Симбиотическая ассоциация Wolbachia-Drosophila melanogaster: ультраструктурная организация и взаимодействие в условиях стресса

• Автор: Жукова, Мария Владимировна
• Шифр специальности: 03.03.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 161 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Эндосимбиотические бактерии
1.2. Wolbachia- внутриклеточные симбионты членистоногих и нематод
1.2.1. Ультраструктурная организация Wolbachia
1.2.2. Филогения Wolbachia
1.2.3. Репродуктивные модификации, вызываемые Wolbachia
Партеногенез
Цитоплазматическая несовместимость
Андроцид, или «гибель самцов»
Феминизация
1.3. Drosophila - удобный объект для исследования структуры, функции и распределения симбиотических бактерий Wolbachia в клетках хозяина
1.3.1. Оогенез у D. melanogaster
1.3.2. Ранний эмбриогенез Di melanogaster
1.3.3. Распределение Wolbachia в яичниках и эмбрионах видов Drosophila34
1.4. Влияние неблагоприятных факторов окружающей среды на про- и эукариотические организмы
1.4.1. Характеристика белков теплового шока
1.4.2.Действие повышенных температур на про- и эукариотические организмы
1.4.3. Влияние голодания на про- и эукариотические организмы
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1.1. Характеристика использованных в работе лабораторных линий D.
melanogaster и условия стрессовых воздействий на мух
Условия теплового воздействия на мух
Условия голодания мух
2.2. Молекулярно-биологические методы
2.2.1. Выделение геномной ДНК из яичников D. melanogaster
2.2.2. Условия полимеразной цепной реакции (ПЦР) для определения наличия бактерий в организме/), melanogaster
2.2.3. Электрофорез ДНК в агарозном геле
2.2.4. Выделение фрагментов ДНК из агарозных гелей и определение нуклеотидной последовательности фрагментов ДНК
2.3. Методы микроскопического анализа
2.3.1. Окраска яичников акридиновым оранжевым для выявления апоптоза
с использованием флуоресцентной микроскопии
2.3.2. Получение синцитиальных эмбрионов, их фиксация и приготовление препаратов для изучения распределения Wolbachia с использованием
конфокальной микроскопии
2.3.3; Фиксация и заключение в смолу яичников для электронной микроскопии
2.3.4. Фиксация и заключение в смолу эмбрионов D. melanogaster для ультраструктурного анализа
2.3.5. Получение, окрашивание и.исследование полутонких и ультратонких срезов
2.4. Статистические методы
2.4.1. Определение выживаемости потомства неинфицировапной и инфицированной Wolbachia линии D. melanogaster
2.4.2. Определение продолжительности жизни неинфицированной и инфицированной Wolbachia линии D. melanogaster в условиях голодания
2.4.3. Подсчет количества гермариев с апоптозом
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Симбиотическая ассоциация Wolbachia штамм wMelPop-D. melanogaster wl 118. Ультраструктурная организация и взаимодействие симбионтов в стандартных лабораторных условиях
3.1.1. Идентификация бактерий Wolbachia штамм wMelPop в линии D. melanogaster w 1118 с помощью молекулярно-биологических методов
3.1.2. Морфология клеток яичника неинфицированной и инфицированной Wolbachia линии D. melanogaster на разных стадиях оогенеза
Данные световой микроскопии
Данные электронной микроскопии
3.1.3. Распределение бактерий Wolbachia штамм wMelPop, их ультраструктура и взаимодействие с внутриклеточными органеллами в клетках яичника и синцитиальных эмбрионах D. melanogaster wl
3.1.4. Увеличение частоты апоптоза в клетках гермария D. melanogaster wl 118, инфицированных бактериями Wolbachia штамм wMelPop, по сравнению с неинфицированными D. melanogaster wl 118Т
Сравнительный анализ частоты апоптоза в гермариях у неинфицированной и инфицированной Wolbachia штамм wMelPop линии
D. melanogaster
Электронно-микроскопический анализ гермариев в яичниках
неинфицированных и инфицированных Wolbachia мух
3.2. Симбиотическая ассоциация Wolbachia штамм wMelPop-Т). melanogaster wl 118. Ультраструктурная организация и взаимодействие симбионтов после действия повышенной температуры
3.2.1. Подбор оптимальных условий для теплового воздействия на D. melanogaster
3.2.2. Морфология яичников неинфицированной и инфицированной симбиотическими бактериями линии D. melanogaster после действия на них повышенной температуры
Данные световой микроскопии
Данные электронной микроскопии
3.2.3. Распределение бактерий Wolbachia штамм wMelPop, их ультраструктура и взаимодействие с внутриклеточными органеллами в
желточное

полярные клетки
Рис. 6. Схема раннего эмбриогенеза у D. melanogaster (Foe, Alberts, 1983). Цифрами обозначены циклы деления ядер 1-14. 14А — начало формирования
клеток.