Сверхспиральная ДНК человека и животных при экстремальных воздействиях

Сверхспиральная ДНК человека и животных при экстремальных воздействиях

Автор: Ващенко, Владимир Иванович

Шифр специальности: 14.00.46

Научная степень: Докторская

Год защиты: 2000

Место защиты: Санкт-Петербург

Количество страниц: 243 с. ил.

Артикул: 292853

Автор: Ващенко, Владимир Иванович

Стоимость: 250 руб.

Сверхспиральная ДНК человека и животных при экстремальных воздействиях  Сверхспиральная ДНК человека и животных при экстремальных воздействиях 

Глава 1. Методы исследования субпопуляций лимфоидных клеток
. Изучение фагоцитоза и метаболической стимуляции гранулоцитов крови и костного мозга. Глава 2. Современные методы изучения сверхспиральной ДНК эукариот
наложением зажима на контралатеральный главный бронх. Во избежание значительной примеси крови в смывах животных предварительно обескровливали путем перерезки брюшной аорты. При этом проводился визуальный осмотр органов брюшной полости и грудной клетки. Бронхоальвеолярные макрофаги получали путем шестикратного промывания бронхов 0,2 раствором версена НИИ вирусных препаратов, Москва при комнатной температуре РаадПагс Е. Я., . При этом клетки пребывали в растворе версена не более минут. Затем их осаждали в центрифужных пробирках при обмин на лабораторной центрифуге ОПН3 в течение 8 минут, ресуспендировали в инкубационной среде 9 и хранили при пониженной температуре 4С во избежание агрегации до момента посева на чашки. Подсчет клеток из бронхиальных смывов проводили в камере Горяева на микроскопе МБИ3.


После однократного центрифугирования при 0д в течение минут клетки ресуспендировали в среде 9 без гепарина в объеме мл, фильтровали через слоев медицинской марли
и подсчитывали содержание миелокариоцитов в камере Горяева. Далее клетки костного мозга разбавляли до 1,,0x6 кл. Выделение субпопуляций лейкоцитов человека. Лимфоциты. Получение лимфоцитов из периферической или венозной крови осуществляли по методу Хейфеца и Абалакина Хейфец X. Б. . Абалакин А. В., в градиенте фиколверографина либо в стандартномтном растворе фиколлпака i, Швеция. Гранулоциты, лимфоциты, моноциты. Выделение этих субпопуляций клеток из периферической или венозной крови человека производили по модифицированному методу Бикало i . Для этого использовали многоступенчатый градиент фиколлверографина, который готовили из трех заранее подготовленных растворов А, Б, В . Раствор А состоял из мл раствора верографина, раствор Б из мл 9 фиколла, раствор В из мл ,6 фиколла. Для получения раствора Г мл Б смешивали с мл раствора А. Раствор Д получали смешивая мл раствора В и мл раствора А. Затем в стандартную центрифужную пробирку объемом мл осторожно наливали 2 мл полученного раствора Д а сверху наслаивали 2,5 мл раствора Г. На сформированный таким образом двухступенчатый градиент осторожно наслаивается 5 мл крови разбавленной в два раза забуференным 0,9 раствором хлорида натрия. Центрифугирование производили на центрифуге Т Чехия в горизонтальном роторе в течение минут при 0 и С. Из полученных после осаждения семи слоев использовали фракцию 5 и фракцию 6 после стандартной трехкратной отмывки раствором Хенкса или средой 9. Цитологические методы оценки состояния клеток. Оценка жизнеспособности клеток при помощи витальных красителей.

Рекомендуемые диссертации данного раздела

28.06.2016

+ 100 бесплатных диссертаций

Дорогие друзья, в раздел "Бесплатные диссертации" добавлено 100 новых диссертаций. Желаем новых научных ...

15.02.2015

Добавлено 41611 диссертаций РГБ

В каталог сайта http://new-disser.ru добавлено новые диссертации РГБ 2013-2014 года. Желаем новых научных ...


Все новости

Время генерации: 0.191, запросов: 198