Влияние дистантного прекондиционирования и ингибитора аргиназы L-норвалина на ишемические и реперфузионные повреждения печени (экспериментальное исследование)

• Автор: Лопатин, Дмитрий Васильевич
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Смоленск
• Количество страниц: 100 с. : 26 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Ишемическое и реперфузионное повреждение тканей печени.

1.2. Механизмы протекторного действия ишемического прекондиционирования при ишемических и реперфузионных поражениях печени
1.3. Фармакологическое моделирование защитных эффектов ишемического прекондиционирования.
1.4. Аргиназы как возможная фармакологическая мишень при моделировании защитного действия второго окна ишемического прекондиционирования.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1 Исследование ишемического и реперфузионного повреждения печени

3.2 Исследование влияния прямого ишемического прекондиционирования при ишемии/реперфузии печени
3.3 Исследование влияния дистантного ишемического прекондиционирования при ишемии/реперфузии печени
3.4 Исследование влияния Е-норвалина в дозах 10 и 100 мг/кг и адеметионина в дозе 400 мг/кг при ишемии реперфузии печени
3.5 Исследование влияния сочетанного применения дистантного ишемического прекондиционирования и Е-норвалина в дозе 100 мг/кг
ГЛАВА4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ СОБСТВЕННЫХ
ИССЛЕДОВАНИЙ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АТФ - аденозинтрифосфат
ДИПК - дистантное ишемическое прекондиционирование
ИПК - ишемическое прекондиционирование
иРНК - информационная рибонуклеиновая кислота
ЛДФ - лазерная допплеровская флоуметрия
ЛПС - липолисахариды
цГМФ - циклический гуанозин монофосфат
еРЮв - эндотелиальная N0 - синтаза
Ні ґ- гипоксия индуцируемый фактор
ЮЕР - фактор роста эндотелия сосудов
ТвРЬЗ - трансформирующий фактор роста бета
ЮР - инсулиноподобный фактор роста
№Х - проапоптотический фактор
НКЕ-участки - участки генов, ответственные за ответ на гипоксию
Кесіох-статус - окислительно-восстановительный потенциал
Вс1-2 - внутриклеточный белковый фактор-регулятор апоптоза
Т№а - фактор некроза опухоли альфа
іРЮБ - индуцибельная N0 - синтаза
Ь-ЫАМЕ - метиловый эфир КГ-нитро-Е-аргинина
N0 - оксид азота

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность исследования
По данным ВОЗ, каждый третий взрослый человек на Земле страдает тем или иным заболеванием печени. Заболеваемость патологией этого органа стабильно находится на четвёртом месте в структуре общей заболеваемости, с 1960 г. отмечается неуклонный рост числа данных пациентов. В патогенезе большинства заболеваний печени далеко не на последнем месте находится региональная или генерализованная ишемия, в одних случаях играющая инициирующую роль, в других усугубляющая течение патологии. Большой процент тяжелых поражений печени требует хирургической коррекции, зачастую усугубляя тяжесть ишемического повреждения, что является причиной неблагоприятных исходов [24, 162].
В связи с чем непрерывно ведется поиск технологий и фармакологических агентов, способных уменьшить влияние как ишемического, так и реперфузионного повреждения.
Одной из ключевых мишеней при ишемии является митохондрия, повреждаемая как при прекращении кровотока в сосудах органа, так и при его восстановлении [113, 130, 136, 247]. Митохондриальное окислительное повреждение усиливается образованием активных форм кислорода, провоспалительных цитокинов, факторов активации апоптоза [120, 137]. Во многом регуляция как оксидативного стресса, так и функции различных систем, в том числе и регуляция кровообращения, принадлежит универсальному мессенджеру - оксиду азота (N0), который образуется из Ь-аргинина под действием ферментов эндотелиальной и индуцибельной N0-синтаз [54, 111, 201].
Уровень N0 является ключевой точкой фармакологической коррекции, изменение его сказывается на выраженности как ишемического, так и реперфузионного поражения тканей. Исследования последних лет показали,

Ишемическое реперфузионное повреждение печени воспроизводили путем 15 минутного пережатия аналога печено-двенадцатиперстной связки крысы с последующим восстановлением кровотока и выведением животного из эксперимента на сроке 1 сутки, данный режим дозирования ишемии был выбран, как один из наиболее распространенных при исследовании надпорогового ишемического стимула (Ноббліп М.А. 2003).
Прямое ишемическое прекондиционирование производили за 30 минут до эпизода более глубокой 15 минутной ишемии, путем пережатия аналога печеночно-двенадцатиперстной связки крысы на более короткий срок 5 минут.
Дистантное ишемическое прекондиционирование производили, так же как и прямое ишемическое прекондиционирование, за 30 минут до эпизода 15 минутной ишемии по разработанной нами методике путем эластической компрессии артерий верней трети бедра в течение 15 минут.
Дизайн эксперимента состоит из следующих блоков:
1. Группа по отработке методов исследования, доз и режимов наркоза, методик прекондиционирования
2. Интактная группа (животные, у которых определяли биохимические показатели, забирали образцы печени на морфологическое и гистохимическое исследование без воспроизведения ишемии и ее коррекции)
3. Группа ишемии реперфузии (животные, у которых воспроизводили 15 минутную ишемию печени и последующую реперфузию)
4. Группа исследования эффективности воздействия прямого ишемического прекондиционирования на морфофункциональное состояние печени (животные, которым до 15 минутной ишемии