Морфологическая гетерогенность колоний Alcaligenes eutrophus и Photobacterium leiognathi : По данным электронной микроскопии

• Автор: Могильная, Ольга Алексеевна
• Шифр специальности: 03.00.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1998
• Место защиты: Красноярск
• Количество страниц: 128 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Г лава 1. Обзор литературы
1.1. Морфология колоний
1.2. Внутренняя организация бактериальных колоний
1.3. О бактериальном нуклеоиде
Глава 2. Материалы и методы
2.1 Объекты исследования
2.2. Подготовка колоний для ультраструктурных исследований
2.3. Статистическая обработка данных
2.4. Подготовка ДНК А.еШхорйш Zl и Р.ІепаЙіі 208 для электронномикроскопических исследований
Глава 3. Морфология колоний и ультраструктура клеток изогенных вариантов светящихся бактерий
3.1 Морфология колоний светящихся бактерий
3.2 Морфологические типы клеток в колониях Р.іепаїїіі
3.3 Изменение структуры популяции в процессе развития
3.4 Структура популяции секторных колоний
3.5 Расположение клеток в колониях РЛепаЙп шт
3.6 Межбактериальные связи и внеклеточный матрикс
3.7 Процесс дифференцировки колоний
Глава 4.Морфология колоний и ультраструктура водородокисляющих бактерий в гетеро- и автотрофных условиях роста на твердой среде.
4.1. Морфология колоний
4.2. Я-вариант в гетеротрофных условиях
4.3. Я - вариант в автотрофных условиях
4.4. Б-вариант в гетеротрофных условиях
4.5. 8-вариант в автотрофных условиях

4.6. Ультраструктура водородокисляющих бактерий жидкой
периодической культуры
Глава 5. Состояние генома водородокисляющих бактерий в различных условиях роста.
5.1. Упаковка ДНК в клетках Л-вариаита А.еіДгорІїш 71, растущего в жидкой культуре и в виде колоний на твердой среде
5.2. Иммуноцитохимические исследования ДНК водородокисляющих
и светящихся бактерий
Главаб. Заключение
Выводы
Литература

ВВЕДЕНИЕ
Вопросы гетерогенности бактериальных популяций довольно широко освещаются в литературе. Описание морфологической гетерогенности популяций чаще всего касается жидкой бактериальной культуры (Иванов, Угодчиков, 1984: Печуркин и др.1990; Милько, Егоров, 1991), лишь небольшая часть исследований посвящена изучению гетерогенности, возникающей в процессе роста и развития бактериальных колоний (Высоцкий и др., 1984; Бакулина, 1985; Бондаренко и др., 1987; Павлова и др., 1990; Mendelson, Salhi, 1996). Интерес к этой проблеме объясняется возможностью параллельно с изучением гетерогенности популяции исследовать фундаментальные аспекты роста и морфогенеза микроорганизмов (Shapiro, 1995). Микробную колонию следует рассматривать с разных точек зрения. Во-первых, это исходный посевной материал для микробиологических, генетических, биотехнологических целей. Во-вторых, колония это простейшее микробное сообщество, обладающее способностью к самоорганизации Исследование архитектоники колоний (совокупность данных об ультраструктуре клеток, их взаимодействии, ориентации и распределении в определенных областях колонии) предоставляет уникальную возможность комплексного изучения фундаментальных аспектов морфогенеза и роста бактериальных популяций. Наконец, колония является простейшим примером реализации генетической программы построения сообщества из одной клетки на твердой поверхности.
В настоящее время наблюдается явный разрыв между данными о гетерогенности бактериальной популяции и интерпретацией экспериментальных результатов по изучению структуры колонии. Так, цитоморфологическое разнообразие популяций признается закономерным и определяющим высокую выживаемость вида в меняющихся условиях среды обитания (Бакулина, 1985; Высоцкий и др.,1985; Новик, Высоцкий, 1996; Shapiro, 1995). Однако вопросы структурной организации и формирования

В некоторых случаях после пропитки образцов перед заключением в смолу удаляли слой питательной среды, вырезанный первоначально вместе с колонией. Иногда слой бывает толстым и мешает нормальной пропитке и, как следствие, хорошей полимеризации блоков, да и объект получается слишком крупным. Кроме того, вероятно, вещества, образующиеся в ходе жизнедеятельности колонии, препятствуют хорошей пропитке и полимеризации блока. В этом случае питательную среду удаляли полностью. В данном случае колонии А.еиЦорЬш Z хорошо пропитывались и блоки хорошо полимеризовались, тогда как образцы колоний РЛепаЛ! 54 требовали удаления питательной среды. Участки колоний, с которых делали ультратонкие срезы, показаны на рис.1. В ходе работы определился оптимальный подход к исследованию целых колоний микроорганизмов, что позволило получить необходимую и достаточную информацию о строении как отдельных клеток, так и колонии в целом. Просмотр в электронном микроскопе ультратонких
Рис.1. Плоскость сечения бактериальной колонии. Обозначены участки, откуда делались ультратонкие срезы: а- срез через середину колонии, б - срез на периферии колонии, в, г - срезы на интересующие участки.