Факторы, регулирующие реализацию эффектов соматотропина и пролактина на фолликулогенез у коров

• Автор: Лебедев, Владимир Александрович
• Шифр специальности: 06.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Санкт-Петербург, Пушкин
• Количество страниц: 127 с.

ВСЕРОССИЙСКИЙ ЙАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ИНСТИТУТ ГЕНЕТИКИ И РАЗВЕДЕНИЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННЫХ ЖИВОТНЫХ
На правах рукописи
ЛЕБЕДЕВ Владимир Александрович
ФАКТОРЫ, РЕГУЛИРУЮЩИЕ РЕАЛИЗАЦИЮ ЭФФЕКТОВ СОМАТОТРОПИНА И ПРОЛАКТИНА НА ФОЙЛИКУЛОГЕНЕЗ У КОРОВ
Специальность 06.02.01 - разведение, селекция, генетика и воспроизводство
с.-х. животных
Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук
Научный руководитель: доктор биол. наук, профессор Т.И.КУЗЬМИНА
Санкт-Петербург - Пушкин 2000 г.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Участие гормонов гипофиза в регуляции фолликулогенеза у млекопитающих
1.1.1. Рост и развитие фолликулов в яичниках млекопитающих
1.1.2. Влияние гонадотропных гормонов на динамику созревания фолликулов и функциональные изменения в фолликулярных клетках
1.1.3. Современные представления о роли пролактина и соматотропина в контроле гипофиза за развитием антральных фолликулов
1.2. Характеристика рецепторов соматотропина и пролактина
1.2.1. Сходства и различия в структурных и функциональных свойствах рецепторов соматотропина и пролактина
1.2.2.' Регуляция концентрации рецепторов соматотропина и пролактина в клетках-мишенях
1.2.3. Овариальные рецепторы для пролактина и соматотропина
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Материал исследований
2.2. Методы исследований
2.2.1. Получение сыворотки крови коров
2.2.2. Морфологическая оценка фолликулов и выделение фолликулярной жидкости
2.2.3. Получение кроличьей антисыворотки к соматотропину
2.2.4. Радиоиодирование соматотропина и пролактина
2.2.5. Радиоиммунологическое определение концентрации соматотропина в фолликулярной жидкости и сыворотке
крови
2.2.6. Культивирование клеток гранулезы
2.2.7. Определение концентрации половых стероидных гормонов
в среде культивирования клеток гранулезы
2.2.8. Подготовка клеток гранулезы к радиорецепторному анализу
2.2.9. Проведение анализов связывания меченых соматотропина и пролактина с клетками гранулезы
2.2.10. Определение параметров связывания И характеристика конкурентного связывания соматотропина и пролактина с клетками гранулезы
2.2.11. Статистическая обработка полученных данных
3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Факторы, влияющие на интрафолликулярное содержание
соматотропина у коров
3.1.1. Сравнительный анализ содержания соматотропина у коров в жидкости антральных фолликулов яичников на разных стадиях развития и в сыворотке крови
3.1.2. Концентрация соматотропина у коров в жидкости антральных фолликулов диаметром 10-20 мм с различными признаками атрезии
3.2. Сравнительная характеристика рецепторов соматотропина и
пролактина на клетках гранулезы коров
3.2.1. Анализ связывания соматотропина и пролактина с клетками гранулезы
3.2.2. Влияние ионов магния на связывание соматотропина и пролактина с клетками гранулезы коров
3.2.3. Характеристика участков связывания соматотропина и пролактина на клетках гранулезы из антральных фолликулов различного диаметра
3.2.4. Конкурентное связывание соматотропина и пролактина с клетками гранулезы
3.2.5. Специфическое связывание пролактина с клетками гранулезы, подвергшимися лютеинизации или воздействию соматотропина in vitro
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ УКАЗАТЕЛЬ ИСПОЛЬЗОВАННОЙ
ЛИТЕРАТУРЫ

статуса животных [45, 165, 194]. Существуют также видовые и тканевые различия в соотношении длинной и короткой форм лактогенных рецепторов в овариальных клетках [45, 180, 194]. Кроме того, в клетках гранулезы и теки атретических фолликулов мышей в середине беременности была выявлена одна из трех усеченных форм рецепторов к ПРИ, которая отсутствовала в здоровых фолликулах [46]. Эти данные предполагают возможность выполнения некоторыми формами лактогенных рецепторов особой роли в процессах, связанных с дегенерацией фолликулярных клеток.
Как и в случае рецепторов к ПРЛ, участки связывания СТГ или их мРНК были обнаружены в желтом теле крыс [122], коров [125], свиней [217], овец [104] и человека [182]. В то же время данные об интрафолликулярной локализации соматотропных рецепторов у различных видов млекопитающих значительно варьируют. На всех стадиях развития и дегенерации фолликулов свиней, за исключением поздней атрезии, показано присутствие связывающих участков для СТГ в клетках гранулезы и теки, а также в ооцитах, однако интенсивность связывания гормона с клетками была выше в преантральных по сравнению с преовуляторными фолликулами [159]. У овец мРНК для СТГ были выявлены в тех же структурных компонентах преантральных и малых антральных фолликулов, что и у свиней [66]. Соматотропные рецепторы, а также их мРНК были локализованы главным образом в ооцитах примордиальных и первичных фолликулов, в клетках гранулезы вторичных фолликулов и в ку-мулюсных клетках третичных фолликулов коров [112]. Иммунореактивные участки связывания СТГ обнаружены в ооцитах и клетках гранулезы и теки крыс [122]. В то же время у человека только в гранулезных клетках антральных и доминантных фолликулов были найдены мРНК, кодирующие рецепторы для СТГ [182]. Таким образом, внутрифолликулярная локализация соматотропных рецепторов не только имеет межвидовые различия, но и зависит от стадии развития фолликулов. Необходимо отметить, что у коров и крыс участки связывания для СТГ обнаружены также в зародышевом эпителии и эндо-