Создание диагностических тест-систем с использованием полимерных микросфер

• Автор: Волкова, Екатерина Владимировна
• Шифр специальности: 03.01.06, 02.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Вакцинопрофилактика - эффективный метод борьбы с заболеваниями дифтерией и столбняком

1.2. Диагностические тест-системы, работающие по принципу реакции агглютинации

1.3. Полимерные микросферы в качестве носителей биолигандов для иммунодиагностических тест-систем

Глава 2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

2.1. Исходные реагенты

2.2. Исследование реакции пассивной гемагглютинации

2.3. Синтез полимерных суспензий

2.4. Исследование коллоидно-химических свойств полимерных суспензий

2.5. Ковалентная иммобилизация белков на поверхность полистирольных частиц
2.6. Постановка реакции пассивной гемагглютинации и реакции
пассивной латексной агглютинации
2.7. Определение уровня антител к дифтерийному анатоксину в сыворотках крови человека
2.8. Получение композиционных полимерных частиц с высокой удельной поверхностью
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Исследование кинетики и топохимии реакции пассивной
гемагглютинации

3.2. Выбор полистирольных микросфер для разработки диагностических тест-систем, работающих по принципу реакции пассивной латексной агглютинации
3.3. Создание диагностических тест-систем, работающих по принципу реакции пассивной латексной агглютинации
3.4. Клинико-лабораторные испытания латексного диагностикума для определения уровня антител к дифтерийному анатоксину
3.5. Разработка нового типа частиц носителя биолигандов для реакции пассивной латексной агглютинации
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ
В области практической медицины находят широкое применение диагностические тест-системы для проведения полуколичественного анализа методом реакции пассивной гемагглютинации (РПГА). Работа гемагглютинационных диагностикумов основана на протекании иммунохимической реакции между фиксированными на поверхность эритроцитов антигенами (антителами) и специфическими антителами (антигенами), содержащимися в исследуемых образцах. Эта реакция сопровождается образованием визуально детектируемого агглютината на поверхности дна и-образной лунки при постановке РПГА микрометодом.
Широкое распространение гемагглютинационных диагностикумов связано с тем, что они имеют высокую чувствительность и специфичность И отличаются простотой постановки исследования, быстротой получения результатов, отсутствием необходимости в дорогом аппаратурном оснащении и невысокой стоимостью проводимого анализа.
Однако производство РПГА тест-систем и обеспечение их устойчивости во время хранения сопряжено с рядом трудностей, вызванных применением в качестве носителей биолигандов эритроцитов. Эритроциты получают из крови млекопитающих или птиц, содержание которых на специализированных фермах является трудоемким и дорогостоящим. Свойства эритроцитов часто зависят от источника и способа их выделения, сезона их взятия и многих других факторов, поэтому при производстве диагностикумов эритроциты трудно поддаются стандартизации.
Современным и актуальным решением существующих проблем является замена эритроцитов на полимерные микросферы и создание на их основе диагностических тест-систем, работающих по принципу реакции пассивной латексной агглютинации (РПЛА). Для замены эритроцитов на полимерные микросферы необходимы знания кинетики и топохимии реакции пассивной гемагглютинации, без которых невозможно сформулировать требования к
Приведенные данные о современном состоянии и проблемах диагностических методов определения напряженности поствакционного иммунитета к столбняку и дифтерии у людей свидетельствуют о востребованности диагностических тест-систем, работающих по принципу реакции пассивной латексной агглютинации. Одним из способов создания таких тест-систем является замена эритроцитов, используемых в диагностикумах, работающих по принципу реакции пассивной гемагглютинации, на полимерные микросферы. Проведенный анализ литературы показал, что существующая проблема замены эритроцитов на полимерные микросферы до сих пор не решена и остается актуальной задачей.