Клинико-диагностическая значимость определения показателей системного и местного иммунитета слизистой влагалища после антихеликобактерной терпии

• Автор: Суровцева, Татьяна Викторовна
• Шифр специальности: 14.03.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 100 с. : 4 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Влияние антибиотиков на показатели местного и системного

иммунитета

1.2. Влияние антибиотиков на функциональную активность

нейтрофилов

1.3. Врожденный (местный) иммунитет женского генитального

тракта
1.4. Антибиотикотерапия (антихеликобактерная терапия) и кандидозы слизистых желудочно-кишечного и

генитального трактов

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Характеристика обследованных лиц
и объем проведенных исследований
2.2. Методы клинико-лабораторного исследования
2.2.1. Цитологические (ПАП-тест) и бактериоскопические
исследования
2.2.2 Определение секреторного иммуноглобулина А (эА) во влагалищных секретах твердофазным иммуноферментным методом
2.2.3. Определение фактора некроза опухоли (ТИЕ-а)
во влагалищных секретах твердофазным иммуноферментным методом
2.2.4. Определение интерлейкина - 8 (ТЬ-8) во влагалищных секретах твердофазным иммуноферментным методом
2.2.5. Фагоцитарная активность нейтрофильных гранулоцитов
2.2.6. Метод восстановления нитросинего тетразолия
(НСТ тест)
2.2.7. Метод люминолзависимой хемилюминесценции

нейтрофилов
2.3. Иммуноцитохимические исследования
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Кандидозы вульвы и влагалища у пациенток после проведения
курсов антихеликобактерной терапии
3.1.1. Частота обнаружения элементов гриба рода Candida в слизистой генитального тракта у женщин контрольной группы
3.1.2. Частота обнаружения элементов гриба рода Candida
в слизистой генитального тракта у пациенток после первого курса антихеликобактерной антибиотикотерапии
3.1.3. Частота обнаружения элементов гриба рода Candida в слизистой генитального тракта у пациенток после
повторного курса антихеликобактерной антибиотикотерапии
3.2. Функциональная активность нейтрофилов у пациенток
после антихеликобактерной антибиотикотерапии
3.2.1. Фагоцитарная активность нейтрофилов
3.2.2. Тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест)
3.2.3. Хемилюминесценция нейтрофилов
3.3. Интерлейкин-8 (IL-8), фактор некроза опухолей -альфа (TNF-a) и иммуноглобуллин A (slgA) в секрете влагалища у пациенток
после антихеликобактерной терапии
3.3.1. Интерлейкин -8 (IL-8) во влагалищном секрете
3.3.2 Фактор некроза опухолей -альфа (TNF-a)
во влагалищном секрете
3.3.3. Секреторный иммуноглобулин A(sIgA)
во влагалищном секрете
3.4. Продукция интерлейкина-8 (IL-8) и фактора некроза опухолей - альфа (TNF-a) клетками периферической крови у пациенток после

антихеликобактерной терапии

3.4.1 .Продукция интерлейкина (1Ь-8)
клетками периферической крови
3.4.2. Продукция фактора некроза опухолей -альфа (ТОТ-а) клетками периферической крови
3.5. Корреляционный анализ между содержанием цитокинов
(1Ь-8 и ТЛБ-а) в секрете влагалища и их уровнями в сыворотке крови у женщин с хеликобактер ассоциированными кислото -зависимыми заболеваниями
3.6. Иммуноцитохимические исследования хеликобактера
в слизистых прямой кишки и влагалища
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ ТЕМЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

иммуноферментный метод с использованием моноклональных антител к иммуноглобулинам человека и пероксидазы хрена в качестве индикатора фермента. Были использованы наборы реагентов РгоЬогщ производства ТО «Протеиновый контур» НИИ особо чистых биопрепаратов (Санкт-Петербург).
Набор реагентов содержит полистирольный 96-луночный планшет, предварительно активированный обработкой при 4*С иммуноглобулиновой фракцией кроличьей антисыворотки к цепям иммуноглобулинов человека (50 мкг/мл в 20 мМ фосфатном буфере, pH 7,5).
Анализируемые образцы разводили в 100 раз ИФА -буфером. В лунки планшета в соответствии с планом расположения стандартов и образцов вносили по 10 мкл разведенной стандартной сыворотки и образцов. Образец вносили в ячейки и содержащиеся в нем иммуноглобулины связывались с активированной подложкой. Для раздельного детектирования связавшихся иммуноглобулинов использовали три типа мышиных моноклональных антител к цепям иммуноглобулинов человека. Для соблюдения требований контроля качества все пробы вносили с параллельными точками.
Планшет с образцами инкубировали 45 мин при 37*С в шейкере-инкубаторе. Удаляли жидкость из планшета встряхиванием, затем 20мМ натрий-фосфатным буфером pH 7,3 по 3 мкл. Затем вносили в лунки по 100 мкл моноклональных мышиных антител против эА. Планшет инкубировали 45 мин при 37*С шейкере-инкубаторе. Удаляли жидкость встряхиванием, трижды промывали планшет 20мМ натрий-фосфатным буфером pH 7,3 по 300 мкл. Затем вносили в лунки по 100 мкл конъюгатов ммуноглобулинов мыши с пероксидазой хрена. Детекцию антител осуществляли по взаимодействию моноклональных антител с кроличьими антителами к иммуноглобулинам мыши, конъюгированным с пероксидазой хрена.
Планшет инкубировали 45 мин при37*С в шейкере-инкубаторе. Удаляли жидкость из планшета путем встряхивания, трижды промывали