Миелоидные супрессорные клетки при экспериментальной туберкулёзной инфекции

• Автор: Цыганов, Евгений Николаевич
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 105 с. : ил.

Введение

Актуальность проблемы

Научная новизна

Практическая значимость

Структура и объём диссертации

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Иммунный ответ хозяина на инфекцию М. tuberculosis

1.1.1 Начальные этапы иммунного ответа на инфекцию Mtb

1.1.2 Роль отдельных популяций иммунокомпетентных клеток в противотуберкулёзном иммунитете

1.1.3 Особенности иммунного ответа при прогрессировании ТБ инфекции

1.1.4 Прогрессирование ТБ: роль воспалительного ответа

1.1.5 Прогрессирование ТБ: супрессия иммунного ответа Т-лимфоцитов
1.2 Супрессорные клетки миелоидного происхождения
1.2.1 Фенотип клеток и субпопуляции
1.2.2 Эффекты МС на иммунную систему организма
1.2.3 Механизмы супрессии Т-лимфоцитов клетками МС
1.2.4 Факторы, индуцирующие образование МС при патологических состояниях
1.2.5 Заключение
Глава 2. Материалы и методы
2.1 Животные
2.2 Культуральные среды и растворы
2.3 Экспериментальная туберкулёзная инфекция
2.4 Определение количества микобактекрий в лёгких заражённых мышей
2.5 Получение суспензий клеток лёгочной ткани, костного мозга и селезёнки экспериментальных мышей
2.6 Анализ клеточных суспензий методом проточной цитометрии
2.7 Световая и конфокальная микроскопия
2.8 Выделение клеточных популяций КМ Gr-lhl CDllb+ и Gr-ldlm CDllb+ методом магнитной сортировки
2.9 Оценка супрессорной активности клеток КМ
2.10 Иммуноферментный анализ содержания ИФН-у в лёгочной ткани и культуральных супернатантах
2.11 Измерение количества оксида азота (11)
2.12 Адоптивный перенос клеток Gr-ldlm
2.13 Статистическая обработка результатов
Глава 3. Результаты исследований
3.1 Динамика появления клеток Gr-ldlm CDllb+ при инфекции М. tuberculosis у мышей I/St
3.2 Накопление клеток Gr-ld,ra при прогрессирующей ТБ инфекции у мышей различных линий
3.3 Характеристика поверхностного фенотипа клеток Gr-ld,m и Gr-lhl
3.4 Анализ морфологии ядер клеток Gr-ldim и Gr-lhl
3.5 Супрессия Т-клеточного ответа клетками КМ инфицированных мышей
3.6 Супрессия Т-клеточного ответа клетками Gr-ldlm
3.7 Анализ механизмов супрессорной активности клеток Gi-ldlm
3.8 Влияние адоптивного переноса клеток Gr-ldlm на продукцию ИФН-у в лёгочной ткани
Заключение
Глава 4. Обсуждение результатов
4.1 Накопление Gr-1-экспрессирующих клеток при ТБ
4.2 Субпопуляции МС
4.3 Подавление Т-клеточного ответа при ТБ инфекции
4.4 Факторы, индуцирующие накопление МС
4.5 Роль МС при ТБ инфекции
Выводы
Список цитируемой литературы

цитокинового профиля влияют на структуру образующейся популяции МС. Cuenca и соавт.выдвинули предположение, что с усилением воспалительного процесса уменьшается степень «зрелости» МС (Cuenca A. G., 2011). По другим данным, супрессорная активность менее зрелых миелоидных клеток МС выше, чем более зрелых. Этим могут объясняться данные об усилении супрессорной активности МС при усилении воспалительного ответа.
1.2.5 Заключение.
ТБ - инфекционное заболевание, в патогенезе которого большая роль принадлежит нарушениям иммунного ответа. К настоящему времени накоплено большое количество данных, свидетельствующих о том, что тяжёлое течение ТБ процесса ассоциировано, с одной стороны, с развитием воспалительных реакций, а с другой - с подавлением Т-клеточного звена иммунного ответа (Bold Т. D., 2011; Lyadova I. V., 2012; Pilheu J. А., 1997). Механизмы, лежащие в основе этих изменений, до конца не понятны. Исследования, проведённые ранее в ФГБУ «ЦНИИТ» РАМН, показали, что прогрессирующая ТБ инфекция характеризуется высоким уровнем экспрессии провоспалительных цитокинов и накоплением в лёгких клеток, имеющих фенотип Gr-ldim. В литературе сведения о роли клеток Gr-ldlm при ТБ отсутствуют. В то же время имеется большое количество данных о природе и фукнционировании подобных клеток (имеющих фенотип Gr-1+ CDllb+) при других заболеваниях и патологических состояниях - опухолях, трансплантации тканей, травмах, некоторых инфекциях (Brys L., 2005; Cuenca A. G., 2011; Gabrilovich D. I., 2009; Gabrilovich D. I., 2012; Macatangay B. J., 2012; Sunderkotter C., 2004; Umansky V., 2012; Van Ginderachter J. A., 2010; Zhang H., 2010). Эти данные свидетельствуют о том, что клетки Gr-ldim представляют собой незрелые миелоидные клетки, обладают способностью подавлять Т-клеточный иммунный ответ и в больших количествах образуются в условиях хронического воспаления. Таким образом, одним из механизмов, связывающих прогрессирование ТБ, гиперергический воспалительный ответ и супрессию Т-клеточного ответа может являться образование и накопление в периферических органах (в частности, в лёгких) большого количества незрелых миелоидных клеток, обладающих выраженной иммуносупрессорной активностью по отношению к Т-лимфоцитам. Настоящая работа посвящена изучению клеток Gr-ldUTI при экспериментальной ТБ инфекции.