Токсико-гигиенические подходы к экспериментальному моделированию ртутной энцефалопатии

• Автор: Титов, Евгений Алексеевич
• Шифр специальности: 14.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Иркутск
• Количество страниц: 132 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Перечень сокращений

Введение

1 .Глава 1. Аналитический обзор литературы

1.1 Значимость ртути как глобального загрязнителя

1.2 Воздействие ртути и её производных на головной мозг человека и животных

1.3 Методы экспериментального моделирования энцефалопатии

2. Глава 2 Материалы методы исследования

2.1 Токсикологические методы

2.2 Методы гистологического и цитологического исследования

2.3 Изучение состояния клеточных структур методом электронной микроскопии

2.4 Методы иммуногистохимического анализа
2.5 Методы количественного анализа
2.6 Методы статистического анализа
3. Глава 3. Характер нарушений ткани головного мозга белых крыс при воздействии паров металлической ртути в динамике постконтактного периода
4. Глава 4. Характер нарушений ткани головного мозга белых крыс при воздействии сулемы в динамике постконтактного периода
5.Глава 5. Сравнительный анализ общих и специфических морфофункциональных нарушений в ткани головного мозга при воздействии неорганических соединений ртути в динамике обследования
6.Гоава 6. Методические подходы к моделированию токсической
энцефалопатии с позиции морфометрии
7.Заключение
8.Вывод ы
9.Список литературы

Перечень сокращений
ГТФ - глутатионтрансфераза
НСР - неорганические соединения ртути
ЦНС - центральная нервная система
ЩФ - щелочная фосфатаза
ФСБ - фосфатно-солевой буфер
ФСС - фотостимуляция спонтанная
ФС 2 Гц - фотостимуляция с частотой 2 Гц.
ЗВП - зрительные вызванные потенциалы GFAP - глиальный фибриллярный кислый белок NSE - нейронспецифическая енолаза GSH - SH - глютатион DAB - диаминобензидин

ВВЕДЕНИЕ
В числе приоритетных и перспективных направлений, определенных на 3 Всероссийском съезде токсикологов (2008г.), являются исследования механизмов отдаленных эффектов химических веществ, в том числе и избирательной нейротоксичности. В последние годы в клинике поражений токсическими веществами (тяжелые металлы, полихлорированные углеводороды, пестициды, продукты горения) в отдаленный постконтактный период выявляется патология центральной и периферической нервной системы, обусловленная последствиями пролонгированного воздействия вредных факторов [19]. К сожалению, исследований, посвященных причинам и характеру структурно-морфологических поражений нервной ткани в отдаленном периоде нейроинтоксикаций, крайне мало.
Особую опасность для нервной системы представляют ртуть и ее
соединения, поступающие в окружающую среду из природных и
антропогенных источников. В рамках концепции, разрабатываемой
добровольным Глобальным партнерством правительств по ртути с целью
решения мировой проблемы выбросов этого трансграничного загрязнителя,
угрожающего здоровью миллионов людей, указывается на расширение
знаний об опасности и риске воздействия ртути на организм человека [5].
Общепризнано, что воздействие ртути нарушает процесс пролиферации
клеток головного мозга, угнетает механизмы митоза, вызывает развитие
периваскулярного и перицеллюлярного отека ткани мозга, дистрофию
нейронов и клеток Пуркинье, изменение ферментативной активности
[31,11,45]. Формирование органических изменений в нервной системе при
воздействии ртути сопровождается появлением признаков токсической
энцефалопатии с поражением пирамидной и экстрапирамидной систем,
мозжечка, гипоталамической области, коры больших полушарий. Наряду с
этим, есть основания полагать, что и после прекращения контакта с
нейротоксикантом продолжают формироваться структурно-морфологические

функциональные нарушения коры головного мозга, мозжечка, гшмппокампа [19,103]. Учитывая это, для изучения состояния ЦНС при длительном воздействии НСР мы исследовали кору головного мозга, как нервный центр, деятельность которого обеспечивает регуляцию разнообразных функций организма и сложные формы поведения, к которому поступают сигналы от всех главных сенсорных образований. Мозжечок исследовался как центр равновесия, поддержания мышечного тонуса, координации движений и контроля сложных и автоматически выполняемых двигательных актов [32]. На основании экспериментальных исследований Якимовой Н.Л., выявивших нарушения кратковременной и долговременной памяти белых крыс с ртутной нейроинтоксикацией, нами исследовался гиппокамп, как центр ответственный за выработку условных рефлексов, а также отвечающий за обучение и память [46].
Исследование структуры нервной ткани у контрольных и экспериментальных животных было проведено на светооптическом исследовательском микроскопе 01утриз ВХ 51. Была изучена нервная ткань коры головного мозга, мозжечка, СА1, СА2 и САЗ полей гиппокампа. Ввод микроизображений срезов мозга в компьютер проводили при помощи камеры 01утриэ.
Головной мозг сразу после декапитации животных фиксировали в 10% нейтральном формалине, с последующей проводкой и заливкой в парафин. Далее на санных микротомах МС-2 (СССР) и НМ 400 (Мюгот, Германия) с использованием одноразовых ножей изготовляли сагиттальные, фронтальные и горизонтальные срезы головного мозга. Приготовленные стандартные серийные срезы толщиной 3-5 мкм наклеивали на стекла, обработанные яичным альбумином. Для оценки состояния клеток головного мозга препараты окрашивали по общепринятым методикам гистологической окраски: гематоксилином и эозином - для выявления общей картины состояния нейронов и клеток глии в различных отделах головного мозга;
тионином (по Нисслю) - для исследования структуры нейронов.