Экспериментальное обоснование применения иммунологических методов в оценке предрасположенности к заболеванию крупного рогатого скота лейкозом

• Автор: Дудоладова, Татьяна Сергеевна
• Шифр специальности: 06.02.02
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Омск
• Количество страниц: 136 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Основные концепции канцеро-(лейкозо)-генеза
1.2 Общие сведения об иммунной системе
1.2.1 Система лейкоцитарных антигенов
1.2.2 Т-, В- и А- системы лимфоидных клеток
1.2.3 Иммунный ответ при лейкозах и
лимфопролиферативных состояниях
1.3 Методы диагностики лейкоза крупного рогатого скота
1.3.1 Клиническая диагностика
1.3.2 Гематологический метод диагностики
1.3.3 Патоморфологический метод исследования
1.3.4 Серологические методы диагностики лейкоза
крупного рогатого скота
1.3.4.1 Реакция иммунодиффузии в геле агара (РИД)
1.3.4.2 Метод иммуноферментного анализа (ИФА)
1.3.5 Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
1.3.6 Вирусологический метод
1.4 Заключение по обзору литературы
2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Материалы и методы
2.2 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.2.1 Эпизоотологическая обстановка по лейкозу крупного
рогатого скота в Омской области
2.2.2 Оценка иммунного статуса у крупного рогатого скота
при лейкозе
2.2.2.1 Приготовление маркера для определения
Т-лимфоцитов, распознающих антиген ВЛКРС
2.2.2.2 Иммунный статус у интактного и инфицированного
ВЛКРС молодняка крупного рогатого скота
2.2.2.3 Иммунный статус у здоровых, инфицированных
ВЛКРС и больных лейкозом коров
2.2.3 Иммунологические показатели в оценке предрасположенности к заболеванию крупного
рогатого скота лейкозом
2.2.4 Оценка стад крупного рогатого скота по лейкозу с использованием иммунологического метода в
совокупности с традиционными
3 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
4 ВЫВОДЫ
5 ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДОЖЕНИЯ
6 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы.
Лейкоз крупного рогатого скота широко распространен в Российской Федерации и наносит значительный экономический ущерб животноводству. Падеж и вынужденная выбраковка животных, утилизация туш и органов при убое, нарушение воспроизводительной функции больных коров, а также ограничения, связанные с реализацией продукции в неблагополучных хозяйствах - все это приводит к потерям, которые особенно ощутимы в племенном животноводстве (Л.Г. Бурба с соавт., 1988; Т.П. Кудрявцева, 1990; А.Т. Борзяк, 1990; И.Н. Петров, 1999; П.Н. Смирнов, 1992, 2005; И.М. Донник, 1999; М.И. Гулюкин, 1985, 2002, 2005; В.В. Разумовская, 2004; С.И. Логинов, 2005; В.В. Храмцов, М.А. Амироков, 2006 и др.).
Изучение иммунологических особенностей в развитии онкологических заболеваний человека и животных является одним из наиболее развивающихся и результативных направлений в медицине, ветеринарии, общей биологии.
Ранняя и точная диагностика лейкоза лежит в основе профилактических и оздоровительных мероприятий. В связи с этим особое значение приобретает разработка доступных для практики эффективных иммунологических методов прижизненной диагностики лейкоза. Развитие любой иммунной реакции происходит в результате взаимодействия различных элементов иммунной системы, активность которых контролируется на уровне системы и всего организма.
Одной из наиболее конструктивных концепций ветеринарной лейкозологии является, выдвинутая В.П. Шишковым (1977), вирусо-иммуногенетическая концепция (теория).
Вирусологический аспект теории характеризуется ведущей ролью РНК-содержащего вируса в этиологии заболевания. Данная концепция интегрирует в себе два неотделимых этиопатогенетических механизма лейкозного процесса — онковирусную инфекцию, как предлейкозное

При проведении сравнительных испытаний по выявлению BJIKPC-специфических антител в сыворотке крови или молоке животных с помощью двух методов (ИФА и РИД) все авторы отмечали более высокую чувствительность ИФА по сравнению с РИД (JI.A. Иванова, 1999; Т.В. Щекотурова с соавт., 1999; В.А. Крикун, 2002; H.A. Мальцева, 2003).
Совпадение результатов ИФА и РИД gp51 при исследовании одних и тех же сывороток получено в 99,5% случаев. Чувствительность ИФА выше, чем РИД (gp51 ) и это позволяет выявлять антитела у 20-70% естественно инфицированных животных на 3-12 недель раньше, чем в РИД с gp51-антигеном. В результате совершенствования методов приготовления вирусного антигена чувствительность и специфичность ИФА повысились (В.П. Шишков с соавт., 1985; A.A. Ressang et al., 1980).
ИФА целесообразно использовать на завершающих этапах оздоровления стад и хозяйств от инфекции BJIKPC, и в благополучных хозяйствах для эпизоотологического контроля. В перспективе, если удастся снизить уровень инфицированности стад вирусом лейкоза, в нашей стране ИФА должен заменить РИД (JI.A. Иванов, 1999; Н.Г. Двоеглазов, 2005).
1.3.5 Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) - искусственный процесс многократного копирования (амплификации) специфической последовательности ДНК, осуществляемый in vitro. Копирование ДНК при ПЦР осуществляется специальным ферментом - ДНК-TAq полимераза, двигаясь по одиночной цепи ДНК (матрице), синтезирует комплиментарную ей последовательность ДНК (С.В. Чичинина с соавт., 2004).
Метод ПЦР для выявления вируса лейкоза, в настоящее время применяется в научных и практических исследованиях (И.М. Донник с соавт., 2006).
ПЦР обладает максимальной чувствительностью и высокой специфичностью. Возможно обнаружение вируса в материале уже через