Особенности дендритных клеток, полученных при различных условиях стимуляции моноцитов новорожденных детей in vitro

• Автор: Цатуров, Максим Эдуардович
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 149 с. : ил.

Список принятых сокращений
ГКГ - главный комплекс гистосовместимости
ГМ-КСФ - гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор
ДЕКС - дексаметазон ДК - дендритные клетки ИЛ - интерлейкин ИФН - интерферон КЛ - клетки Лангерганса ЛПС - липополисахарид
М-КСФ - макрофагальный колониестимулирующий фактор пДК - плазмацитоидные дендритные клетки ТФР - трансформирующий фактор роста ФТ - фактор транскрипции
Оглавление
Введение
1. Обзор литературы
2. Материалы и методы исследований
3. Результаты исследований
3.1. Методика получения ДК in vitro. Культивирование клеток при
различных условиях стимуляции созревания
3. 2. 1. Использование различных способов стимуляции созревания ДК в краткосрочных культурах
3.2.2. Свойства fastflK, полученных с использованием ИЛ-7 и
дексаметазона
3.2.3. Использование растворимой формы рекомбинантного CD154 и липополисахарида Salmonella typhi в качестве активаторов дозревания fastflK
3.2.4. Продукция различных цитокинов дендритными клетками,
культивировавшимися в течение 3 суток при различных условиях
стимуляции созревания
3.3. Функциональные свойства модулированных дендритных клеток взрослых и новорожденных в различных моделях взаимодействия с Т-лимфоцитами
3.3.1. Одновременное культивирование обычных fas^K, и fastÄK модулированных в ходе созревания дексаметазоном в смешанной лейкоцитарной реакции
3.3.2. Фенотипическая характеристика ДК детей и взрослых, полученных при традиционных условиях
культивирования
3.3.3. Модель взаимодействия дендритных клеток с модулированными свойствами и дендритных клеток с обычными свойствами,
культивировавшимися в течение 8 суток
3.3.4. Последовательная стимуляция аллогенных лимфоцитов
модулированными и обычными дендритными клетками, культивировавшимися в течение 8 суток
4. Обсуждение полученных результатов
Выводы
Список литературы

сопровождается изменением адгезивных свойств (изменение в организации цитоскелета и экспрессии интегринов), и началом экспрессии рецепторов хемокинов [64].
1.3.4. Презентация антигенов в составе ГКГ I класса
Большинство пептидов, входящих в комплекс с ГКГ I продуцируется протеасомами клетки в результате деградации убиквитинилированных белков. Пептиды транспортируются в эндоплазматический ретикулум специализированными транспортными белками ТАР и загружаются в состав молекул ГКГ под контролем системы шаперонов ретикулума (тапазин, калнексин, калретикулин). Полностью сформированные молекулы ГКГ I перемещаются в аппарат Гольджи, а затем, встроенные в мембрану комплекса Гольджи, выходят на поверхность клетки. Как и другие клетки, ДК тоже презентируют собственные и вирусные белки [98]. Дендритные клетки конститутивно экспрессируют низкие уровни протеасом. Эти протеасомы (LMP2, LMP7 и РА28) индуцируются в течение созревания ДК и становятся основным типом протеасом в зрелых дендритных клетках. Выбор репертуара протеасом может регулироваться презентацией некоторых эпитопов. Белки, которые должны быть подвержены деградации убиквитинилируются. Интересно, что ДК экспрессируют особый ген ди-убиквитина, кодирующие последовательности которого расположены рядом с локусом ГКГ [118].
Экзогенные антигены интернализуются различными путями, однако, могут быть также презентированы на поверхности мембраны клетки в составе молекул ГКГ I (перекрестная презентация). Макропиноцитоз дает возможность дендритным клеткам рецептор-независимо перекрестно презентировать растворимые антигены. Физиологически, фагоцитоз, вероятно, играет основную роль в получении и перекрестной презентации антигена. Интересно, что дендритные клетки и макрофаги эффективно фагоцитируют клетки Salmonella, но только ДК способны презентировать