Состояние систем глутатиона и свободнорадикального окисления у больных псориазом и возможности их коррекции

• Автор: Полякова, Алина Владимировна
• Шифр специальности: 14.03.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 106 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. Система глутатиона как естественная цитопротекторная система

1.2. Современные представления о патогенезе псориаза

1.3. Состояние систем глутатиона и свободнорадикального окисления у больных псориазом

1.4. Применение препаратов цитопротективного действия в терапии

псориаза

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Методика проведения клинических исследований

2Л Л. Клиническая характеристика пациентов
2.2. Получение образцов эритроцитов для исследований
2.3. Методы проведения лабораторных исследований
2.3.1 .Определение содержания субстратов в эритроцитах
2.3.2. Определение активности ферментов в эритроцитах
2.4. Характеристика использованных фармакологических препаратов
Г ЛАВА 3. Состояние систем глутатиона и свободнорадикального окисления в эритроцитах больных с ограниченными и
распространёнными формами псориаза
ГЛАВА 4. Результаты влияния препаратов цитопротективного действия на состояние систем глутатиона и свободнорадикального окисления у
больных с распространёнными формами псориаза
ГЛАВА 5. Результаты анализа клинической эффективности применения препаратов цитопротективного действия в терапии распространённых
форм псориаза
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
СПИСОК ИЛЛЮСТРАТИВНОГО МАТЕРИАЛА
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность исследования. Согласно современным представлениям, псориаз - это хронический воспалительный иммунозависимый генодерматоз, основное патогенетическое звено которого проявляется усилением пролиферативной активности кератиноцитов, приводящей к нарушению процессов кератинизации. При этом псориаз является наиболее распространённым дерматозом, характеризующимся системными патологическими проявлениями, обусловленными нарушением обмена веществ не только в эпидермисе, но и в других тканях [62,155]. Несмотря на значительный прорыв в сфере иммунобиологической терапии как наиболее эффективного метода лечения этой болезни, прогресс в понимании этиологии, патогенеза и разработке эффективных методов лечения псориаза остаётся незначительным, рост заболеваемости продолжается. Нередко заболевание характеризуется тяжёлым течением и приводит к инвалидизации [62]. В ряде немногочисленных работ, посвящённых изучению метаболизма при псориазе, отмечены нарушения в обмене белков, включая факторы роста и цитокины, углеводов, липидов [8,53,56], нуклеиновых кислот, циклазной и эндокринной системах [1, 145], ферментативной активности [3, 99,109, 141, 142,143, 149, 154] и других показателях [4,5, 40,44, 46, 161]. Отдельные работы посвящены перекисному окислению липидов (ПОЛ) и антиоксидантной системе (АОС), как одной из ведущих цитопротекторных систем [23,94, 106]. Установлено, что первичные нарушения возникают в эпидермисе и далее вызывают реакции иммунной системы как инициатора и трансмиттера первично-запрограммированных изменений в керати-ноцитах [71,131]. Формирование псориатического очага представляет собой Т-клеточно опосредованный воспалительный процесс с элементами аутоиммунного характера и, как во всяком воспалительном процессе, одним из патогенетических звеньев является интоксикация, во многом влияющая на характер течения, эффективность терапии и исход заболевания [96, 118, 132]. Отмечено, что детокси-кационная гемоперфузия (гемосорбция, плазмаферез) являются методами, значительно улучшающими эффективность лечения этих больных [9,10, 39, 89]. В ряде

мерении их концентрации по характерному спектру поглощения с максимумом при длине волны 233 нм.
К 0,5 мл гемолизата эритроцитов, разведенного 5 мМ ТРИС-НС1 буфером с pH 7,6 в соотношении - 1:19, добавляли 4,5 мл экстрагирующей смеси гептан: изопропиловый спирт, приготовленной в соотношении 1:1 по объему. Пробирки плотно закрывали полиэтиленовыми пробками и тщательно перемешивали активным встряхиванием в течение 5 мин, после чего давали отстояться (до образования четкой границы между фазами), отбирали 0,5 мл гептановой (верхней) фазы и добавляли к ней 2,5 мл этилового спирта (96%). Оптическую плотность раствора определяли в кювете с длиной оптического пути 10 мм против этилового спирта с гептаном (соотношение 5:1) при длине волны 233 нм. Концентрацию ДК рассчитывали с учетом разведения с использованием молярного коэффициента светопоглощения при указанной длине волны (8=2,27105 М-1-см-1) и выражали в нмоль/г гемоглобина.
Малоновый диальдегид Концентрацию МДА определяли по методу исЫуата М. (1978) [48, 151] в модификации кафедры клинической биохимии и лабораторной диагностики Военно-Медицинской Академии им. С.М. Кирова. Принцип метода основан на взаимодействии между МДА и тиобарбитуровой кислотой (ТБК) в кислой среде при высокой температуре с образованием окрашенного триметинового комплекса, имеющего максимум поглощения на 532 нм.
К 0,3 мл гемолизата эритроцитов, разведенного 5 мМ ТРИС-НС1 буфером с pH 7,6 в соотношении - 1:19, добавляли 3 мл 1 % раствора ортофосфорной кислоты и 1 мл 0,6% раствора ТБК («11еапа1», Венгрия). При этом pH смеси находился в интервале от 1,6 до 1,8, что представляло оптимальную зону для проведения ТБК-реакции. Закрытые крышками пробирки инкубировали в кипящей водяной бане в течение 45 мин. После охлаждения проводили экстракцию ТБК-продуктов добавлением 3 мл н-бутанола. Бутанольные экстракты фотометрировали в кювете с длиной оптического пути 10 мм при двух длинах волн (532 и 580 нм) против н-