Естественная цитотоксическая активность дендритных клеток против клеток опухолевых линий и активированных лимфоцитов

• Автор: Тыринова, Тамара Викторовна
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 136 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Список сокращений
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ДЕНДРИТНЫЕ КЛЕТКИ. РОЛЬ ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК В ИММУННОМ ОТВЕТЕ (Обзор литературы)
1.1. ХАРАКТЕРИСТИКА ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК
1.1.1. Общие сведения о дендритных клетках
1.1.2. Фенотипические и функциональные особенности различных типов дендритных клеток
1.2. ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК
1.2.1. Молекулярные механизмы, опосредующие гибель клеток-мишеней
1.2.2. Цитотоксическая активность ДК против опухолевых клеток
1.2.3. Цитотоксическая активность ДК против иммуннокомпетентных клеток
1.3. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА №N0- И 11-4-ИНДУЦИРОВАННЫХ ДЕНДРИТНЫХ КЛЕТОК
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. ХАРАКТЕРИСТИКА БОЛЬНЫХ, ВКЛЮЧЕННЫХ В ИССЛЕДОВАНИЕ
2.2. ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.2.1. Получение дендритных клеток и супернатантов цельных культур
2.2.2. Определение субпопуляций клеток методом проточной цитофлуориметрии
2.2.3. Определение цитотоксической активности ИФН-ДК
2.2.4. Оценка аллостимуляторной активности ИФН-ДК
2.2.5. Определение продукции цитокинов методом иммуноферментного анализа
2.3.СТАТИСТИЧЕСКАЯ ОБРАБОТКА ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. ПРОТИВООПУХОЛЕВАЯ ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ИФН-ДК IN VITRO
3.2. ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ИФН-ДК БОЛЬНЫХ ОПУХОЛЯМИ ГОЛОВНОГО МОЗГА
3.3. РЕГУЛЯЦИЯ ЦИТОТОКСИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ИФН-ДК IN VITRO
3.3.1. Коррекция цитотоксической активности ИФН-ДК при онкопатологии
3.3.2. Гормональная регуляция цитотоксической активности ИФН-ДК in vitro
3.4. ЦИТОТОКСИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ИФН-ДК ПРОТИВ Т.-ЛИМФОЦИТОВ И NK-КЛЕТОК
ОБСУЖДЕНИЕ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений
АГ Антиген
АПК Антиген презентирующие клетки
ДК Дендритные клетки
ДНК Дезоксирибонуклеиновая кислота
дцДНК Двуцепочечная ДНК
ИЛ4-ДК Интерлейкин-4-индуцированные дендритные клетки
ИФН-ДК Интерферон-альфа-индуцированные дендритные клетки
км Костный мозг
лпс Липополисахарид
МИК Мононуклеарные клетки
ПК Периферическая кровь
скл Смешанная культура лимфоцитов
сЭП Сополимер производных этиленпиперазина
ФГА Фитогемагглютинин
цтл Цитотоксические Т-лимфоциты
СБ Кластер дифференцировки
СБ40Ь лиганд к СБ40
(ИЛИА Двуцепочечная рибонуклеиновая кислота
ЙАББ Раэ-ассоциированный домен смерти
РибЬ Раэ-лиганд
ОМ-С8Р Гранул оцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор
НБА-Б11 БЫ антигены главного комплекса гистосовместимости
то Индоламин 2,3-диоксигеназа
1Ш Интерферон
1Ь-2,1Ь-4 и др. Интерлейкин-2, интерлейкин-4 и др.
ч Иммуноглобулин
МНС I, МНС II Молекулы I и II класса главного комплекса гистосовместимости

В экспериментальных моделях было показано, что ДК начинают поглощать фрагменты апоптотических клеток через несколько минут после индукции апоптоза в опухолевых клетках. Это позволяет предположить, что оба события тесно связаны [215]. Однако индукция цитотоксической активности ДК через TLR, IFN или иные факторы должна способствовать созреванию и соответственно уменьшению их способности поглощать антигены. Для того чтоб понять природу иммунного ответа, индуцированного ДК, необходимо определить, вызывает ли распознавание опухолевых клеток киллерными ДК созревание ДК in vivo.
Роль цитотоксической активности ДК в противоопухолевом иммунном ответе малоизучена, и все еще нет достаточного количества сведений о том, что ДК могут непосредственно уничтожать клетки-мишени in vivo. Необходимы дальнейшие исследования и накопление новых данных для понимания молекулярных путей, приводящих к приобретению цитотоксических свойств и способов их регуляции, а также механизмов распознавания опухоли дендритными клетками.
1.2.3. Цитотоксическая активность ДК против иммуннокомпетентных клеток
Важную роль в индукции цитотоксических свойств ДК при вирусной инфекции играют TLR-7- или TLR-9-опосредованная стимуляция вирусными частицами или интерферонами I типа. Вирус иммунодефицита человека (ВИЧ) является естественным лигандом к TLR-7 [29], присутствующему на пДК. Известно, что TLR-7-лиганды индуцируют секрецию IFNa, который в свою очередь по аутокринному механизму стимулирует экспрессию проапоптогенной молекулы TRAIL на пДК [85]. Установлено, что экспрессия TRAIT. пДК может прямо коррелировать с вирусной нагрузкой у ВИЧ-инфицированных больных [202]. Кроме того, повышенный уровень экспрессии TRAIL-R1 на СБ4+Т-клетках, характерный для таких больных, сопряжен с увеличением чувствительности к TRAIL-опосредованному апоптозу, индуцированному пДК. В то же время специфическая