Микобиота водоросли Ascophyllum nodosum (Phaeophyceae, Fucaceae) в Белом и Баренцевом морях

• Автор: Коновалова, Ольга Петровна
• Шифр специальности: 03.02.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 144 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Общие сведения о морских грибах g
1.2. Экологические группы морских грибов -J
1.3. Общее представление о грибах, обитающих на морских водорослях
1.4. Молекулярные методы изучения микобиоты морских водорослей
1.5. Исследования ассоциации Mycophycias ascophylli с Ascophyllum nodosum и Pelvetia canaliculata 14 Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Характеристика объектов исследования
2.2. Изучение биологии Stigmidium ascophylli и прямые наблюдения микобиоты Ascophyllum nodosum
2.3. Исследование культивируемой части микобиоты Ascophyllum nodosum
2.4. Экспериментальные методы изучения изолятов
2.5. Молекулярные методы исследования микобиоты Ascophyllum nodosum 38 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 3. БИОЛОГИЯ STIGMIDIUM ASCOPHYLLI - СИМБИОНТА ASCOPHYLLUM NODOSUM
Глава 4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОВЕРХНОСТНОЙ МИКОБИОТЫ ASCOPHYLLUM NODOSUM МЕТОДАМИ ПРЯМЫХ 55 МИКРОСКОПИЧЕСКИХ НАБЛЮДЕНИЙ
Глава 5. РЕЗУЛЬТАТЫ ВЫЯВЛЕНИЯ МИКОБИОТЫ ASCOPHYLLUM NODOSUM МЕТОДОМ ПОСЕВОВ НА ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ
5.1. Общий список и таксономия выделенных видов go
5.2. Микобиота сопутствующих грунтов gg
5.3. Поверхностная микобиота водорослей
5.4. Эндофитная микобиота водорослей
5.5. Сравнение результатов всех посевов и обсуждение
Глава 6. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ НЕКОТОРЫХ ИЗОЛЯТОВ
6.1. Рост некоторых изолятов на средах различного состава
6.2. Прорастание конидий видов родов Acremonium и Plectosporium в

морской воде
6.3. Исследования роста некоторых изолятов на средах разной солености
6.4. Изучение уровня экспрессии гена малого белка теплового шока Hspl2 как показателя адаптации к морским условиям
Глава 7. УТОЧНЕНИЕ СИСТЕМАТИЧЕСКОГО ПОЛОЖЕНИЯ НЕКОТОРЫХ ВИДОВ И МОРФОТИПОВ
7.1. Молекулярная идентификация гриба-симбионта разных экологических форм Ascophyllum nodosum
7.2. Уточнение видовой принадлежности изолятов рода Cadophora
7.3. Уточнение видовой принадлежности Altemaria-подобных морфотипов
7.4. Видовая идентификация изолятов из порядка Hypocreales ю' ЗАКЛЮЧЕНИЕ ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ ПРИЛОЖЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ
фукусовые водоросли являются эдифш<а10рами ЛИ10ральных в
арктических морях (Baarrtoh, 1970). Их зарос„ .
животных, а поверхность „х MJI0M0B _ субг1рат m pmm
перифитона. Грнбы могут участвовать в образов™ различие ассоциаций с живыми водорослями, как патогены или симбионты, и сапротрофы (Kohlmeyer, КоЫгнеует 1979) з всего разнообразия ассоциаций „„рскцх в„д„рослей с грибами дт6от «итерееиои и малоизучеппой я,я,стоя облита,„а, еимбиотичеекая связь. Примером „кой ассоциации является сожительство эндофитного аскомицета SHmUtшш «софт <с„ц„п)
ГГ/ Т””“” Пт0РШМ северных морей - фукусовыми водорослями
Л.сорНуЧшп md„um (L.) Lelohs и Єфаіа camlkulaa (L ) Dcne M Thur Тмой Tm
»существования аскомицета и водоросли-макрофита называют микофпкобиозом (Kohlmeyer, Volkmann-Kohlmeyer, Ш2) щ
известна многие аспекты ее биологии остаются неизученным, (ОагЬагу, Decker, 2001)
Вид A mdmum „.тересен тем, „о помимо микофикобиоза с грибом, он обрадует несколько беитонлейсгониых экологических форм (экад), которые обьггно обитает в УСЛОВИЯХ, нехарактерных для типичной прикрепленной формы (Максимова, Мюге 2007) Это свойство, а также анатомическое строение А. „1ли,ное от друт„х ф!вд
позволяет предполагать, что присутствие гриба , талломе водоросли влияет „а эволюцию И адаптивные способности данного вида.
Помимо симбионта в талломах водоросли „витает множество других грибо, _ салротрофов, Видовой состав и функции этого сообществ, ранее не изучались, в целом мнкобиота бурых водорослей, , ,„сле, фувусовь1х „Сследовшас1 ’
несистематически (Бубнова, Киреев, 2009, Zucearo, 2008). На проблему филогении морских грибов и „X роли в С0„6щесішк отсутс1вует т точка S№> я л
), однако несомненно, что морские грибы являются неисследованным еще резервуаром новых для „ауки видов „ биологически активных веществ (Пивкин, 2010)
В связи с миотообрадием функций, ввшолняемых грибам, в морских сообществах (Kohlmeyer, Kohlmeyer, 1979), изучение морских фибов представляете, крайне важным как с теоретической течки зрения <для n0H„MaH1M „ эюлюцш
функционирования морских сообществ) тяк и ттттст ,
да* их возможного практического
применения.

