Диссертация на тему "Синтез иммуноактивных фрагментов белка Asp f 2 из грибка Aspergillus fumigatus и конструирование вирусоподобных частиц для специфической иммунотерапии аллергии", скачать бесплатно автореферат по специальности 02.00.10

Оглавление

Список используемых сокращений

Введение.

1 лава 1. Обзор литературы.

1. Клиникоиммунологические особенности аллергического ответа на

АзрегШшитаиз.

1.1. Плесневый грибок АзрегфИиз.

1.2. Экзогенный аллергический альвсолит

1.3. Аллергический бронхолегочный аспергил..

1.4. Другие аллергические заболевания, вызываемые рибком Арегркитац

1.5. Генетический контроль и фактори, определяющие развилке аллергии.

1.6. Мы энная модель аллергии на ЛфсгхИия итаия.
2. Процессинг и презентация анттиена.
2.1. Нреснация пептидов молекулами ГКГС I класса.
. Презентация антигенных пептидов молекулами ГКГС И класса.
2.3. Профессиональчьк антиген представляющие клетки
2.4. Структура молекул ГКГС
2.5. Полиморфизм ГКГС
2.6. Распознавание антигена Тклетками и их аьливаии
2.7. Дифференцировал Тхслиеров
2.8. Эффекюрные механизмы антиемспецифичиого иммунного ответа.
2.8.1. Опет на внеклеточный патоген и растворимые бедки
2.8.2. Ответ на патогены, псрекститующис в цитоплазме клегокхоздииа
2.8Л. Отпет па патогены, перс копирующие эндосомах фагоцитирующих клегок
3. Теоретические методы поиска аитгениых детерминант дня белков с известной первичной структурой.
3.1. Локализация Ткдеточных эпитопов
3.2. Локализация Вклеточных эпитопов
4. Модуляция аллергического иммунного ответа.
4.1. Специфическая кммуюгералии аллергических заболеваний.
4.2. Пептидная иммунотерапия.
Глава 2. Материалы и методы.
1. Животные...
2. Антигены. .
3. Выбор пептидов..
4. Синтез пептидов
5. Вирусоподобные частицы на основе дрожжевого белка р.
6. Электрофорез в ПААГ
7. Питательная среда.. .
8. Получение Тклсточных гибридом ...
9. Локализация Тккпхчных эпитопов
. Оценка продукции ИЛ2..
. Радиоизотопный метол
. Получение дендритных клеток .
. Связывание синтетических пептидов с молекулами ГКГС 2 и I2
. Модуляция иммунного ответа памяш па пептиды из белка 2, экспрессированные в составе вирусоподобных частиц,.
. Полу чение клеточных суспензий.
. Культивирование клеток .
. Твердофазный иммуноферментный анализ .
. Определение пероксидазы в эозииофилач.
. Статистическая обработка результатов.
Глава 3. Результаты.
1. Определение Т и Вклсточных эпитопов белка 2
1.1. Характеристика белка 2.
1.2. Выбор пептидов в последовательности 2 для анализа Т и Вклсточмых эпитопов белка.
1. Синтез пептидов.
1.4. Анализ Тклсточных эпитопов белка i 2
1 5. Рестрикция молекулами ГКГС класса иммунного ответа пачяги на белок 2.
1.6. Анализ Вклсточных эпитопов белка 2.
2. Оценка антигенных свойств доминантных Т и Вклсточных эпигонов
белка 2, встроенных в вирусоподобные частицы ВПЧ
3. Снижение иммунного отпета к алдергетгу iii с
использованием встроенных в ВПЧ доминантных Тклсточных эпитопов белка 2
Глава 4. Обсуждение результатов
Выводы.
Список литературы

