются подобно атубокурарину с никотиновым ацетилхолиновым рецептором нАХР постсинаптической мембраны нервномышечного синапса, при этом блокируют участки связывания ацетилхолина и посредством этого предотвращают деполяризующее действие медиатора на мембрану . Нейротоксины блокируют нейрональный нАХР . В целом, эти группы соединений нельзя назвать ни низкотоксичными, ни малопредставлснными. Характерная особенность строения токсинов кобр трхпетельная структура, заключающаяся в наличии трх полипептидных петель, выступающих из гидрофобной сердцевины и ограниченных дисульфидными связями, стабилизирующих молекулу в активной конформации их восстановление полностью устраняет токсический эффект полипептида. Аминокислотными остатками, важными для поддержания третичной структуры, считаются, кроме цистеина, Туг, в1у и Рго в нумерации эрабутоксина Ь . По структуре анейротоксины кобр делятся на два основных типа короткие тип I, состоящие из аминокислотных остатков и имеющие 4 внутримолекулярных дисульфидных связи, и длинные тип II нейротоксины, состоящие из остатков и имеющие пятую дисульфидную связь в средней петле II 9,. К промежуточным типам с трхпетельной структурой, но с относительно невысокой токсичностью можно отнести мускариновые токсины состоят из остатков, но имеют 4 дисульфидных связи и слабые токсины состоят из остатков, но пятую дисульфидную связь имеют в Мконцсвой петле I .