Диссертация на тему "Гены-мишени фармакологического воздействия бромпроизводного 2-аминоадамантана-ладастена в клетках головного мозга крыс", скачать бесплатно автореферат по специальности 03.00.03

Оглавление

Список сокращений и условных обозначений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Общая характеристика производных адамангана и их использование в практике

1.2 Физикохимические и фармакологические свойства ладастепа

1.2.1 Физикохимические свойства и особенности фармакокинетики

1.2.2 Фармакологические свойства ладастена

1.2.2.1 Нейропсихотронные свойства

1.2.2.2 Иммунотропные свойства

1.2.2.3 Актопротекторные свойства и метаболические эффекты препарата

1.3 Новые подходы к исследованию молекулярных механизмов действия фармакологических средств
1.3.1 Методы изучения генной экспрессии
1.3.1.1 ДНКгибридизация на микрочипах
1.3.1.2 ОТПЦР в режиме реального времени
1.3.2 Методы изучения экспрессии белков
1.3.2.1 Двумерный электрофорез
1.3.2.2 Массспсктрометрия
Глава 2. Объекты и методы исследований
2.1 Препарат
2.2 Объекты исследований
2.3 Выделение суммарной РНК из головного мозга крыс
2.4 Гибридизация на макрочипах
2.5 Анализ изображений радиоавтографов
2.6 Построение кДНТС с помощью обратнотранскрипционной реакции
2.7 Количественная ОТПЦР в режиме реального времени
2.8 Двумерный электрофорез белков
2.9 Анализ изображений двумерных электрофореграмм
2. Гидролиз белков и МА1Л1ТОГ массспсктрометрия
Глава 3. Результаты исследований
3.1 Анализ дифференциальной экспрессии генов в клетках головного мозга крыс при однократном воздействии ладастена на чипе, содержащем 8 фрагментов генов
3.2 Анализ дифференциальной экспрессии генов в клетках головного мозга крыс при однократном воздействии ладастена на чипе, содержащем фрагментов генов
3.3 Подтверждение дифференциальной экспрессии генов, идентифицированных в результате гибридизации на кДНК макрочипах, методом ОТПЦР в режиме реального времени
3.4 Поиск и идентификация белковмишеней ладастена
Глава 4. Обсуждение результатов
4.1 Поиск и идентификация генов мишеней ладастена
4.1.1 Гены ферментов различных метаболических путей
4.1.2 Гены регуляторных нейропептидов и их рецепторов
4.1.3 Гены мембранных транспортеров
4.1.4 Гены белков синаптических функций
4.1.5 Гены белков цитоскелета и межклеточных взаимодействий
4.1.6 Гены, кодирующие компоненты сигнальных путей
4.1.7 Г ены опухолевых супрессоров
4.2 Поиск и идентификация белков мишеней ладастена
4.2.1 Белкиферменты гл и колитического метаболизма
4.2.2 Стрессовые белки и белки шапероны
4.2.3 Защитные белки
4.2.4 Синаптические белки
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Впервые идентифицированы белков головного мозга крыс, значительно отличающихся по уровню их экспрессии в контрольных и опытных вариантах, в том числе ферменты гликолитического метаболизма i А и 3 белкишапероны i 4, xi 1, i 5, viii i транспортные, везикулярные белки и белки цитоскелета i, ixi, i i i , i i i 2, i . В качестве мишеней фармакологического действия ладастена могут быть рассмотрены белкиферменты гликолитического метаболизма, i i i 2, i . Увеличение экспрессии везикулярных, транспортных, цитоскелетиых белков и некоторых других, вероятно, связано с механизмами нейропластичности, реализующимися в ответ на лекарственное воздействие. Практическая значимость. Полученные нами данные о спектре генов и белковмишеней вносят вклад в доклинические аспекты разработки лекарств, углубляя и дополняя представления о механизмах фармакологической активности ладастена, что открывает новые перспективы его клинического применения и с другой стороны, демонстрируют возможности комплексного использования новых методов и подходов для анализа механизмов действия лекарственных средств. Апробация работы. Материалы диссертации были доложены на XVI зимней молодежной научной школе Перспективные направления физикохимической биологии и биотехнологии Москва, г. Немецкого Нейробиологического Общества СеШлдоп, г. Региональной конференции ЕСЫР Москва, г. V съезде Всероссийского общества медицинских генетиков Уфа, на ом конгрессе ЕСОТ Апшегбат, на 4ой Международной конференции Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам Москва, . Конкурсная поддержка работы. Исследования были поддержаны грантами Программы фундаментальных исследований Президиума РАИ Молекулярная и клеточная биология 21П286, Государственной поддержки ведущих научных школ РФ НШ 4, РФФИ Агидель 4. Публикации. Основные результаты диссертации изложены в печатных работах. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 7 страницах, содержит 8 таблиц и рисунков и состоит из введения, обзора литературы глава 1, описания объектов и методов исследования глава 2, результатов исследования глава 3 и их обсуждения глава 4, выводов и списка литературы, включающего 6 источников. Глава 1. Это связано с уникальными свойствами самой молекулы адамантана каркасного циклического углеводорода Лосев и соавт. i, Багрий, . Соприкасаясь с живой клеткой, адамантан изменяет физическое состояние клеточных мембран, увеличивая их проницаемость, что побудило исследователей не только изучить фармакологические свойства адамантанов, но и использовать адамантаиовые радикалы для улучшения проникновения лекарственных препаратов внутрь клетки и повышения их фармакологической активности Лосев и соавт. Багрий, . Наиболее широкое применение в клинической практике из производных адамантана получили мидантан и адапромин, которые используются в неврологической практике для лечения болезни Паркинсона и паркинсонического синдрома , . Паркинсона ЯаЬсу е1 а Альцгеймера НепбпсИ, Шмарьян и соавт. Галегов и соавт. БоНп е1 а1. Арцимович и соавт. Атрошенко, . Противовирусными свойствами обладают так же мидантан и адапромин иммуностимулирующее средство кемантан Арцимович и соавт. В последние годы возрастает интерес к фармакологическим средствам, повышающим психическую и физическую работоспособность, в том числе при деятельности организма в осложненных условиях и при действии различных экстремальных факторов. Эффективные активирующие средства, обладающие данными свойствами, выявлены и среди производных адамантана Морозов, . К их числу относится ладастен 2адамантилЫпарабромфениламин, синтезированный и фармакологически изученный в ГУ НИИ фармакологии им. В. В. Закусова РАМН. Физикохимические свойства препарата и спектр его фармакологической активности изучены достаточно подробно. В литературе описаны его психостимулирующие, анксиолитические, адаптогенные, иммуностимулирующие, мембранотропные и ангирадикальные свойства. Ладастен М2адамантилМпарабромфсниламин, бромантан представляет собой белый кристаллический порошок, нерастворимый в воде, растворимый в ном спирте и хлороформе, слабо растворимый в эфире.

Название работы	Автор	Дата защиты
Перестройки в геноме Mycoplasma gallisepticum	Феоктистова, Евгения Сергеевна	2007
Термодинамические и гибридизационные свойства модифицированных олигонуклеотидов	Колганова, Наталья Анатольевна	2003
Малая ядрышковая РНК U87 и ее ген-хозяин	Макарова, Юлия Алексеевна	2006

Электронная библиотека диссертаций

Гены-мишени фармакологического воздействия бромпроизводного 2-аминоадамантана-ладастена в клетках головного мозга крыс