+
Действующая цена700 499 руб.
Товаров:
На сумму:

Электронная библиотека диссертаций

Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО

Расширенный поиск

Анализ структуры и экспрессии района локализации гена flamenco Y Drosophila melanogaster

  • Автор:

    Потапова, Мария Валерьевна

  • Шифр специальности:

    03.02.07

  • Научная степень:

    Кандидатская

  • Год защиты:

    2011

  • Место защиты:

    Москва

  • Количество страниц:

    103 с. : ил.

  • Стоимость:

    700 р.

    499 руб.

до окончания действия скидки
00
00
00
00
+
Наш сайт выгодно отличается тем что при покупке, кроме PDF версии Вы в подарок получаете работу преобразованную в WORD - документ и это предоставляет качественно другие возможности при работе с документом
Страницы оглавления работы

Содержание
Список сокращений и условных обозначений
1. Введение

2. Обзор литературы
2.1. Мобильные генетические элементы дрозофилы и их
классификация 1 о
2.2. Структурная организация ретротранспозона gypsy
2.3. Gypsy и генетическая нестабильность
2.4. Роль покуса flamenco в генетической нестабильности
2.5. Ген DIP1 — один из кандидатов на роль локуса flamenco
2.6. Регуляция экспрессии ретротранспозонов
2.7. Регуляция экспрессии ретротранспозонов РНК-
интерференцией
2.7.1. РНК-интерференция у D.melanogaster
2.7.2. Характеристика малых РНК
2.7.3. Кластеры piPHK
3. Материалы и методы
3.1. Лабораторные линии Drosophila, использованные в
работе
3.2. Штаммы Escherichia coli
3.3. Векторы, использованные для клонирования

фрагментов ДНК
3.4. Условия культивирования лабораторных линий
3.5. Культивирование линий D.melanogaster для получения личинок 3 возраста и эмбрионов 0-24 ч
3.6. Сбор семенников и яичников
3.7. Культивирование клеток E.coli
3.8. Приготовление компетентных клеток и трансформация E.coli
3.9. Выделение плазмидной ДНК методом щелочного лизиса
3.10. Выделение геномной ДНК из взрослых особей
3.11. Обработка ДНК ферментами
3.12. Электрофорез в агарозном геле
3.13. Проведение полимеразной цепной реакции
3.14. Выделение тотальной РНК из эмбрионов, личинок, имаго, яичников и семенников
3.15. 5’-RACE (rapid amplification of cDNA ends) анализ
3.16. Обратная транскрипция и ПНР
3.17. Обратная транскрипция и ПЦР в «реальном времени»
3.18. Секвенирование
3.19. Методы компьютерного анализа
Результаты
4.1. Молекулярно-генетическое исследование гена DIP
4.2. Анализ экспрессии гена DIP1
4.3. Структурная организация гомологов гена DIP1 и
анализ их экспрессии в геномах D. sechellia,
D. mauritiana, D. simulanse, D. erecta и D. yakuba
4.4. Анализ экспрессии генов кластера CG32500, CG32
и CG14476
4.5. Эволюционный анализ кластера генов DIP1, CG32500,
CG32819 и CG14476
4.6. Молекула РНК-предшественник в районе локализации
локуса flamenco
4.7. Исследование предполагаемой области начала транскрипции РНК-предшественника
4.8. Исследование области flamenco методом ПЦР в реальном времени
5. Обсуждение
6. Выводы
7. Список литературы
8. Благодарности

«уничтоженного» МГЭ, которая связывается белком Ago3. Новообразованный комплекс ' комплементарно взаимодействует с предшественником piPHK и способствует вырезанию антисмысловой короткой молекулы РНК. Затем цикл повторяется. Смысловые и антисмысловые piPHK, связываемые Ago3 и Aub соответственно, 5’-концами перекрываются точно на 10 н. (Malone et al., 2009). Множество перекрывающихся piPHK действительно были обнаружены при секвенировании библиотек коротких РНК. Не исключено, что благодаря механизму амплификации множество piPHK попадают с цитоплазмой в ооцит, тем самым эмбрион приобретает устойчивость к действию транспозонов. Данная модель, названная «пинг-понг» (Brennecke et al., 2007), участвует в образовании вторичных piPHK. Механизм образование пула первичных piPHK неизвестен, но, видимо, в нем принимает участие белок Piwi. Аннотированные последовательности коротких РНК, ассоциированные с белком Piwi, позволили установить геномные локусы. Одним из таких локусов является flamenco (Robert et al., 2001; Brennecke et al., 2007).
Прицентромерный кластер, где локализован локус flamenco и в котором картированы piPHK, выделенные из соматических клеток яичников, отличается однонаправленностью транскрипции 85% дефектных МГЭ, локализованных на антисмысловой цепи, причем большинство из них принадлежат к группе ретротранспозонов gypsy (Malone et al., 2009). В связи с этим появилась гипотеза о существовании единой молекулы-предшественника (Рис. 5), транскрибируемой в локусе flamenco и участвующей в подавлении транскрипции МГЭ путем РНК-интерференции (Brennecke et al., 2007). Мутации в этом локусе, полученные с помощью инсерции P-элемента, ведут к дерепресии контроля транспозиции. Похоже, что это связано с нарушением единого цельного траскрипта, из которого получаются первичные молекулы piPHK. Такие piPHK, ассоциированные с белком Piwi и гомологичные локусу flamenco, участвуют в процессе подавления МГЭ в соматических фолликулярных клетках полового пути, в отличие от другого хорошо

Рекомендуемые диссертации данного раздела

Время генерации: 0.222, запросов: 966