Роль фактора активации тромбоцитов и С-реактивного протеина в регуляции функциональной активности макрофагов

• Автор: Шебзухов, Юрий Владимирович
• Шифр специальности: 14.00.36
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 131 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Взаимодействие местной и системной реакций организма на нарушение гомеостаза
1.2. Макрофаги - основное связующее звено между локальным воспалением, специфическим иммунитетом и острофазным ответом
1.3. ФАТ - основной регулятор локальной воспалительной реакции
1 .За. Структура и метаболизм ФАТ
1.36. ФАТ в качестве внутриклеточного регулятора
1.3в. Рецепторы ФАТ
1.3г. Действие ФАТ на макрофаги
1.4. С-РП - главный реактант острофазного ответа человека
1,4а. Структура и лигандная специфичность С-РП
1.46. Метаболизм С-РП
1,4в. Рецепторы С-РП
1.4г. Действие С-РП на макрофаги
1.5. Взаимодействие ФАТ и С-РП
СОБСТВЕННЫЕ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ДАННЫЕ
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Исследование влияния С-РП и ФАТ на фагоцитарную активность
макрофагов
3.1а. Изучение действия С-РП на фагоцитарную активность макрофагов
3.16. Изучение действия ФАТ на фагоцитарную активность макрофагов
3.1 в. Изучение совместного действия С-РП и ФАТ на фагоцитоз
3.2. Исследование влияния С-РП и ФАТ на продукцию макрофагами окиси
азота (N0)
3.2а. Сравнительное изучение продукции N0 макрофагами мышей линии ВАЬВ/с и мышей-гибридов (СВАхС57/В16)н под действием С-РП и ЛПС

3.26. Изучение возможного эффекта примесей ЛПС на индуцированную
С-РП продукцию N0
3.2в. Выяснение роли индуцибельной ИО-синтазы (ЖОБ) в активации
продукции N0 под действием С-РП
3.2г. Изучение зависимости уровня продукции N0 от степени активации
макрофагов
3.2д. Изучение действия ФАТ на продукцию N0 макрофагами
3.2е. Изучение совместного действия С-РП и ФАТ на продукцию N0
3.3. Исследование влияния С-РП и ФАТ на экспрессию 1а-антигенов на
макрофагах и клетках линии Р3880]
3.3а. Изучение влияния С-РП на экспрессию 1а-антигенов
3.36. Изучение влияния ФАТ на экспрессию 1а-антигенов
З.Зв. Изучение совместного влияния С-РП и ФАТ на экспрессию 1а-антигенов
3.4. Исследование функциональной активности комплекса С-РП-ФАТ
3.4а. Изучение влияния комплекса С-РП-ФАТ на продукцию N0
3.46. Изучение влияния комплекса С-РП-ФАТ на фагоцитарную активность
3.4в. Изучение влияния антагонистов ФАТ на фагоцитарную активность, стимулированную комплексом С-РП-ФАТ
3.5. Сравнительное исследование основных путей внутриклеточной сигнализации, опосредующих действие С-РП, ФАТ и комплекса С-РП-ФАТ 90 3.5а. Изучение влияния коклюшного токсина и генистеина на
индуцированную С-РП и комплексом С-РП-ФАТ продукцию N0
3.56. Изучение влияния коклюшного токсина и генистеина на фагоцитарную активность, стимулированную ФАТ и комплексом С-РП-ФАТ
3.5в. Изучение влияния стауроспорина и Н-9 на индуцированную С-РП и
комплексом С-РП-ФАТ продукцию N0
3.5г. Изучение влияния ЖвА и индометацина на индуцированную С-РП и
комплексом С-РП-ФАТ продукцию N0
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ДАГ - диацилглицерин
ИЛ - интерлейкин
ИФН - интерферон
КСФ - колониестимулирующий фактор
же - бактериальный липополисахарид
лт - лейкотриен
оп - острофазные протеины (белки острой фазы воспаления)
пг - простагландин
САП - сывороточный амилоид П
С-РП - С-реактивный протеин
ФАТ - фактор активации тромбоцитов
ФАТ-Р - рецептор фактора активации тромбоцитов
ФНО-ос - фактор некроза опухоли - а, кахетин
ФХ - фосфохолин
цАМФ - циклический аденозинмонофосфат
[Са2+]| - внутриклеточное содержание ионов Са2+
C-PS - соматический полисахарид клеточной стенки бактерий
Streptococcus рпеитопеае
FcyR - рецептор Fc-фрагмента иммуноглобулина G
G-протеин - ГТФ-связывающий протеин
IgG - иммуноглобулин G
iNOS - индуцибельная NO-синтаза
МНС - главный комплекс гистосовместимости
LTA - липотейхоевая кислота
NDGA - нордигидрогуаяретовая кислота
NO - окись азота, монооксид азота
PKA - цАМФ-зависимая протеинкиназа, протеинкиназа А
PKC - Са2+, липидзависимая протеинкиназа, протеинкиназа С
PL - фосфолипаза
PMA - форболмиристат ацетат
TGF-p - трансформирующий ростовой фактор-(3

В работе использованы мыши (самцы) линии ВАЬВ/'с, гибриды первого поколения (СВАхС57В1/6)рь а также клетки макрофагальной мышиной линии Р3880! (АТСС Т1В-63).
Методы
Выделение макрофагов.
Перитонеальные макрофаги получали вымывая физиологическим раствором из брюшной полости клетки перитонеального экссудата (КПЗ) с последующей адгезией на пластике в течение часа в указанных ниже условиях. Для получения стимулированных (привлеченных) макрофагов мыши за 3 дня до выделения КПЗ подвергались внутрибрюшинной инъекции 2 мл 4% раствора пептона.
Культивирование клеток.
Перитонеальные макрофаги мышей и клетки линии Р3880] культивировались/инкубировались в среде 1ТРМ1-1640, содержащей 10 мМ НЕРЕБ, 2 мМ Ь-глютамина, 80 мг/л гентамицина и 5% инактивированной нагреванием ЭТС при 37°С, влажности 95% и содержании ССЬ в атмосфере 5%. При комбинированном воздействии клетки преинкубировались 30 мин. с ингибитором или первым соединением в указанных выше условиях.
Определение фагоцитарной активности.
К монослою перитонеальных макрофагов (10б клеток на лунку 24-луночного планшета в 1 мл следы ЙРМ1-1640 без добавления ЭТС), проинкубированных в присутствии активирующих агентов, добавляли 0,1 мл