Биофармацевтическая характеристика цифетрелина как потенциального противоопухолевого препарата

• Автор: Михаевич, Екатерина Игоревна
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 135 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Соматостатин и его производные в лечении опухолей
1.1.1. Природный соматостатин
1Л .2. Синтетические аналоги соматостатина
1.1.3. Противоопухолевая активность соматостатина и
его синтетических аналогов
1.1.3.1. Рак молочной железы
1.1.3.2.Рак легкого
1.1.3.3.Рак прямой кишки
1.1.3.4.Рак поджелудочной железы
1.1.3.5. Рак предстательной железы
1.1.3.6. Эндокринные опухоли
1.2. Механизм противоопухолевого действия аналогов соматостатина
1.2.1. Рецепторы соматостатина
1.2.2. Прямое противоопухолевое действие аналогов соматостатина
1.2.2.1. Ингибирование клеточного цикла под действием соматостатина
1.2.2.2. Индукция апоптоза аналогами соматостатина
1.2.3. Опосредованное противоопухолевое действие аналогов соматостатина
1.2.3.1. Подавление секреции факторов роста и гормонов
1.2.3.2. Подавление ангиогенеза
1.2.3.3. Влияние на иммунную систему
1.3. Цифетрелин - представитель группы синтетических аналогов гипоталамического гормона соматостатина
1.3.1. Синтез субстанции цифетрелина
1.3.2. Физико-химические свойства субстанции цифетрелина
1.3.3. Определение прочих показателей качества субстанции цифетрелина
1.3.4. Гормональная активность субстанции цифетрелина
1.3.5. Противоопухолевая активность субстанции цифетрелина
1.4. Лекарственные формы пептидных препаратов
1.4.1. Применение пептидных и белковых лекарственных препаратов в терапии различных заболеваний
1.4.2. Физико-химические свойства пептидов и белков
1.4.3. Пути введения лекарственных препаратов
белково-пептидной структуры
1.4.4. Лекарственные формы препаратов белково-пептидной структуры и вспомогательные вещества, используемые в их составе
1.4.5. Подходы к созданию лекарственных форм препаратов белково-пептидной структуры для перорального применения
1.4.6. Актуальность создания таблетированной лекарственной
формы цифетрелина
Глава 2. Материалы и методы
2.1. Материалы
2.1.1. Использованные препараты
2.1.2. Вспомогательные вещества
2.1.3. Приборы и аппаратура
2.1.4. Животные и экспериментальные модели опухолевого роста
2.2. Методы
2.2.1. Методы оценки противоопухолевой активности in vivo
2.2.2. Методы оценки противоопухолевой активности
цифетрелина in vitro
2.2.2.1. Определение скорости роста культуры клеток MCF
2.22.2. Определение уровня апоптоза в культуре клеток MCF
2.2.2.3. Определение активности транскрипционного
фактора NF-kB
2.2.2.4. Получение клеточных экстрактов культуры MCF
2.2.2.5. Получение ядерной фракции культуры MCF
2.2.2.6. Разделение белков с помощью вертикального электрофореза в полиакриламидном геле
2.2.2.7. Иммуноблоттинг,
2.2.2.8. Обнаружение белков
2.2.2.9. Инактивация цифетрелина кислотным гидролизом
2.2.3. Методики получения и оценки качества таблеток цифетрелина
2.2.3.1. Получение гранулята цифетрелина
2.2.3.2. Методы оценки технологических характеристик гранулята
2.2.3.3. Получение таблеток цифетрелина
2.2.3.4. Оценка качества таблеток цифетрелина
Глава 3. Противоопухолевая активность цифетрелина
3.1. Противоопухолевая активность цифетрелина in vitro
3.1.1. Торможение роста культуры клеток MCF
под действием цифетрелина
3.1.2. Индукция апоптоза в культуре клеток MCF
под действием цифетрелина
3.2. Противоопухолевая активность цифетрелина in vivo
3.2.1. Противоопухолевая активность цифетрелина при пероральном введении
3.2.2. Противоопухолевое действие цифетрелина при
подкожном введении
3.2.3. Противоопухолевое действие цифетрелина при
внутрибрюшинном введении
Глава 4. Исследование возможности создания лекарственной формы
цифетрелина для перорального применения
4.1. Обоснование выбора лекарственной формы и дозы цифетрелина

Содержание тяжелых металлов в проанализированных образцах не превышает 0,001%, что является максимально допустимым для большинства фармацевтических субстанций. Потеря в массе при высушивании образцов цифетрелина практически отсутствует.
Количественное определение цифетрелина в субстанции авторы предлагают проводить методом ВЭЖХ [9J.
1.3.4. Гормональная активность субстанции цифетрелина
Цифетрелин подавляет секрецию СТГ, что согласуется с его принадлежностью группе аналогов соматостатина и подтверждается экспериментальными данными (табл. 3): через 2 часа после его введения в дозе 2,5 мг/кг содержание гормона роста в сыворотке крови у крыс уменьшалось в 3,8 раза по сравнению с контролем. Содержание пролактина достоверно снижалось после применения цифетрелина в диапазоне доз 0,62 — 2,5 мг/животное до 8,6 мкЕд/мл и инсулина — до 3,4 мкЕд/мл. В исследованиях in vitro цифетрелин не влиял на секрецию СТГ в культуре аденогипофизарных клеток и на секрецию инсулина в культуре клеток поджелудочной железы | 6, 9, 10].
Таблица
Содержание СТГ, пролактина и инсулина в сыворотке крови крыс после внутрибрюшинного введения цифетрелина
Г руппы Дозы мг/животное Инсулин (мкЕД/мл) М±м СТГ (нг/мл) М+м Пролактин (мкЕД/м) М+м
Контроль 0 16,8±1,6 10,4+2,3 22,5+5
Цифетрелин 0,1 16,6±1,9 9,0+2,3 10,5+5
Цифетрелин 0,62 11,8±1,0 9,7+2,4 8,6+4,0*
Цифетрелин 1,25 7,0+1,6* 2,7+0,9* 10,6+1
Цифетрелин 2,5 3,4 ± 0,2 * 3,4+1,2* 8,8+2,7*
Примечание: * р<0