Анализ динамики межклеточных взаимодействий нормальных и трансформированных клеток в культуре

• Автор: Алиева, Наила Омар Кайям гызы
• Шифр специальности: 14.00.14
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 129 с. : ил.

2 ОГЛАВЛЕНИЕ
ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
Цель и задачи работы
Научная новизна и практическая значимость работы
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
I. Фибробласты и эпителиоциты. Морфология и организация
цитоскелета
1. Фибробластоподобные поляризованные клетки
2. Эпителиальные неполяризованные клетки
3. Изменение морфологии клетки под действием факторов
трансформации
П. Действие онкогена Ras
1. Ras - представитель семейства малых GTPa3
эффекторы Ras
2. Rho, Rac и Cdc42 и организация актина
III. Адгезия с внеклеточным матриксом, межклеточные контакты
1. Фокальная адгезия
2. Адгезионные соединения. Кадхериновая адгезия
2.1 Организация кадхеринового межклеточного контакта
2.2. Сигнальная трансдукция в межклеточном адгезионном
комплексе
2.2.1. Кадхерины как опухолевые супрессоры
2.2.2. ß-катенин - центральный элементрегуляции
межклеточной адгезии
2.2.3. Роль малых GTPa3 в функционировании
межклеточного контакта
3. Другие виды межклеточных взаимодействий

3.1. Десмосома
3.2. Плотные контакты
IV. Контактное торможение движения
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ “
I. Описание клеточных культур, использованных в работе
1. Клетки линии IAR
2. Клетки линии IAR-2(C4) ras
3. Клетки линии AGO 1523
4. Клетки линии Rat
5. Клетки линии Rat-1 ras
II. Дифференциальная интерференционно-контрастная микроскопия
III. Анализ псевдоподиальной активности
IV. Движение латексных частиц по поверхности клеток
V. Иммунофлуоресцентная микроскопия
РЕЗУЛЬТАТЫ ' "
I. Динамика установления межклеточного контакта нетрансформированными эпителиоцитами
1. Морфологические характеристики эпителиальных клеток

2. Анализ видеозаписи формирования межклеточного контакта эпителиальными клетками IAR
2.1. Нестабильный контакт
2.2. Начальный стабильный контакт
2.3. Расширяющийся стабильный контакт. Угнетение псевдоподиальной активности

4 3. Движение покрытых СопА латексных частиц по поверхности эпителиальных клеток 1АЯ
3.1. Движение латексных частиц на свободном крае эпителиальных клеток 1АЯ
3.2. Особенности движения СопА-покрытых латексных частиц по поверхности ламеллы в области межклеточного контакта клеток 1АЯ
4. Анализ актинового цитоскелета эпителиальных клеток ТАЯ
4.1 Организация актинового цитоскелета эпителиальных клеток 1АЯ
4.2 Изменение динамики актинового цитоскелета в ходе формирования межклеточного контакта эпителиоцитами 1АЯ
II. Межклеточный контакт в культурах гав-трансформированных эпителиоцитов
1. Поляризованный фенотип трансформированных эпителиоцитов 1АЯ-2(С4)-газ
2. Анализ видеозаписи формирования межклеточного контакта гаэ-трансформированными эпителиоцитами
2.1. Перекрывание ламелл
2.2. Ретракция ламеллы и поворот клетки
3. Движение покрытых Соп-А латексных частиц по поверхности клеток на свободном крае и в области формирования межклеточного контакта трансформированными эпителиоцитами линии 1АЯ-2(С4)-газ
4. Динамика актинового скелета в ходе межклеточного взаимодействия гав-трансформированных эпителиоцитов
4.1. Организация актинового цитоскелета гав
трансформированных эпителиоцитов

(рис.2 продолжение) Комплекс (3-катенин/ LEF-1 (или плакоглобин/ LEF-1) может перемещаться в ядро и непосредственно связываться с 5' концом гена Е-кадхерина (E-Cad) и другими генами,регулируя их экспрессию. (3-катенин и плакоглобин также участвуют в Wnt-сигнальном пути, который включает рецептор Wnt (Dfz2 у Drozophila), Dsh и GSK3f3(GSK). Ассоциация APC с микротрубочками (Mt) может оказывать негативный эффект на пролиферацию. Взаимодействие с тирозинкиназными рецепторами, такими как EGF рецептор (EGFR) или Erb-B2 рецептор (Erb-B2) с р-катенином и плакоглобином, возможно, также имеет определенное значение для передачи сигнала. С межклеточным контактом оказываются ассоциированы протеин киназы Src, протеин киназа С (РКС).
По Ben-Ze’ev A. Cytoskeletal and adhesion proteins as tumor suppressors. Curr.Opin.Cell Biol., 9, 99-108, 1997 (22).