Биотехнологический способ получения флавинадениндинуклеотида

• Автор: Хромова, Мария Геннадьевна
• Шифр специальности: 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 133 с. : ил.

Содержание:
Введение
Обзор литературы
Глава 1. Характеристика флавинадениндинуклеотида
1.1. Общие сведения о ФАД
1.2. Физико-химические и фармакологические
свойства ФАД
1.3. Лечебное действие
1.4. Синтез флавинов микроорганизмами
Глава 2. Биосинтез флавинов микроорганизмами
2.1. Влияние состава питательной среды на рост продуцентов
2.2. Влияние источников углерода
Глава 3. Пути синтеза ФАД
3.1. Химический синтез ФАД
3.2. Ферментативный синтез ФАД
3.3. Биосинтез ФАД
Заключение по обзору литературы
Экспериментальная часть
Глава 4. Материалы и методы исследования
4.1. Объект и методы исследования
4.2. Материалы, применяемые при проведении исследования

4.3. Методы исследования
4.3.1. Определение количества бактерий нефелометрическим методом
4.3.2. Определение значений pH
4.3.3. Биосинтез ФАД
4. 3.4.Методы определения и выделения ФАД
Глава 5. Обсуждение результатов
5.1. Поиск активных бактериальных штаммов-продуцентов ФАД
5.2. Изучение возможности получения мутантного
штамма В. аштопіа§епе8 АТСС 6871
5.3. Влияние источников углерода на рост
мутантного штамма №
5.4. Влияние концентрации пирувата Иа
на накопление биомассы и ФАД- образование
5.5. Зависимость ФАД-синтезирующей активности мутантного штамма 65 от времени выращивания биомасы
5.6.Влияние возраста и дозы посевной культуры
5.7.Получение ацетонового порошка из биомассы
клеток мутантного штамма
5.8.Сохранность ацетонового порошка
5.9.Влияние концентрации предшественника
на образование ФАД
5.10.Влияние концентрации АТФ -И а
на образование ФАД
5.11 .Влияние концентрации сухих клеток
на биосинтез ФАД
5.12. Влияние концентрации буферов
на ФАД- образование
5.13.Влияние величины pH- буфера
на биосинтез ФАД
5.14. Влияние объема буфера на биосинтез ФАД
5.15. Влияние продолжительности реакции на
биосинтез ФАД
5.16. Влияние температуры реакционной среды
на биосинтез ФАД
5.17. Выделение ФАД из реакционной среды
Глава 6. Рекомендации по разработке биотехнологического способа
получения ФАД с помощью бревибактерий
6.1. Описание технологического процесса
получения ФАД
6.2. Физико-химические свойства
полученного препарата ФАД

с выходом 40 -50 %
Фосфоамидный метод образования пирофосфатной связи эффективнее некоторых других методов, так как конденсация двух нуклеотидных молекул проводится без предварительной защиты гидроксильных групп. Ценность метода заключается в возможности использования водной среды, что важно в тех случаях, когда присутствие уже небольшого количества воды увеличивает растворимость реагирующих компонентов.
ФАД синтезирован анионообменным методом с выходом 70 % в

результате взаимодействия Р - дифенил - Р - ( аденозин - 5’) пирофосфата с анионом - этерифицированным РМФ.
В НПО “Витамины” (1973г) был разработан и запатентован способ получения флавината конденсацией три-н-октиламмониевой соли рибофлавин-5’-монофосфата и 4 - морфолин - N. N ’ - дициклогексил карбоксамидиниевой соли аденозин-5’-фосфоморфолида с последующей обработкой хлорнокислым натрием [68].
Анализ технологической схемы получения флавината путем химического синтеза имеет ряд существенных недостатков :
1. Многостадийное получение полупродуктов и продуктов реакции на каждой стадии процесса требует сложного аппаратурного оформления.
2. Длительность процесса
3. Присутствие большого количества жидких и газообразных отходов, включая органические растворители (диметилформамид, пиридин,серный