Исследование на доклиническом уровне противоопухолевых эффектов флавоноидов корня солодки

• Автор: Цицуашвили, Майя
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 104 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИИ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Современные направления противоопухолевой терапии
1.2. Молекулярные мишени и механизмы, лежащие в основе дей
ствия таргетных препаратов
1.3. Флавоноиды, как основа для создания новых противоопухо
левых лекарственных средств
1.3.1. Ингибирование протеинтирозинкиназ, как механизм противо
опухолевого действия флавоноидов
1.3.2. Флавоноиды в регуляции клеточного цикла
1.3.3. Флавоноиды как индукторы апоптоза
1.3.4. Флавоноиды - ингибиторы ангиогенеза
1.3.5. Использование флавоноидов для повышения эффективности химиотерапии и преодоления резистентности опухоли к цито
статикам
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Поэтапная схема постановки экспериментов
2.2. Лабораторные животные
2.3. Опухолевые клеточные линии и штаммы
2.3.1. Характеристика используемых опухолевых клеточных линий
и условия их культивирования in vitro
2.3.2. Характетистика опухолевого штамма и условия его поддер
жания in vivo
2.4. Тестируемые агенты
2.4.1. Стандартизация ФКС
2.5. Оценка пролиферации
2.6. МТТ-тест (изучение прямой цитотоксичности ФКС)
2.7. Оценка апоптоза
2.8. Модель перевиваемой опухоли
2.8.1. Оценка противоопухолевой эффективности ФКС на модели
перевиваемой опухоли
2.8.2. Использование модели перевиваемой опухоли для оценки
влияния ФКС на противоопухолевый эффект ЦФ
2.9. Статистическая обработка результатов

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Изучение влияния флавоноидов корня солодки на ростовые характеристики различных опухолевых клеточных линий in vitro
3.1.1. Изучение влияния ФКС на пролиферацию опухолевых клеток in vitro
3.1.2. Изучение влияния ФКС на жизнеспособность опухолевых клеток in vitro
3.1.3. Изучение влияния ФКС на апоптоз опухолевых клеток in vitro
3.2. Изучение влияния флавоноидов корня солодки на ростовые
характеристики резистентной к доксорубицину клеточной опухолевой линии K-562/DOX in vitro
3.2.1. Изучение влияния ФКС и доксорубицина на пролиферацию опухолевой линии K-562/DOX in vitro
3.2.2. Изучение влияния ФКС и доксорубицина на апоптоз клеток опухолевой линии K-562/DOX in vitro
3.3. Изучение противоопухолевой эффективности флавоноидов корня солодки в модели in vivo
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ГТФ - гуанозинтрифосфат
ДМСО - диметилсульфоксид
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
ИК50 - ингибирующая концентрация, соответствующая 50% эффекту
МАТ - моноклональные антитела
МЛУ - множественная лекарственная устойчивость
СТ - сигнальная трансдукция
ФКС - флавоноиды корня солодки
ФСБ - фосфатно-солевой буфер
ЦФ - циклофосфамид
С сік - циклинзависисмые киназы
МАРК - митоген активируемая протеинкиназа
Рр - Р-гликопротеин, мембранный транспортер
РОРОР - 2,5-дифенилоксазол
РРО- 1-4-ди(5-фенил)-2-оксазолил бензол
ЛТК - рецепторные тирозинкиназы

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2Л. Поэтапная схема постановки экспериментов
Принципиальная схема постановки экспериментов представлена на рис. 2.1 и состояла из следующих этапов:
1. На первом этапе проводилась стандартизация образца препарата фла-воноидов корня солодки (ФКС) по фенольным соединениям.
2. На втором этапе изучали противоопухолевую активность ФКС и ее механизмы в культуре опухолевых клеток in vitro.
3. На третьем этапе изучали противоопухолевую эффективность ФКС и их комбинации с доксорубицином в культуре опухолевой линии, резистентной к доксорубицину.
4. На четвертом этапе оценивали противоопухолевую эффективность ФКС в модели in vivo.
5. На пятом этапе оценивали влияние ФКС на противоопухолевый эффект алкилирующего цитостатика циклофосфамида (ЦФ).
ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.2. Лабораторные животные
В экспериментах были использованы мышы-самцы гибриды BDFi (C57B1/6xDBA2) (весом 18-20 г., возраст 6-8 недель), полученные из питомника РАМН (Крюково, Московская область). Животные содержались на стандартном пищевом рационе вивария при свободном доступе к воде и пище. Экспериментальные группы животных формировали рандомизиро-ванно по 8-10 мышей в каждой. В контрольные и опытные группы входили мыши, полученные из питомника одновременно, разброс по исходной массе животных составлял не более 10%. Все исследования на животных проводили не менее чем в трех повторных сериях опытов, в первой половине дня.