Использование соевого шрота для получения биологически активных веществ и оценка их функциональной активности

• Автор: Хабибулина, Наталья Викторовна
• Шифр специальности: 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 182 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР
1.1. Общая характеристика сои
1.1.1.Применение сои в народном хозяйстве
1.1.2. Биохимический состав сои
1.1.3. Технологии переработки сои
1.2. Соевые ингибиторы протеаз
1.2.1. Общая характеристика
1.2.2. Физико-химические свойства и структура
1.2.3. Биологическая роль ингибиторов протеаз
1.2.4. Методы выделения и очистки ингибиторов протеаз
1.3. Изофлавоноиды
1.3.1. Общая характеристика
1.3.2. Биологическая роль изофлавоноидов
1.3.3. Биосинтез и метаболизм изофлавоноидов
1.3.4. Методы выделения, очистки и анализа изофлавоноидов
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования
2.2. Реагенты
2.3. Методы анализа
2.3.1. Определение влажности образца
2.3.2. Количественное определение азотсодержащих веществ в белковых растворах
2.3.3. Определение активности ферментов
2.3.4. Количественное определение углеводов
2.3.5. Определение содержания нуклеиновых кислот
2.3.6. Определение индекса растворимости азота
2.3.7. Определение содержания изофлавоноидов
2.3.8. Определение общей молокосвертывающей активности препаратов
2.3.9. Определение жироудерживающей способности (ЖУС)
2.3.10. Определение жироэмульгирующей способности (ЖЭС)
2.3.11. Определение антиоксидантной активности соединений

2.4. Методы исследования
2.4.1. Методика проведения экстракции растворимых веществ из соевого шрота
2.4.2. Методика проведения концентрирования вакуум - выпариванием
2.4.3. Методика проведения осаждения белковых веществ из водных, водноспиртовых и водно-ацетоновых растворов
2.4.4. Методика проведения процесса ультрафильтрации
2.4.5. Методика проведения процесса молекулярно-ситовой хроматографии
2.4.6. Методика проведения ионного обмена
2.4.7. Методика проведения жидкость-жидкостной экстракции
2.4.8. Методика проведения ферментативного гидролиза
2.4.9. Методика проведения гель-электрофореза в полиакриловом геле
2.4.10. Методика проведения культивирования микроорганизмов
2.4.11. Выявление живых и мертвых клеток грибов и дрожжей
2.4.12. Методика определения токсичности с применением тест-культуры инфузорий
Теггакутепа руп$огтх$
ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ И ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
3.1. Подбор последовательности стадий переработки соевого шрота с получением фракций, содержащих изофлавоноиды, высокомолекулярную фракцию белковых веществ и ингибиторов протеаз
3.2. Исследование процесса очистки экстракта изофлавоноидов
3.2.1. Исследование очистки концентрата изофлавоноидов методом ионного обмена
3.2.2. Исследование процесса очистки концентрата изофлавоноидов методом жидкость-жидкостной экстракции
3.3. Разработка стадий выделения и очистки соевых ингибиторов протеаз
3.3.1. Исследование разделения ингибиторов мембранными методами
3.3.2. Выбор технологического оформления стадии ультрафильтрации
3.3.3. Исследование процесса осаждения ингибиторов
3.3.4. Исследование процесса очистки фракций ингибиторов
3.3.5. Биоконверсия отходов, образующихся при получении изофлавоноидов, изолята
белка и ингибиторов протеаз из соевого шрота
3.4. Оценка функциональной активности полученных препаратов изофлавоноидов и

ингибиторов протеаз
3.4.1. Исследование функциональной активности изофлавоноидов в отношении каталитической активности ферментных препаратов
3.4.2. Изучение функциональной активности соевых ИФ и ингибиторов протеаз в качестве защитных соединений от ультрафиолетового излучения и пероксида водорода
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
Приложение 1. Материальный баланс комплексной переработки соевого шрота с получением биологически активных веществ (изолята белка, изофлавоноидов, ингибиторов протеаз)
Приложение 2. Расчёт технико-экономических показателей цеха по переработке соевого шрота с получением биологически активных веществ (изолята белка, изофлавоноидов,
ингибиторов протеаз) мощностью 5 ООО тонн/год по исходному сырью
Приложение 3. ИК-спектры интермедиатов ферментных препаратов и субстратов с
изофлавоноидами
Приложение 4. Лабораторный регламент на комплексную переработку соевого шрота с получением соевых изофлавоноидов, ингибиторов протеаз и изолята белка

жет действовать в антиэстрогенной манере, конкурируя с эстрадиолом за связывание с рецептором эстрогена и, таким образом, подавляя экспрессию зависимых от эстрогена генов. Альтернативно, генистеин может ингибировать эстрогенную активность, уменьшая биодоступность эстрадиола [141].
Другие исследования, в которых изофлавоноидное содержание соевого белка изменялось, показали, что ИФ ингибируют потерю костной ткани в период периме-нопаузы и постменопаузы у женщин. Кроме того, в ответ на потребление сои, уровень ИФ в сыворотке, как было обнаружено, связан у женщин с уменьшением холестерина и с увеличением уровня белка, связывающего половые гормоны [33].
Климакс связан с дефицитом эстрогена и сопровождается такими симптомами, как потеря костной массы и атеросклероз. Обычно для лечения этих симптомов используется гормонозаместительная терапия, однако она не лишена побочных эффектов. Поэтому альтернативной терапией является употребление природных фитоэстрогенов. ИФ имеют как эстрогенный, так и антиэстрогенный эффект, в зависимости от типа ткани. Различные ткани организма (например, клетки репродуктивной системы и костная ткань) имеют рецепторы эстрогена разного типа, причем сродство изофлавоноидов к ним различно, поэтому ИФ могут оказывать различный эффект на разные ткани [142].
В дополнение к их эффектам на связанные с гормонами болезни, ИФ, как было показано, препятствуют росту раковых клеток путем ингибирования активности ти-розинкиназы и ДНК-топоизомеразы и регуляцией апоптоза. Их потенциальная анти-окислительная активность иллюстрируется ингибированием активностей 5-липоксигеназы и цикло-оксигеназы окисления липопротеина низкой плотности (LDL), что может поспособствовать понижению риска сердечно-сосудистых болезней и определенных видов рака. ИФ проявляют защищающие сосуды эффекты, снижают уровень холестерина. Уменьшение концентраций холестерина и триглицеридов в сыворотке оказывает благоприятное воздействие на почки, предотвращающая воспалительные процессы за счет активации NO-синтазы. Это указывает на уменьшение клинических и биохимических отклонений в болезнях, связанных с нарушением липидного обмена, за счет потребления с пищей соевого белка [143, 144].
Противовоспалительная и противовирусная активности, как сообщалось, таюке присущи некоторым изофлавоноидным молекулам. Хотя большинство исследований поддерживает гипотезу о благоприятном лечебном воздействии ИФ, потенциальные