Влияние аминокислот на морфо-функциональные характеристики тканей молодых и старых крыс

• Автор: Концевая, Елизавета Александровна
• Шифр специальности: 14.01.30
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 134 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Возрастные особенности метаболизма аминокислот в организме
1.2. Теории старения клеток и тканей
1.2.1. Изменения метаболизма аминокислот при старении
1.2.2. Роль аминокислот в регуляции клеточного цикла и апоптоза
1.3. Функциональная роль рецепторов нейротрофических факторов роста в процессах пролиферации и апоптоза
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Органотипическое культивирование тканей
2.2. Морфологические и морфометрические методы исследования развития эксплантатов в органотипической культуре тканей

2.3. Определение эффективной концентрации аминокислот в органотипической культуре ткани
2.4. Иммуноцитохимические методы исследования эксплантатов
2.5. Метод оценки жизнеспособности клеток в культуре феохромоцитомы крысы РС12
2.6. Статистическая обработка экспериментальных данных
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Влияние аминокислот на ткани эктодермального генеза у молодых и старых крыс
3.2. Влияние аминокислот на ткани мезодермального генеза у молодых и старых крыс
3.3. Влияние аминокислот на ткани энтодермального генеза у молодых и старых крыс
3.4. Зависимость действия аминокислот от генеза и функции
тканей
3.5. Влияние сочетаний аминокислот на процессы клеточной пролиферации у молодых и старых крыс

3.6. Сравнительное влияние Ь- и О-аминокислот на клеточную пролиферацию
3.7. Действие аминокислот на выживаемость клеток РС12
3.8. Влияние аминокислот на дифференцировку иммунных клеток
в органотипической культуре селезенки
3.9. Влияние антител к рецепторам фактора роста нервов на
действие аминокислот в органотипической культуре ткани
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

использовали коллаген, полученный из сухожилий хвостов крыс по методу Бернстайна.
Хвост помещали в чашку Петри со спиртом и выдерживали при температуре минус 10°С не менее 15 минут, затем освобождали от кожи и при помощи двух зажимов разламывали на кусочки (по 1-1,5 см от кончика к центральной части), затем из него вытягивали сухожильные нити. Эти нити помещали в чашку Петри со стерильной дистиллированной водой и расщепляли на отдельные волокна при помощи тонких пинцетов. Затем волокна опускали в колбу, наполненную 150 мл 0,1% раствора ледяной уксусной кислоты, и оставляли в холодильнике на 48 часов. Затем содержимое колбы центрифугировали в течение 1 часа при 6000 об/мин. В результате получали до 80 мл вязкого раствора. К остатку добавляли 30 мл раствора уксусной кислоты, через 24 часа снова центрифугировали и в результате получали до 40 мл раствора коллагена. Приготовленный таким способом коллаген может храниться в холодильнике до года. Перед использованием коллаген подвергали диализу и испытывали на стерильность. Диализированный коллаген наносили на обезжиренную пластиковую поверхность чашки Петри (6=40 мм). Через час коллаген сливали, и поверхность высыхала на воздухе при комнатной температуре. Коллаген на дне чашки Петри образовывал тонкую пленку. Перед использованием поверхность несколько раз промывали раствором Хенкса.
Выделение тканей
В работе использовали органотипические культуры селезенки, печени, поджелудочной железы, миокарда, коры и подкорковых образований головного мозга, мозжечка, кожи, хряща, предстательной железы, семенников молодых (3-месячных) и старых (24-месячных) крыс линии Вистар, всего 5500 эксплантатов.