Биологические особенности и криоустойчивость спермы собак

• Автор: Квичко, Илья Львович
• Шифр специальности: 06.02.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Лесные Поляны
• Количество страниц: 110 с.

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Физиологические и биохимические особенности спермы собак
1.2. Механизмы повреждений сперматозоидов животных при криоконсервации
1.3. Криопротекция семени животных при замораживании
1.4. Криоконсервация спермы и искусственное осеменение собак
2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЙ
3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Морфологические и физиологические показатели
спермы собак
3.2. Фосфолипидный состав сперматозоидов собак
3.3. Жирнокислотный состав липидов сперматозоидов собак
3.4. Устойчивость спермы собак к перекисному окислению липидов
3.5. Активность антиоксидантаых ферментов в нативной
и криоконсервированной сперме собак
3.6. Содержание АТФ в нативной и криоконсервированной
сперме собак
3.7. Влияние различных веществ и факторов на устойчивость
спермы собак к замораживанию
3.7.1. Влияние концентрации лактозы
3.7.2. Влияние концентрации глицерина
3.7.3. Эффективность замораживания спермы в зависимости
от концентрации желтка
3.7.4. Криопротективное влияние низкомолекулярных таолов
3.7.5. Влияние синтетических жирорастворимых антиоксидантов
3.7.6. Протективная эффективность поверхностноактивных веществ
3.7.7. Криоустойчивость спермы собак в зависимости от
состава среды

3.8. Криовыживаемость сперматозоидов собак в зависимости
от температуры и способа оттаивания
ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность работы. Искусственное осеменение животных является высокоэффективным методом улучшения породных и продуктивных качеств животных. В настоящее время метод искусственного осеменения сельскохозяйственных животных применяется во всем мире для ускорения генетического прогресса в животноводстве.
Однако, данный метод пока недостаточно широко используется в племенной работе с собаками, хотя в последние годы во многих странах мира возрос интерес к проблемам их искусственного осеменения с использованием замороженной спермы.
С помощью метода искусственного осеменения можно решить ряд проблем в собаководстве. В частности, при использовании замороженной спермы, возможно её накопление от выдающихся производителей и длительное хранение в криобанке в течение многих лет. Использование крио-консервированной спермы позволяет производить её международный обмен без необходимости перевозки самих собак. При этом появляется возможность заказного осеменения сук спермой любого производителя.
Искусственное осеменение позволяет предотвращать возникновение многих заболеваний, передающихся половым путём, так как в состав синтетических разбавителей спермы обязательно вводятся антибиотики и исключается половой контакт животных.
Слабое внедрение в практику данного метода обусловлено низкой фертильностью замороженно-оттаянной спермы собак. В частности, при обычном влагалищном введении криоконсервированной спермы, опло-дотворяемость сук не превышает 30-40%.
Биологические причины данного явления изучены пока очень слабо и требуют дальнейших всесторонних исследований.
В этой связи особую актуальность приобретают вопросы изучения биологических особенностей спермы собак в связи с её криоустойчивостью.
Кроме того, не менее важное значение имеют вопросы разработки более совершенных методов повышения устойчивости спермы собак к

доберман-пинчер).
Свежеполученные полноценные эякуляты с подвижностью не менее 80% предварительно центрифугировали при 5000 об/мин в течение 15 мин для отделения сперматозоидов от семенной плазмы. Затем сперматозоиды отмывали 2 х кратно изотоническим раствором NaCl для более полного удаления семенной плазмы. Все образцы до исследования хранили в замороженном до —21 °С состоянии.
Экстрагирование липидов проводили по методу Folch J. е.а. (1957). Извлекали липиды смесью хлороформ-метанола (2 : 1), при соотношении исследуемого материала и экстрагирующей смеси 1 : 20. Жирные кислоты переводили в состояние метиловых эфиров при температуре 105°С. Введение проб в колонки газо-жидкостного хроматографа проводили с помощью специального микрошприца. Смесь метиловых эфиров, проходя по колонке с газом-носителем, в соответствии с коэффициентом и разделения, удерживается жидкой фазой и разделяется на отдельные жирные кислоты, которые выходя из колонки попадают в детектор, изменяя в нём электропроводность, передаются на самописец и регистрируются в виде пиков. Эти пики идентифицируются и определяется относительное содержание жирных кислот. Определение фосфолипидов в липидных экстрактах сперматозоидов собак проводили с помощью тонкослойной хроматографии на пластинках, покрытых силикагелем фирмы “Wollm”, ФРГ по методу Skripsky V. and Barclay М. (1982).
Определение концентрации липидных гидроперекисей в образцах спермы
Липидные гидроперекиси - это промежуточные продукты перекис-ного окисления липидов. Для определения концентрации липидных гидроперекисей в образцах измеряют УФ-поглощение липидных экстрактов. Принцип метода основан на интенсивном поглощении конъюгированными диеновыми структурами липидных гидроперекисей в области 232-234 НМ. Определение проводили по методу Гаврилова и Мишкорудной