Клинические и экспериментальные аспекты изучения молекулярно-биологических маркеров при злокачественных новообразованиях

• Автор: Степанова, Евгения Владиславовна
• Шифр специальности: 14.00.14
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 262 с. : 33 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
Список сокращений.
Введение
Обзор литературы
Глава 1. Молекулярнобиологические маркеры при
злокачественных новообразованиях
Результаты собственных исследований и их обсуждение
Глава 2. Материалы и методы исследования
Глава 3. Методологические аспекты изучения
молекулярнобиологических маркеров при
злокачественных новообразованиях.
Глава 4. Молекулярнобиологические маркеры как
факторы прогноза течения злокачественных
опухолей.
Глава 5. Молекулярнобиологические маркеры как
факторы предсказания чувствительности
опухоли к химиотерапии.
Глава 6. Молекулярный профиль некоторых редких
злокачественных опухолей Акцент на молекулярных мишенях направленной
химиотерапии
Заключение
Выводы
Список литературы


Большинство методов, включая индекс клеток, меченных Н -тимидином, основано на мечении клеток, находящихся только в S фазе клеточного цикла. Антитела к Ki- антигену, который присутствует в клетках поздней Gi, S, G2 и М фазах, окрашивают все пролиферирующие клетки, но не клетки в состоянии покоя (G0 фаза и ранняя Gi). Другим маркером пролиферирующих клеток, который может быть определен иммуногистохимически, является PCNA. На сегодняшний день большой проблемой в исследованиях по уровню пролиферативной активности (ПА) является выбор «разграничительной» точки - границы, разделяющей опухоли на группы с высокой и низкой пролиферативной активностью. В различных работах за такое значение выбирается индекс Ki- равный -% (в некоторых исследованиях даже %). Прогностическое значение ПА для различных типов опухолей. Оценка индекса ПА может помочь определить агрессивность и злокачественность течения опухолевого процесса [Costa А. При анализе прогностической значимости индекса пролиферативной активности показано, что высокий уровень ПА (по индексу Ki-) предсказывает ухудшение безрецидивной и общей выживаемости больных раком молочной железы, яичников, толстой кишки и других типов опухоли [Jacquermicr. Роль ПА для предсказания эффективности химиотерапии также требует дальнейшего изучения. Bonetti А. Chevillard S. MacGrogan G. Эти данные подтверждают результаты о связи пролиферации и химиочувствительности, полученные in vitro. Однако другие авторы сообщают, что высокий уровень Ki- статистически значимо коррелировал с худшим ответом на неоадъювантную терапию больных РМЖ [Gregory RK. Можно предположить, что опухоль с высокой пролиферативной активностью способна более активно «создавать» резистентные клоны (за счет более частых мутаций, возникающих при делении клеток), которые быстро восстанавливают утраченный пул химиочувствительных клеток. Предполагается, что опухоли высокой пролиферативной активности быстро отвечают на химиотерапевтическое воздействие, однако эффект длится не долго. Увеличение популяции опухолевых клеток происходит не только за счет увеличения фракции делящихся клеток, но и за счет блокирования механизмов нормальной гибели клеток (апоптоза). Исследования, проведенные на экспериментальных моделях опухолей in vivo и in vitro, а также описательный анализ образцов опухолей различных стадий, показывают, что практически во все типы опухолей резистентны к запуску апоптоза. Активация апоптоза (выражающаяся в активации эффекторных каспаз 3, 6, 7) в клетках происходит по двум основным механизмам: при активации мембранных рецепторов смерти - внешний путь, при вовлечении митохондрий - внутренний путь. Внешний путь активации апоптоза: CD рецептор-лигандная система. TNFR), включающих CD (Fas/APO-l) и TNFR-1, ведет к инициации гибели клетки через активацию каспаз [Enari ct al. Los et al. Связывание рецепторов смерти с лигандом приводит к присоединению домена смерти, который служит для связывания и активации прокаспазы 8, запускающей эффскторный каспазный каскад (рис. CD (Fas/APO-l) рецептор экспрессируется на активированных лимфоцитах и в некоторых типах клеток печени, сердце, легких. Взаимодействие рецептора с лигандом или антителами-агонистами индуцируют апоптоз в некоторых клеточных типах. Экспрессию CD лиганда (CDL) находят на активированных лимфоцитах, NK клетках, иммуно-привилегированных тканях и на некоторых опухолях. CD рсцептор-лигандная система участвует в поддержании гомеостаза в различных типах ткани, в том числе печени, иммунной системе. Эксперименты показали, что некоторые противоопухолевые цитотоксические препараты действуют, запуская апоптоз в клетках-мишенях [Dive С, ]. Отсутствие экспрессии CD рецептора в опухолевых клетках может приводить к их ускользанию от иммунологического контроля и блокированию запуска апоптоза, вызванного химиотерапией [Micheau О, ]. Однако, некоторые противоопухолевые препараты (цисплатин, доксорубицин, камптомицин и др. Fas-рецептора и лиганда [Solary Е, ]. Малые дозы этих цитотоксических препаратов увеличивают экспрессию Fas, таким образом, способствуя их элиминации иммунной системой.