Совершенствование технологии ускоренного размножения винограда методом in vitro и применение регуляторов роста в условиях in vitro и in vivo

• Автор: Батукаев, Абдулмалик Абдулхамидович
• Шифр специальности: 06.01.08
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 1999
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 403 с. : ил.

МОСКОВСКАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ К.А. ТИМИРЯЗЕВА
На правах рукописи БАТУКАЕВ Абдулмалик Абдулхамидович
Совершенствование технологии ускоренного размножения винограда методом in vitro и применение регуляторов роста в
условиях in vitro и in vivo
Специальность 06.01.08. - виноградарство
Диссертация на соискание ученой степени доктора сельскохозяйственных наук
Научный консультант -доктор сельскохозяйственных наук, профессор К.В. СМИРНОВ
Москва

СОДЕРЖАНИЕ
ЧАСТЬ ПЕРВАЯ
Совершенствование технологии ускоренного размножения винограда
методом in vitro
Введение
Глава 1. Культура изолированных тканей и органов растений in vitro (обзор литературы)
1.1. История развития метода in vitro и области его применения
1.2. Основные методы клонального микроразмножения растений
(in vitro)
1.2.1. Индукция пролиферации пазушных меристем
1.2.2. Развитие адвентивных побегов из ткани экспланта
1.2.3. Регенерация растений из каллуса
1.3. Основные этапы клонального микроразмножения растений
in vitro
1.3.1. Регенерация растений из апикальной меристемы
1.3.2. Укоренение микропобегов
1.4. Освобождение растений от вирусных заболеваний
1.5. Факторы, влияющие на процесс регенерации и клональное
микроразмножение in vitro
1.6. Адаптация растений при пересадке в нестерильные условия
1.7. Хранение пробирочных растений
Глава 2. Цель, задачи, объект, методика и условия проведения
исследований
2.1. Цель и задачи исследований
2.2. Объект исследований
2. 3. Организация и методика проведения работы
2.3.1. Подготовка и стерилизация исходного материала
2.3.2. Приготовление питательных сред
2.3.3. Работа в стерильном боксе
2.3.4. Условия культивирования
2.4. Элементы учетов и методы обработки полученных данных
Глава 3. Введение эксплантов винограда в культуру in vitro и их развитие на этапе микроразмножения
3.1. Введение в культуру in vitro
3.2. Регенерация растений из апикальной меристемы
3.3. Влияние минерального состава питательной среды на развитие
эксплантов винограда
3.4. Влияние регуляторов роста на развитие эксплантов винограда в условиях in vitro
3.4.1. Фаза удлинения побегов
3.4.2. Этапы укоренения побегов винограда in vitro
Резюме
Глава 4. Адаптация растений винограда in vitro при пересадке в
нестерильные условия in vivo
4.1. Адаптация растений винограда в условиях in vitro
4.2. Адаптация растений винограда в условиях in vivo
4.2.1. Перевод пробирочных растений в нестерильные условия
4.2.2. Влияние температуры, света и влажности воздуха при адаптации растений полученных in vitro
4.2.3. Изучение возможности значительного повышения коэффициента размножение винограда
4.2.4. Применение регуляторов роста в период адаптации растений винограда в условиях in vitro (сосуд-пакетах)

первичной культуры тканей или органов зависит весь дальнейший процесс микроразмножения. Обогащение питательных сред биологически активными добавками провоцирует развитие спор микроорганизмов. Это позволяет отобрать и исключить все эксплантаты, содержащие скрытую инфекцию (Beaushesne G., 1980).
Основными компонентами питательной среды являются углеводы, минеральные соли и физиолого-активные вещества (Трушечкин В. Г., Высоцкий В. А., 1979; Vain S., 1968).
В питательных средах в качестве источника углеродов используют сахарозу или глюкозу. Щелкунова С. Е. (1973) указывает, что применение сахарозы больше способствовало неорганизованному росту у эксплантатов малины (каллусообразованию). Тогда как использование глюкозы, наоборот, более благоприятно? как для начального морфогенеза, так и для дальнейшего развития структур.
Minotta G. (1981) установил, что на пролиферации побегов сливы наиболее эффективное действие оказывала сахароза в концентрации 15-20 г/л. На стадии укоренения изучали действие фруктозы, галактозы, глюкозы, сахарозы и лактозы в различных концентрациях и сочетаниях. Лучшие результаты были получены для глюкозы в концентрации 20; 40 г/л, фруктозы — 20 г/л, галактозы 20; 40 г/л, а также для сочетаний галактозы и лактозы — 20 и 10 г/л, глюкозы, фруктозы, сахарозы — 10; 10 и 10 г/л и галактозы, лактозы и сахарозы —14; 6 и 6 г/л соответственно.
Из макроэлементов, входящих в состав питательной среды, отличительное преимущество придают две азотосодержащие соли: KNO3 и NH4NO3. Сочетание аммонийного и нитратного азота оптимально как для процессов неорганизованного роста, так и для процессов органогенеза и особенно соматического эмбриогенеза.