Использованные среды: Среда для выделения и первичного отсева - аскофиллум-агар, собственной разработки.
Среды для определения - сусло-агар (СА) на основе морской и пресной воды; овсяной агар (ОА) на основе пресной воды, агар Чапека (ЧА) и агар Чапека с низким содержанием сахарозы («голодный», ГЧА) на основе морской и пресной воды, картофельно-морковный агар (РСА) на основе пресной воды.
Стоит отметить тот факт, что культуры, которые хорошо развивались на средах с морской водой, вырастали и на средах на основе пресной воды. Некоторые штаммы росли только на средах с морской водой.
Замечания к культуральным методам
Исследования влажных камер представляются неполньми, потому что в течение недели после начала инкубации на поверхности талломов массово развиваются гифомицеты (особенно род Асгетотит). Это совершенно не противоречит результатам остальных посевов, а наоборот, подтверждает их, но это не дает возможности увидеть плодовые тела облигатных морских грибов, если таковые вырастут. Для получения более полной картины талломы во влажных камерах необходимо инкубировать в течение как минимум 3 месяцев (Копытина, 2009). С другой стороны, возможно на аскофюшуме в Белом море не растут настоящие морские грибы, образующие плодовые тела (кроме Stigm.id.ium ансоркуШ), Во всяком случае, наши предыдущие исследования их не обнаружили (Коновалова и др., в печати).
В исследованиях поверхностной микобиоты возникла одна проблема: на
поверхности водорослей, отобранных на литорали Кислой губы, в условиях значительного
сероводородного заражения, присутствовали некие бактерии, по всей вероятности
факультативные анаэробы, так как отсеву они не поддались. Эти бактерии поглотили агар
из питательной среды, оставив там только альгиновый матрикс. Это не затруднило рост
грибов, наоборот, в чашках, заполненных жидкой средой, развивались нетипичные и
очень интересные виды, но отсутствие агара сделало практически невозможным отсев
колонии в чистую культуру. Так что большая часть грибов из чашек Петри, подвергшихся
нашествию неведомых бактерий, осталась неидентифицированной, или определенной
только до рода. Тем не менее, это интересный результат, требующий осмысления и развития темы.
Что касается посевов эндофитной микобиоты, то здесь существует проблема, практически не решаемая, но известная, и поэтому не особенно неприятная в большинстве случаев. Дело в том, что дрожжи, имеющие слизистый чехол или капсулу, не поддаются действию 70% этанола и гипохлорита натрия. Поэтому они развиваются на авизованных