СОВЕРШЕНСТВОВАНИЕ ПРОГРАММЫ ЭКСТРАКОРПОРАЛЬНОГО ОПЛОДОТВОРЕНИЯ ПРИ СЕЛЕКТИВНОМ ПЕРЕНОСЕ ЭМБРИОНОВ И КОМПЛЕКСНОЙ МОРФОЛОГИЧЕСКОЙ И МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКОЙ ОЦЕНКЕ ГАМЕТ

• Автор: Краснощока, Ольга Евгеньевна
• Шифр специальности: 14.01.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 172 с. : 15 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
Задачи исследования
Научная новизна
Практическая значимость
Положения, выносимые на защиту
Структура и объем диссертации
ГЛАВА 1. ВРТ И МОЛЕКУЛЯРНЫЙ ПРОФИЛЬ ГАМЕТ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1 ПЕРСПЕКТИВЫ НЕИНВАЗИВНОЙ ДИАГНОСТИКИ СОСТОЯНИЯ ООЦИТА И ЭМБРИОНА
1.1.1 Роль морфологической оценки ооцита в программе ЭКО и ПЭ
1.1.2 Оценка эмбриона по морфологическим параметрам
1.1.3 Влияние интрафолликулярного окружения на качество ооцита
1.1.4 Роль ооцита в процессе фолликулогенеза
1.1.5 Роль гранулезных и кумулгосных клеток в оогенезе
1.1.6 Исследование генной экспрессии в гранулезных и кумулюсных клетках
1.1.7 Роль цитокинов в процессах фолликуло- и оогенеза
1.2 СПЕРМАЛЬНЫЕ МРНК КАК ПОТЕНЦИАЛЬНЫЕ БИОМАРКЕРЫ ИСХОДА ПРОГРАММ ВРТ
1.2.1 Семейство интегральных мембранных протеинов
1.3 КЛИНИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ СЕЛЕКТИВНОГО ПЕРЕНОСА ОДНОГО ЭМБРИОНА С ПОЗИЦИИ АКУШЕРСТВА, ПЕРИНАТОЛОГИИ, ЭМБРИОЛОГИИ
1.3.1 Клинико-социальная значимость многоплодия
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материал исследования
2.2 Методы исследования
2.3Молекулярно-генетические исследования в день трансвагинальной пункции яичников
2.4 Оценка эффективности программы ЭКО и ПЭ
2.5 Статистический анализ результатов исследования
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1 Клинико-анамнестическая характеристика пациенток
3.2 Сравнительная оценка циклов стимуляции суперовуляции у обследованных женщин
3.3 Сравнительный анализ эффективности ЭКО и ПЭ
3.4 Отдаленные результаты проведения ЭКО и ПЭ
3.5 Сравнительный анализ результатов молекулярно-генетического исследования фолликулярной жидкости
3.6 Сравнительная характеристика спермальных факторов
3.7 Прогнозирование наступления беременности по молекулярногенетическим характеристикам фолликулярной жидкости и спермы
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Список сокращений
аГнРГ - агонист гонадотропин-рилизинг гормона
АМГ - антимюллеров гормон
антГнРГ - антагонист гонадотропин-рилизинг гормона
ВОЗ - Всемирная организация здравоохранения
ВРТ - вспомогательные репродуктивные технологии
ГнРГ - гонадотропин-рилизинг гормон
ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота
Е2 - эстрадиол
ИКСИ - инъекция сперматозоида в цитоплазму ооцита
имт - индекс массы тела
ИФА - иммупоферментный анализ
КЛДФ - каноническая линейная дискриминантная функция
ЛГ - лютеинизирующий гормон
Me - медиана
мРНК - матричная РНК
ОКК - ооцит-кумулюсный комплекс
ОТ-ПЦР - полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией
РКП - рандомизированные контролируемые исследования
РНК - рибонуклеиновая кислота
рФСГ - рекомбинантный ФСГ
СГЯ - синдром гиперстимуляции яичников
ТВП - трансвагинальная пункция яичников
УЗИ - ультразвуковое исследование
ФЖ - фолликулярная жидкость
ФСГ - фолликулостимулирующий гормон
ХГ - хорионический гонадотропин
ЧМБ - частота наступления многоплодной беременности
чмг - человеческий менопаузальный гонадотропин
ЧНБ - частота наступления беременности
ЭКО и ПЭ - экстракорпоральное оплодотворение и перенос эмбрионов
в полость матки AREG - амфирегулин
ВАХ - регулятор апоптоза ВАХ (Bcl-2-подобный протеин-4)
BCL-2 - белок В-клеточной лимфомы
BIRC-5 - сурвивин, ингибитор апоптоза бакуловирусов
ВМР-15 - костный морфогенетический протеин
СОХ-2 - циклооксигеназа
cSET - вынужденный перенос одного эмбриона
DET - перенос двух эмбрионов
EGF - (epidermal growth factor) эпидермальный фактор роста
EGFR - рецептор эпидермального фактора роста

указания на необходимость индивидуального- культивирования ооцитов, эмбрионов, селективный перенос одного эмбриона.
Ранее, до существования метода полного геномного анализа, мнение о взаимосвязи экспрессии мРНК клеток кумулюса с качеством эмбриона было спорным [165]. Была проведена попытка создания мультивариантной модели прогнозирования развития эмбрионов и наступления беременности в программе ЭКО на основе сведений о генной экспрессии в кумулюсных клетках [88]. При этом были получены данные об изменении профиля экспрессии мРНК в кумулюсных клетках ооцитов разного качества. Авторы отмечали вариабельность между пациентами в профилях генной экспрессии. Однако для гена РТ082 отмечена более высокая транскрипция, для С КЕМ-1 более низкая транскрипция в ооцитах МП вне зависимости от протокола стимуляции суперовуляции и высокая корреляция уровня экспрессии мРНК РЮ82 (СОХ-2) с морфологией эмбриона на 3 сутки дробления [54, 88, 165].
Изучение экспрессии мРНК генов НА8-2, рецептора ФСГ, рецептора ЕОБ (ЕйЕК), ОКЕМ-1 также позволило различным группам авторов определять полноценность ооцита для оценки качества развившегося после оплодотворения эмбриона [90, 103].
Имеются работы о различиях генной экспрессии в гранулезных или кумулюсных клетках при различных протоколах стимуляции суперовуляции [54, 165]. ОгопбаЬ М.Ь. и соавт. в 2009г. проанализированы транскриптомные профили гранулезных клеток при стимуляции препаратами рекомбинантного фолликулостимулирующего гормона (рФСГ) и человеческого менопаузального гонадотропина (ЧМГ) в длинном протоколе. Полученные данные свидетельствовали о более низкой экспрессии генов рецепторов ЛГ и ХГ, генов, вовлеченных в метаболизм холестерола и стероидов при стимуляции препаратами ЧМГ в сравнении с рФСГ. Экспрессия гена Б-ЮО-кальций-связывающего протеина, обладающего антиапоптотической активностью, в группе стимуляции ЧМГ была выше [98].