Полу чение клеточных суспензий. Культивирование клеток . Твердофазный иммуноферментный анализ . Определение пероксидазы в эозииофилач. Статистическая обработка результатов. Глава 3. Результаты. Характеристика белка 2. Выбор пептидов в последовательности 2 для анализа Т и Вклсточмых эпитопов белка. Синтез пептидов. Рестрикция молекулами ГКГС класса иммунного ответа пачяги на белок 2. Анализ Вклсточных эпитопов белка 2. Глава 4. Выводы. Список литературы. Нбензотрказол1нл1. Актуальность проблемы. Аллергические заболевания являются результатом хронической активации иммунной системы, индуцированной белками, проникающими через мехтбранный барьер зпитслия и слизистых оболочек. Эти в большинстве случаев безвредные белки представляются антигенпредставляющими клетками АПК 4 Тлимфоцитам, которые индуцируют гуморальный иммунный ответ, приводящий в конечном итоге к продукции I у генетически предрасположенных индивидуумов. Повторный контакт с антигеном ведт к распознаванию дополнительных белков из комплексных аллергенов, таких как повсеместно распространнный грибок i ii, и заболевание постепенно прогрессирует, приводя к развитию бронхиальной астмы, аллергическому пневмониту и аллергическому бронхолгочному аспсргиллсзу АБЛА. Успешные подходы к лечению аллергии включают хорошо известную специфическую иммунотерапию СИТ экстрактахш аллергенов н е современный вариант пептидную иммунотерапию ПИТ с использованием доминатных фрагментов основных белков аллергенов. Считается, что указанные терапевтические методы снижаюг специфический иммунный ответ путем индукции периферической толерантности у 4 Тклегок. СИТ включает серию подкожных инъекций с постепенно увеличивающимися дозами аллергенов до достижения дозы, обеспечивающей эффективный результат. Недостатками СИТ являются ее низкая эффективность, длительный период лечения и побочные эффекты местные и общие аллергические реакции ватоть до анафилактического шока. ПИТ в этом смысле более безопасна, поскольку используемые для лечения короткие линейные пептиды из аллергенов представляют собой Тэпитопы белков и, как правило, не вызывают анафилаксии. Было показано, что ПИГ эффективна при лечении аллергии к пчелиному яду, пыльце берзы и шерсти кошек. Для лечения аллсршческих заболеваний, вызванных сенсибилизацией на белки грибха i i, СИТ никогда не применялась, что связано как с отсутствием стандартизованных экстрактов, так и с потенциально высокой опасностью дня жизни побочных эффектов при лечении астмы и бронхолегочного аспергнллеза. Цели и задачи работы. Настоящая работа посвящена выявлению с помощью синтетических пептидов Т и Вклсточных эпитопов белка 2. Предсказать на основе теоретических методов анализа потенциальные Т и Вклеточные эпитопы белка 2 и синтезировать соответствующие им пептиды. С использованием синтетических пептидов определить доминантные Тклеточные эпитопы белка 2, ресгрицированныс молекулами ГКГС II класса. С использованием синтетических пептидов выявить линейные Вклеточные эпитопы белка 2. Определить, распознаются ли пептиды, представляющие доминантные Тклеточные эпитопы белка 2 и экспрессированные в составе вирусоподобных частиц ВПЧ. Г и Вхлетками мышей, иммунизированных белком 2. Изучить возможность модуляции аллергического иммунного ответа на грибок i i доминантными Тэпитопами белка 2, встроенными в ВПЧ. Научная новизна и практическая значимость работы. В настоящей работе впервые определены пептиды, соответствующие В и Ткдеточным эпитопам белка 2 из плесневого грибка i i. На мышиной модели с использованием линии гаплотип II2 установлена молекула ГКГС II класса, представляющая доминантные Тэпитопы белка 2 1 Тяимфоцитам. Тэшпопами белка 2 для снижения иммунного ответа к аллергену i i. Полученные данные являются основой для дальнейшей работы по определению Тклеточных эпитопов из белков аллергенного комплекса i i в популяции люден, страдающих гиперчувствительносгъю к данному грибку, и созданию препаратов для безопасной иммунотерапии аллергических заболеваний.

Название работы	Автор	Дата защиты
Конъюгаты олигонуклеотидов с металлофталоцианинами : Синтез, термодинамические свойства и реакционная способность	Черноносов, Александр Анатольевич	2005
Синтез и исследование биологических свойств аналогов стероидных эстрогенов, содержащих фтор в кольце А	Фидаров, Алан Фидарович	2014
Липиды термофильных бактерий Новой Зеландии	Лагутин, Кирилл Александрович	2013

Электронная библиотека диссертаций

Синтез иммуноактивных фрагментов белка Asp f 2 из грибка Aspergillus fumigatus и конструирование вирусоподобных частиц для специфической иммунотерапии аллергии