Сульфатированные производные пектиновых полисахаридов

• Автор: Витязев, Фёдор Васильевич
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Сыктывкар
• Количество страниц: 125 с. : ил.

Содержание
Введение
1. Обзор литературы
1.1. Сульфатированные полисахариды
1.2. Гликозаминогликаны
1.2.1. Гиалуроповая кислота
1.2.2. Хондроштшсульфаты
1.2.3. Дерматансульфат
1.2.4. Кератансульфаты
1.2.5. Гепарин
1.3. Сульфатированные полисахариды растительного происхождения
1.3.1. Полисахариды бурых водорослей
1.3.2. Полисахариды красных водорослей
1.3.3. Полисахариды зеленых водорослей
1.4. Синтез сульфатированных полисахаридов
1.5. Определение компонентов в сульфатированных полисахаридах
1.5.1. ИК-спектроскопия
1.5.2. ЯМР спектроскопия сульфатированных полисахаридов
1.5.3. Методы количественного определения сульфатных групп
в полисахаридах
1.5.3.1. Колориметрический метод
1.5.3.2. Гравиметрический метод
1.5.3.3. Турбидгшетрический метод
1.5.3.4. Количественное определение сульфата по методу Доджсона
1.5.3.5. Ионно-хроматографический метод
1.6. Антикоагулянтная активность сульфатированных полисахаридов
1.6.1. Влияние сульфатных групп на антикоагулянтную активность
1.6.2. Влияние локализации сульфатных групп
1.7. Пектиновые полисахариды
1.7.1. Линейная область
1.7.2. Разветвлен} 1ые области
1.7.3. Рамногалактуронан
1.7.4. Рамногалактуронан
1.8. Физиологическая активность пектинов
1.9. Заключение
2. Обсуждение результатов
2.1. Получение галактуронана из пектина бадана толстолистного и его характеристика
2.2. Дериватизация галактуронана и пектинов
2.3. Сульфатирование галактуронана
2.4. Сульфатирование пектинов
2.5. ИК-спектроскопия пектинов и их сульфатированных производных
2.6. ЯМР спектроскопия сульфатированных производных пектинов
2.7. Растворимость пектинов и их сульфатированных производных

2.8. Физиологическая активность пектинов и их сульфатированных производных
2.9. Заключение
3. Экспериментальная часть
3.1. Реактивы и материалы
3.2. Экспериментальные условия
3.2.1. Общие экспериментальные условия
3.2.2. Аналитические методы
3.2.3. Получение галактуронанов из пектина бадана толстолистного Bergenia crassifolia L (ВС)
3.2.4. Получение триэтиламмониевой соли пектиновых полисахаридов и галактуронана
3.2.5. Получение монометилсульфата пиридина
3.2.6. Сульфатирование галактуронана ВСН
3.2.6.1. Метод I. Сульфатирование галактуронана ВСН монометилсульфатом пиридина
3.2.6.2. Метод II. Сульфатирование галактуронана ВСН
пиридинсульфотриоксидом
3.2.6.3. Метод III. Сульфатирование галактуронана ВСН хлорсульфоновой кислотой
3.2.7. Сульфатирование пектиновых полисахаридов
3.2.8. Фракционирование сульфатированных производных пектинов
3.2.9. Определение физиологической активности
3.2.10. Статистический анализ
Выводы
Список литературы

Условные обозначения
ВЭЖХ - высокоэффективная хроматография
ГЖХ - газожидкостная хроматография
ДМФА - А,А-диметилформамид
ДМСО - диметилсульфоксид
ФА - формамид
ТФУ - трифторуксусная кислота
GalA - галактуроновая кислота
ПС - полисахарид
Rha - рамноза
Ага - арабиноза
Xyl - ксилоза
Man — манноза
Glc - глюкоза
Gal - галактоза
MeO - метоксильные группы
S03 - сульфатные группы
ИК-спектр - инфракрасный спектр
ЯМР-спектр - спектр ядерного магнитного резонанса
Мп - среднечисловая молекулярная масса
Mw — средневесовая молекулярная масса
ВСН - галактуронан, полученный из пектина бадана толстолистного
ВС - пектин бадана толстолистного
LM - пектин ряски малой
PN - пектин рдеста плавающего
СР - пектин сабельника болотного
HS - пектин борщевика Сосновского
TVF — пектин пижмы обыкновенной
MD — пектин плодов яблони домашней
PD - пектин плодов сливы домашней
ЛПНП - липопротеины низкой плотности
DS - степень сульфатирования
Ts-OH - толуолсульфоновая кислота
RG - рамногалактуронан
RG-I - рамногалактуронан I
АЧТВ - тест частичного активированного тромбопластинового времени
ТВ - тест тромбинового времени
ПВ - тест протромбинового времени

делают вывод о том, что для наличия антикоагулянтных свойств необходимо присутствие сульфатных групп при втором атоме углерода, при этом замещение по СЗ- и С4-положениям не оказывает влияния на их активность. Было выявлено влияние стереоспецифичности при изучении фукансульфата [98]. Наличие сульфатных групп в С2- и С4-положеииях дисульфатированных фукозных остатков в цепи 1,3-а-фукапа является фактором, усиливающим ингибирование тромбина посредством протромбина. Если ингибирование происходит с участием гепаринового кофактора-П, то для проявления активности достаточно присутствия 4-О-сульфатированных фукозных остатков. Эти результаты демонстрируют, что взаимодействие фукансульфатов с протеиназами стереоспецифично и не определяется только наличием и распределением сульфатных групп в молекуле.
Показано, что антикоагулянтиая активность сульфатированных производных 1,4-[3-ксилана, 1,4-а-глюкана, 1,4-Р-глюкапа, 1,3-Р-глюкана и 1,3-р-галактана с высокой степенью замещения не зависит от конфигурации аномерного атома углерода, а определятся атомом углерода участвующим в образовании гликозидной связи. Для установления эффекта локализации сульфатных групп было проведено специфическое десульфатирование Сб-положения и показано, что полимеры с 1,3-связыо полностью теряют антикоагулянтную активность, при этом активность полисахаридов с 1,4-связыо остается прежней [72].
Для дерматансульфатов из морских беспозвоночных показано, что их анитикоагулянтные свойства напрямую зависят от расположения сульфатных групп в моносахаридных остатках глюкозамина, и изменения в структуре полисахарида, связанные с наличием сульфатных групп в С4- или Сб-положениях, несмотря на общую высокую степень сульфатирования, приводят к почти полной потере антикоагулянтной активности [99]. Аналогичные результаты были получены для дерматансульфата беспозвоночных [100]. Были исследованы два образца, один из которых содержал сульфатную группу в С4-положении, другой в Сб-положении