Механизмы иммунопатогенеза ВИЧ-инфекции и вирусного гепатита С на оригинальных моделях гуманизированных мышей

• Автор: Ковалев, Григорий Игоревич
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 148 с. : 37 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ:
ВВЕДЕНИЕ
Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Глава И. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ:
Глава Ш.
Создание адекватных гуманизированных мышиных моделей системной инфекции, позволяющих изучать патогенез ВИЧ
инфекции
Глава IV.
Изучения патогенеза ВИЧ инфекции на ДНО-Ьи модели
гуманизированных мышей
Глава V.
Создание мышиной модели для изучения патогенеза и терапевтических
подходов гепатропных инфекций
Глава VI.
Разработка иммуномодулирующей таргетной вакцинотерапии тяжелых
инфекционных заболеваний
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений
ААВ - аденоассоциированный вирус (вектор)
Ад - аденовирус
АПК - антигенпрезентирующие клетки
ВГВ - вирус гепатита В
ВГС - вирус гепатита С
ВПГ - вирус простого герпеса
ВЭБ - вирус Эпштэйна-Барр
ГСК - гемопоэтические стволовые клетки
ДНО-hu модель - двойная нокаутированная гуманизированная мышиная модель
ИЛ-2,4,7 - интерлейкин
ИФН-а,у - интерферон
ЛУ - лимфатические узлы
МАТ — моноклональные антитела
ПДК - плазмоцитоидные дендритные клетки
СЭВ - Стафилококковый энтеротоксин В
Трсг - Т-регуляторные клетки
ФНО -а - фактор некроза опухоли
AFC8 - комбинированный ген, контролируемый альбуминовым промотором AFC8-hu HSC/Hep - гуманизированная мышиная модель с человеческой печенью и гемопоэзом
BDCA2 - (англ., - blood dendritic cell antigen 2) - маркер плазмоцитоидных
дендритных клеток
CCR5 — хемокиновый рецептор
CFSE (англ., Carboxyfluorescein succinimidyl ester) - клеточный поверхностный краситель, позволяющий определять деление клетки.
CXCR4 - хемокиновый рецептор
GFP - (англ., green fluorescence protein) - зеленый флуоресцентный белок HVEM - костимуляционная иммуномодулирующая молекула,
экспрессированная на поверхности клеток IL7Ra - рецептор к интерлейкину
LIGHT - костимуляционная иммуномодулирующая молекула
экспрессированная на поверхности клеток
LT(3R-Ig - комбинированный белок состоящий из рецептора к лимфотоксину-р и иммуноглобулина
Rag2-/-yC-l- — двойной нокаут генов Rag2 и общей у С цепи рецепторов цитокинов
TLR (англ., Toll-like receptor) - Толл-подобный рецептор

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность
В последние десятилетия медицинским работникам различных специальностей приходится иметь дело с особым видом инфекционных заболеваний. Данные инфекции, как правило вирусной этиологии, не вызывают в большинстве случаев яркой клинической симптоматики во время и непосредственно после инфицирования, но их возбудители, проникая в клетки и реплицируясь в них, приводят к длительной персистенции инфекции, что проявляется тяжелыми хроническими заболеваниями, приводящими к инвалидизации и смерти значительного числа пациентов (Dustin L.B., 2007; Kallings L.O., 2008). Прежде всего, речь идет о инфекциях, возбудителями которых являются вирус иммунодефицита человека (ВИЧ), вирус гепатита С (ВГС) и вирус гепатита В (ВГВ), вирус Эпштейна-Барр (ВЭБ) и другие герпесвирусы (например, вирус саркомы Капоши). Ряд нозологий, вызываемых указанными вирусами, включает СПИД, хронический гепатит с исходом в цирроз печени и гепатоцеллюлярную карциному, лимфомы, саркомы и т.д. (Хаитов P.M., 1992; Bruno S., 2008).
Вовлечение иммунной системы играет основную роль в патогенезе указанных заболеваний. Иммунопатогенез данных заболеваний многогранен. Во-первых, для многих вирусов иммунные клетки являются мишенями и местом репликации, что приводит к прямой и опосредованной гибели клеток или их патологическому функционированию (Giorgi J.V., 1987; Siegal F.P., 2001;
Вирус гепатита вызывает надежный иммунный ответ со стороны CD4+ и CD8+ цитотоксических Т-клеток (ЦТЛ) у инфицированных пациентов. Однако, у большинства инфицированных гепатитом С, ВГС-инфекция не разрешается и развивается в хроническую ВГС-инфекцию что, связанно с нарушением функций CD4 и CD8 Т-клеток (Bowen D.G., 2005; Rehermann В., 2005). Устойчивая активность CD4+ Т-клеток, проявляющаяся стремительной пролиферацией ВГС-специфических клеток и продукцией ИЛ-2 и ИФН-у, является характерным признаком спонтанно разрешающейся инфекции, которая наблюдается у 10 - 20% пациентов инфицированных BTC (Cooper S., 1999; Grakoui A., 2003; Bowen D.G., 2005). У остальных же инфицированных слабый и краткосрочный ответ приводит к персистенции вируса (Chen С.М., 1997; Gerlach, J. Т., 1999). Накопление ВГС-специфических CD8+ цитотоксических Т-лимфоцитов, продуцирующих ИФН-у и демонстрирующих цитотоксическую активность на стимуляцию пептидами ВГС (Cooper, S., 1999, Lechner, F., 2000), в периферической крови и печени пациентов также коррелирует со снижением уровня РНК вируса (Shoukry, N. H., 2003). Однако этот CD4+ CD8+ ответ в большинстве случаев не достаточно эффективен для защиты от развития хронической инфекции, наблюдаемой у примерно 80% инфицированных (Afdhal, N. H., 2004.). В процессе развития персистирующей инфекции наблюдается снижение уровня и функциональной активности Т-клеток периферической крови, а так же количество распознаваемых вирусных эпитопов (Сох, A. L., 2005). Высокий уровень репликации ВГС с продуцированием