Оптимизация дифференциальной диагностики опухолей из зрелых В- и Т-клеток методом проточной цитометрии

• Автор: Вершинина, Марина Германовна
• Шифр специальности: 14.03.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 113 с. : 26 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ИНФОРМАТИВНОСТЬ ИММУНОФЕНОТИПИРОВАНИЯ КАК МЕТОДА ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКИ ХРОНИЧЕСКИХ ЛИМФОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ

1.1. Хронические лимфопролиферативные заболевания В-клеточного происхождения

1.1.1. В-клеточный хронический лимфолейкоз

1.1.1.1. Классическая классификация В-ХЛЛ

1.1.1.2. Последние достижения в классификации В-ХЛЛ

1.1.1.3. Редкие формы В-ХЛЛ

1.1.2. В-клеточный пролимфоцитарный лейкоз
1.1.3. Волосато-клеточный лейкоз и ВКЛ вариант
1.2. В-клеточные неходжкинские лимфомы в фазе лейкемизации
1.2.1. Лимфома селезенки с ворсинчатыми лимфоцитами
1.2.2. Лимфома из клеток мантийной зоны
1.2.3. Фолликулярная лимфома
1.2.4 Лимфома Беркитта
1.2.5. Диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДВКЛ)
1.2.6. Множественная миелома (ММ)
1.2.7. Лимфоплазмоцитарная лимфома
1.2.8. Экстранодальная мукозоассоциированная В-клеточная лимфома (MALT-лимфома) и нодальная В-клеточная лимфома
маргинальной зоны
1.2.9. Острый плазмобластный (плазмоклеточный) лейкоз
1.3. Зрелые Т- и NK-клеточные лимфопролиферативные заболевания
1.3.1. Т-клеточный пролимфоцитарный лейкоз (Т-ПЛЛ)

1.3.2. Грибовидный микоз/синдром Сезари
1.3.3. Т-клеточный лейкоз/лимфома взрослых (ТКЛ/ЛВ)
1.3.4. Т-клеточный лейкоз из больших гранулярных лимфоцитов
1.3.5. Агрессивный ИК-клеточный лейкоз
1.4. Формирование панели диагностических МКА для
иммунофенотипирования
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы исследования
2.1.1. Общая характеристика обследованных больных и объем проведенных исследований
2.2. Методы исследования
2.2.1. Проточно-цитометрический метод иммунофенотипирования 52 клеток периферической крови и костного мозга
2.2.1.1. Методика определения поверхностных антигенов
2.2.1.2. Особенности исследования экспрессии легких и тяжелых цепей поверхностных иммуноглобулинов
2.2.1.3. Методика определения внутриклеточных антигенов с помощью конъюгированных антител
2.2.1.4. Панель диагностических МКА для-проточно-цитометрических исследований зрелых В- и Т- клеточных опухолей
2.2.2. Методы статистической обработки
Глава 3. ИЗУЧЕНИЕ ДИАГНОСТИЧЕСКОЙ ИНФОРМАТИВНОСТИ
ЭКСПРЕССИИ АНТИГЕНОВ НА ЛИМФОИДНЫХ КЛЕТКАХ ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ХРОНИЧЕСКИХ ЛПЗ
3.1. Анализ гистограмм, полученных в результате проточно-цитометрического исследования
3.1.1. Информативность гейтов анализируемых клеток
3.1.2. Дифференциация популяций антигенпозитивных клеток по степени экспрессии СБ-рецепторов

3.1.3. Дифференциация линейности ЛПЗ В- или Т-клеточного происхождения
3.1.4. Информативность моноклональности лимфопролиферативного заболевания
3.2. Диагностика различных форм лимфопролиферативных заболеваний
В-клеточного происхождения
3.2.1. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных хроническим В-клеточным лимфоцитарным лейкозом
3.2.2. Характер экспрессии СБ-антигенов при В-пролимфоцитарном лейкозе
3.2.3. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных волосатоклеточным лейкозом
3.2.4. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных лимфомой маргинальной зоны селезенки с ворсинчатыми лимфоцитами
3.2.5. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных лимфомой из клеток мантийной зоны
3.2.6. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных лимфомой Беркитта
3.2.7. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных острым
плазмобластным (плазмоклеточным) лейкозом
3.3. Диагностика различных форм лимфопролиферативных заболеваний Т-клеточного происхождения
3.3.1. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных Т-клеточным
пролимфоцитарным лейкозом
3.3.2. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных грибовидным
микозом (синдром Сезари)
3.3.3. Характер экспрессии СБ-антигенов у больных Т-клеточным
лейкозом из больших гранулярных лимфоцитов
3.4. Изучение диагностической информативности средней интенсивности флюоресценции маркеров при зрелых В-клеточных опухолях
1.2.5. Диффузная В-крупноклеточная лимфома (ДВКЛ)
Диффузно В-крупноклеточная лимфома включает группу опухолей- с гетерогенными морфологическими, . иммунофенотипическими,
цитогенетическими,, молекулярными, и клиническими* особенностями (De Beval, L., Harris N.L., 2003). Неопухолевый i аналог — В-клетки зародышевого центра (центробласты) и постгерминативпой зоны, (иммунобласты). ; Лейкемизация ДВКЛ происходит не так быстро, как при ФЛ' или JIKM3. Характерно поражение лимфоидной ткани, но в 49% случаев,встречается экстранодальная локализация. (ЦНС, кожа, желудочно-кишечный, тракт, . кости, яички, мягкие ткани и др.)- При лейкемизации ДВКЛ в. костном мозге и периферической крови наблюдается инфильтрация бластными клетками. Эта лимфома не имеет специфического иммунофенотипа. По сравнению с нормальными лимфоцитами большие неопластические В-клетки ДВКЛ имеют поразительно высокие сигналы переднего светорассеяния (FSC) (Jaffe E.S. et al., 2001); Опухолевые клетки характеризуются вариабельной экспрессией пан-В-клеточных маркеров CD 19, CD20, CD22 и CD79a. Не смотря на В-клеточное происхождение, на лимфомных клетках не обнаруживается Smlg или cylg экспрессия (Ravvstron А.С. et al., 2002). В ряде случаев отмечается экспрессия антигенов CD5 или CD10. В 20-30% случаев наблюдается * повышение синтеза BCL2 протеина вследствие транслокации t(14; 18). В 25-40% случаев обнаруживаются транслокации или соматические мутации- гена BCL6 и в 5-15% случаев транслокации гена с-Мус из 8 хромосомы в один из генов иммуноглобулинов (Kramer М.Н. et al., 1998; Akasaka Т. et al., 2000). Возможна экспрессия CD30 и ЭМА (эпителиальный мембранный антиген) при отсутствии ALK-протеина (anaplastic lymphoma kinase) (Szczepanski Т. et al., 2003). Пролиферативная активность клеток (Ki-67) высокая.и составляет,40-90%.
1.2.6. Множественная миелома (ММ)
ММ, локализованная первично в костном мозге, состоит из