Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Ващенко, Владимир Иванович
14.00.46, 03.00.01
Докторская
2000
Санкт-Петербург
243 с. : ил.
Стоимость:
499 руб.
Глава 1. Методы исследования субпопуляций лимфоидных клеток
. Изучение фагоцитоза и метаболической стимуляции гранулоцитов крови и костного мозга. Глава 2. Современные методы изучения сверхспиральной ДНК эукариот
наложением зажима на контралатеральный главный бронх. Во избежание значительной примеси крови в смывах животных предварительно обескровливали путем перерезки брюшной аорты. При этом проводился визуальный осмотр органов брюшной полости и грудной клетки. Бронхоальвеолярные макрофаги получали путем шестикратного промывания бронхов 0,2 раствором версена НИИ вирусных препаратов, Москва при комнатной температуре РаадПагс Е. Я., . При этом клетки пребывали в растворе версена не более минут. Затем их осаждали в центрифужных пробирках при обмин на лабораторной центрифуге ОПН3 в течение 8 минут, ресуспендировали в инкубационной среде 9 и хранили при пониженной температуре 4С во избежание агрегации до момента посева на чашки. Подсчет клеток из бронхиальных смывов проводили в камере Горяева на микроскопе МБИ3.
После однократного центрифугирования при 0д в течение минут клетки ресуспендировали в среде 9 без гепарина в объеме мл, фильтровали через слоев медицинской марли
и подсчитывали содержание миелокариоцитов в камере Горяева. Далее клетки костного мозга разбавляли до 1,,0x6 кл. Выделение субпопуляций лейкоцитов человека. Лимфоциты. Получение лимфоцитов из периферической или венозной крови осуществляли по методу Хейфеца и Абалакина Хейфец X. Б. . Абалакин А. В., в градиенте фиколверографина либо в стандартномтном растворе фиколлпака i, Швеция. Гранулоциты, лимфоциты, моноциты. Выделение этих субпопуляций клеток из периферической или венозной крови человека производили по модифицированному методу Бикало i . Для этого использовали многоступенчатый градиент фиколлверографина, который готовили из трех заранее подготовленных растворов А, Б, В . Раствор А состоял из мл раствора верографина, раствор Б из мл 9 фиколла, раствор В из мл ,6 фиколла. Для получения раствора Г мл Б смешивали с мл раствора А. Раствор Д получали смешивая мл раствора В и мл раствора А. Затем в стандартную центрифужную пробирку объемом мл осторожно наливали 2 мл полученного раствора Д а сверху наслаивали 2,5 мл раствора Г. На сформированный таким образом двухступенчатый градиент осторожно наслаивается 5 мл крови разбавленной в два раза забуференным 0,9 раствором хлорида натрия. Центрифугирование производили на центрифуге Т Чехия в горизонтальном роторе в течение минут при 0 и С. Из полученных после осаждения семи слоев использовали фракцию 5 и фракцию 6 после стандартной трехкратной отмывки раствором Хенкса или средой 9. Цитологические методы оценки состояния клеток. Оценка жизнеспособности клеток при помощи витальных красителей.
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Клинико-лабораторная оценка состояния гиперандрогении у беременных женщин | Южакова, Наталья Юрьевна | 2006 |
Роль рецепторов эстрогенов, протестерона, андрогенов, онкобелка HER-2, антигена Ki-67 в прогнозе рака молочной железы | Аникеева, Наталья Валерьевна | 2006 |
Длительное культивирование Trichomonas vaginalis как медико-биологическая основа экспериментального изучения трихомониаза | Пляченко, Дмитрий Анатольевич | 2007 |