Клеточные и молекулярные механизмы противовирусной защиты при клещевом энцефалите

• Автор: Крылова, Наталья Владимировна
• Шифр специальности: 14.03.09, 03.02.02
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 271 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Обзор литературы Глава 1. Клинико-патогенетическая характеристика клещевого энцефалита

1.1. Краткая молекулярно-генетическая характеристика флавивирусов

1.2.Клинико-патогенетические особенности клещевого энцефалита

Глава 2. Современные представления о врожденных и адаптивных факторах иммунитета при флавивирусных инфекциях

2.1. Роль факторов врожденного иммунитета при флавивирусных инфекциях

2.2. Роль факторов адаптивного иммунитета при флавивирусных инфекциях

2.3. Формирование врожденного и адаптивного иммунного ответа под

влиянием флавивирусных вакцин

Глава 3. Современные средства этиотропной терапии при флавивирусных инфекциях
3.1. Противовирусные препараты, обладающие прямым этиотропным действием (химиопрепараты и интерфероны)
3.2.Препараты, обладающие иммуномодулирующими и
противовирусными свойствами
3.3.Иммуномодуляторы природного происхождения
Собственные исследования
Глава 4. Материалы и методы
4.1. Материалы исследования
4.2. Методы исследования
Г лава 5. Комплексная оценка состояния иммунной системы пациентов с антигенемией вируса клещевого энцефалита
5.1. Характеристика уровня антигенемии у пациентов с антигенемией
вируса КЭ
5.2. Оценка состояния иммунной системы пациентов с разным уровнем антигенемии вируса КЭ
5.2.1 Характеристика состояния клеточного иммунитета у пациентов с антигенемией ВКЭ
5.2.2 Характеристика состояния гуморального иммунитета у пациентов с антигенемией ВКЭ
5.2.3 Цитокиновый статус у пациентов с антигенемией ВКЭ
Глава 6. Комплексная оценка состояния иммунной системы пациентов с манифестными формами КЭ в остром периоде заболевания
6.1 Характеристика состояния клеточного иммунитета у пациентов с манифестными формами КЭ
6.2 Характеристика состояния гуморального иммунитета у пациентов с манифестными формами КЭ

6.3 Цитокиновый статус у пациентов с манифестными формами КЭ
Глава 7. Особенности взаимодействия дальневосточных штаммов вируса клещевого энцефалита с клетками иммунной системы ex vivo, in vitro и in vivo
7.1 Динамика экспрессии адгезионных и активационных маркеров на клетках крови ex vivo под влиянием штаммов вируса КЭ
7.1.1 Динамика накопления штаммов вируса КЭ в пробах цельной крови доноров
7.1.2 Влияние штаммов вируса КЭ на экспрессию молекул адгезии и активационного маркера CD69 клетками врожденного иммунитета
7.1.3 Влияние штаммов вируса КЭ на экспрессию активационных
молекул Т-лимфоцитами и NK-клетками периферической крови человека..
7.2 Динамика продукции цитокинов лейкоцитами крови in vitro под влиянием штаммов вируса КЭ с разной биологической характеристикой
7.2.1 Динамика накопления штаммов вируса КЭ в супернатантах культуры мононуклеарных клеток человека
7.2.2 Влияние штаммов ВКЭ на продукцию провоспалительных
цитокинов мононуклеарными клетками крови in vitro
7.2.3 Влияние штаммов ВКЭ на продукцию интерферонов I и II типов мононуклеарными клетками крови in vitro
7.3 Продукция цитокинов у мышей линии BALB/c, инфицированных разными штаммами вируса КЭ
7.3.1 Сравнение биологических свойств штаммов вируса КЭ при инфицировании мышей линии BALB/c (вирулентность, репродукция в
крови и мозге)
7.3.2 Динамика продукции цитокинов (TNF-a, IL-6, IL-10, IFN-y) в крови и
мозге мышей BALB/c, инфицированных штаммами вируса КЭ
Глава 8. Изучение противовирусной активности биологически активных веществ морских гидробионтов при экспериментальном клещевом энцефалите
8.1 Изучение активности люромарина и тинростима in vitro в отношении вируса клещевого энцефалита
8.2 Изучение активности люромарина и тинростима при
экспериментальном клещевом энцефалите
Заключение
Выводы
Список литературы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ГЭБ - гематоэнцефалический барьер ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ИФА - иммуноферментный анализ КонА - конканавалин А КЭ - клещевой энцефалит Мн - моноциты Мф - макрофаги
МКБ-10 - Международная классификация болезней Десятого пересмотра
МКБ-10 рубрика А84.0 - Дальневосточный клещевой энцефалит
Нф - нейтрофилы
РНК - рибонуклеиновая кислота
СПЭВ - перевиваемая культура клеток почек эмбриона свиньи
СГТ (СГТА) - средняя геометрических титров антител
ТЦД5о - 50% тканевая цитопатическая доза
ЦИК - циркулирующие иммунные комплексы
ЦНС - центральная нервная система
ЦПД - цитопатическое действие
CD - антигены кластеров дифференцировки клеток
CR - рецептор для компонентов комплемента
CTL - цитотоксические лимфоциты
С1, -3, -4, -5 - компоненты комплемента
DCs - дендритные клетки
FcR -рецептор для Fc-фрагмента молекулы иммуноглобулина IL - интерлейкин
IgA-, М, -G - иммуноглобулины соответствующих классов
ICAM - молекулы межклеточной адгезии
IFN - интерферон
LD50 - 50% летальная доза

(CD 18, CD 11 a, CD 11b, CD 11c) участвуют в адгезии лейкоцитов к клеткам эндотелия. Интегрины могут быть рецепторами для целого ряда вирусов [212, 261], включая реовирусы (ßi-интегрины), эховирусы (cx2ßi), вирусы ящура (avßb avß3 и avß6), хантавирусы (ß3), вирусы герпеса (a3ßi), ротавирусы (a2ßi, avß3), цитомегаловирусы (cx2ßi, aeßb <хуРз)- Рецепторной молекулой для вируса КЭ в человеческих клетках RH может являться а3ргинтегрин [128]. Другими авторами установлено участие интегрина avß3 для входа вирусов WNV, JEV, DNV в клетки позвоночных [159, 234]. Однако другая исследовательская группа показала, что связывание некоторых флавивирусов (JEV, Мюррей, WNY) с интегрином avß3 не играет важной роли для входа вируса в клетку [311, 427]. Из всего вышесказанного можно сделать вывод, что, вероятнее всего, интегрины являются одной из рецепторных молекул для флавивирусов на клетках млекопитающих.
- Высокоаффинный ламининсвязывающий белок
Ламининсвязывающий белок (ЛСБ) относится к неинтегриновым клеточным рецепторам для ламинина, одного из основных белков базальной мембраны. Этот рецептор найден в культурах клеток насекомых, птиц, млекопитающих, что хорошо согласуется с тем, что флавивирусы, в том числе и ВКЭ, способны реплицироваться в различных клетках. Была показана эффективность блокирования репликации ряда вирусов (DENV, WNV, ВКЭ, ВВЭЛ, Синдбис) антителами к этому рецептору [64, 128, 464]. Высокая специфичность взаимодействия вирусов и ЛСБ открывает новые возможности для создания антивирусных препаратов, направленно блокирующих это рецепторное взаимодействие.
-Другие молекулы клеточной поверхности как возможные рецепторы для флавивирусов

Основной маркер Мн/Мф - молекула CD 14 служит рецептором для бактериального липополисахарида (ЛПС). Участие CD14 в инфекции,